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杭州瑞析科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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G1600A-G1600AX 毛細(xì)管電泳儀
  • G1600A-G1600AX 毛細(xì)管電泳儀

貨物所在地:浙江杭州市

地: 德國(guó)

更新時(shí)間:2024-11-05 21:00:07

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G1600AX 毛細(xì)管電泳儀(capillary electrophoresis,CE)又稱高效毛細(xì)管電泳(high performance capillary electrophoresisHPCE) 是一類以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場(chǎng)為驅(qū)動(dòng)力的新型液相分離技術(shù)。毛細(xì)管電泳實(shí)際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平,并可進(jìn)行單細(xì)胞分析,乃單分子分析。

G1600AX 毛細(xì)管電泳儀(CE) 為帶電物質(zhì),比如生物分子、小分子堿性或酸性藥物和離子提供快速分離、的效率和分離度,而這些分離使用 HPLC 常常難以實(shí)現(xiàn)。CE 還適用于樣品量非常有限的分離應(yīng)用,所需要的緩沖液要比液相色譜或離子色譜少得多。使用單機(jī)模式,作為 CE/MS 的分離組件、或者作為液相色譜的輔助和正交分析技術(shù)。

 

G1600AX毛細(xì)管電泳儀主要維修部件:

1.高壓電源

部件號(hào):0950-2393

High Voltage Power Supply
Part Number: 0950-2393
The High Voltage Power Supply is a sealed module which contains the circuitry to
produce a maximum of ±30 kV. The supply is limited to 300 μA for safety.

2.空氣過濾器,貨號(hào):3150-0619,孔徑:5微米

Part Number:3150-0619 Air Filter, 5 um

3.漏液傳感器 訂貨號(hào):5061-3356 CE leak sensor assembly

4.空氣泵,訂貨號(hào):G1600-67922 Airpump

5.毛細(xì)管卡套及毛細(xì)管卡盒標(biāo)簽

G1600-60002 Capillary Cassette
G1600-94302 Cassette Label

G1600AX 毛細(xì)管電泳儀卡套

內(nèi)徑為 50 μm 的標(biāo)準(zhǔn)毛細(xì)管的準(zhǔn)直接口(部件號(hào) G1600-60210)

氘燈

訂貨號(hào):2140-0585 D2 Lamp

G1600AX 毛細(xì)管電泳儀性能參數(shù)

加壓系統(tǒng)
進(jìn)樣口壓力在–100 到+100 mbar的范圍可編程
可采用1 bar沖洗,也可用2–12 bar高壓沖洗
在毛細(xì)管入口和出口端可對(duì)樣品瓶加2–12 bar的高壓
進(jìn)樣模式
自校正進(jìn)樣系統(tǒng),可在入口端或出口端進(jìn)樣
編程范圍: 長(zhǎng)達(dá)10000秒
壓力進(jìn)樣: –100 到+100 mbar
電動(dòng)進(jìn)樣: –30 到+30 kV
自動(dòng)進(jìn)樣器/餾分收集器
50位樣品瓶盤
從毛細(xì)管入口和出口端對(duì)所有樣品瓶可以隨機(jī)進(jìn)樣

G1600AX 毛細(xì)管電泳儀物理參數(shù)

規(guī)格
寬度: 35 cm
高度: 59 cm
厚度: 51 cm
重量: 35 kg
電源要求
電源電壓: 100-240 V,
更高300 W
電源頻率: 50-60 Hz
接口
LAN、CAN、RS232、遠(yuǎn)程控制、
模擬信號(hào)輸入(1V, 20 bit, 與A/D轉(zhuǎn)
換器集成)、模擬信號(hào)輸出
電泳功率
電壓范圍:
0 到± 30 kV 電源可設(shè)定
電流:0 - 300 μA可設(shè)定
功率:0 - 6 W可設(shè)定,恒電壓、
電流和功率操作
外部水浴控溫范圍為10–40 °C.
(不冷凝條件下,更低水浴溫度+1 °C)
補(bǔ)充緩沖液
為入口端和出口端樣品瓶重新注入新配制的緩沖液的衛(wèi)星站,實(shí)現(xiàn)自動(dòng)
連續(xù)操作??蛇x擇緩沖液液面高度。
樣品瓶
100 μL (聚丙烯或玻璃),采用可重復(fù)密封的壓蓋瓶蓋
1 mL (聚丙烯),采用可重復(fù)密封的壓蓋瓶蓋
2 mL (玻璃),采用可重復(fù)密封的壓蓋瓶蓋
毛細(xì)管卡套
采用帕爾帖元件的高速強(qiáng)制空氣冷卻器
溫度范圍: 室溫以下10 °C,更高60 °C (卡套更低溫度10 °C)
更短的毛細(xì)管總長(zhǎng)度:33 cm
毛細(xì)管外徑365 μm
檢測(cè)器
實(shí)時(shí)紫外二極管陣列檢測(cè)器(190–600 nm)
可控溫
波長(zhǎng)分辨率:1 nm
響應(yīng)時(shí)間: 0.025 到10 s
光源: 預(yù)定位氘燈或高亮度燈
信號(hào): 采用化學(xué)工作站同時(shí)記錄多達(dá)8個(gè)信號(hào)和采集全光譜圖
靈敏度: 1 μM 4-羥基-乙酰-苯酮,進(jìn)樣條件50 mbar • 5 sec,
3 x 50 μm鼓泡毛細(xì)管,信噪比>6*
(20 mM 硼酸緩沖液,pH 9.3, 25 kV)
基線噪聲: <50 μAU (于響應(yīng)時(shí)間2 秒)*
線性動(dòng)態(tài)范圍: 1x104 (3 x 50 μm鼓泡毛細(xì)管)*

配置清單

1

G1600A 

CE1600毛細(xì)管電泳儀,帶自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶,緩沖液瓶

CE1600 Capillary Electrophoresis Instrument. Installation Qualification kit, High Sensitivity Detection Cell kit and Services. 

2

Chemsation

色譜工作站

 ChemStation Edition Workstation. Software-only, withPC.

3

Diode Array Detector 

二極管陣列檢測(cè)器

4

M41 

安裝費(fèi)

Installation Charges

 

5

儀器安裝

儀器尺寸以及重量

 

35kg重

注意事項(xiàng)
1. 所有儀器設(shè)備必須安放在平整堅(jiān)固的表面,標(biāo)準(zhǔn)高度距地面約90CM,并保證沒有任何震動(dòng)影響儀器的日常使用。
2. 請(qǐng)保證相鄰的儀器設(shè)備之間存在至少10CM(4英寸)的間距,并在后部留出足夠的空間(約15公分即6英寸)這樣可以保證儀器設(shè)備的基本散熱需要,并提供足夠的日常維修維護(hù)空間。
3. 請(qǐng)避免將儀器設(shè)備安裝在溫度,濕度變化比較明顯的位置,比如陽光直射區(qū)域,靠近敞開窗口的區(qū)域和空調(diào)出風(fēng)口附近等

 

6

操作手冊(cè)

G1600AX 毛細(xì)管電泳儀毛細(xì)管電泳標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
開機(jī)前準(zhǔn)備:如進(jìn)一個(gè)樣品,取樣品瓶七個(gè),分別用記號(hào)筆標(biāo)號(hào),1.2.4.6.7.8.號(hào),分別用移液槍加入
1號(hào):buffer,加蓋
2號(hào):buffer,加蓋
4號(hào):緩沖溶液,加蓋
5號(hào):緩沖溶液,加蓋
6號(hào):緩沖溶液,加蓋
7號(hào):樣品溶液,加蓋(加樣前過濾凈化)
8號(hào):空,不加蓋(廢液瓶)
9號(hào):空瓶,加蓋(氣沖洗)

(注意:各個(gè)樣品瓶加樣完成后超聲15分鐘以上,加蓋,瓶蓋蓋嚴(yán)平整,3號(hào)空位,49號(hào)空位,11-48號(hào)共可裝載38個(gè)樣品)
打開儀器電源
打開軟件,進(jìn)入instrument,選擇inti進(jìn)行初始化
方法編輯
進(jìn)入method,選擇eidt entire method ,選擇前兩項(xiàng)后確認(rèn),填寫實(shí)驗(yàn)名稱并確認(rèn),設(shè)置毛細(xì)管兩端與瓶底距離為4mm,設(shè)置柱溫盒溫度,選擇inlet(進(jìn)口)為4號(hào),outlet(出口)為5號(hào),確認(rèn)。Inlet換成7號(hào)(樣品),選擇加壓時(shí)間(即進(jìn)樣時(shí)間),再將7號(hào)換成5or6號(hào)。
進(jìn)入Preconditioning,選擇eidrt,設(shè)置1行,inlet為2號(hào),outlet為8號(hào),模式flush,2號(hào),時(shí)間1min;2行flrsh,,inlet 換為1號(hào),時(shí)間5min,3行wait,時(shí)間5min,4行flush,5號(hào),時(shí)間20min(同次測(cè)定2,3行可省略)。
進(jìn)樣模式,設(shè)置進(jìn)樣壓力50mbar,時(shí)間4sec,確認(rèn)。Swith設(shè)置為on,正負(fù)調(diào)節(jié)為postive,電壓值30kv,確認(rèn)。設(shè)置檢測(cè)波長(zhǎng),帶寬,確認(rèn),收集為off。確認(rèn)。保存方法。
樣品注冊(cè),選擇小瓶圖標(biāo),選擇sample information ,選擇樣品瓶號(hào),輸入樣品信息,確認(rèn),
關(guān)機(jī)
進(jìn)入instrument,,選擇maintenance進(jìn)行維護(hù)。
選擇inlet,設(shè)置為2號(hào)(即水瓶),再點(diǎn)擊藍(lán)色氣瓶圖標(biāo),flash(10-20min)。
選擇inlet,設(shè)置為號(hào)9號(hào),(即氣沖洗瓶)再點(diǎn)擊藍(lán)色氣瓶

 

 

按方法里的位置置放對(duì)應(yīng)的,1和2只能是Buffer,樣品放在10位以后的位置

檢測(cè)毛細(xì)管是否通暢:1號(hào)位加水,2號(hào)位加透明空瓶,flush 2分鐘,觀察2號(hào)出口是否有液滴

檢查水及BUFFER是否好

兩端加上水,flush查好基線

兩端加上BUFFER,F(xiàn)LUSH查看基線

并加方法中使用的電壓查看基線

對(duì)比基線,確認(rèn)是哪里不好,純凈水or buffer or 氘燈能量不足還是檢測(cè)器其它地方?

 

7

常見故障排除

 

 

 

毛細(xì)管電泳常見故障排除

現(xiàn)象

可能的原因

解決方案

電流不穩(wěn)定

波動(dòng)或無電流

 

 

 

 

毛細(xì)管中形成氣泡

沖洗毛細(xì)管,程序升高電壓以限制初始加熱,和或?qū)彌_液脫氣

毛細(xì)管堵塞

用吸收溶液(如NaOH)沖洗毛細(xì)管。當(dāng)觀察200nm的在線信號(hào)時(shí).應(yīng)該看到基線上有"臺(tái)階",如果仍然堵著,就用注射器或高壓氣體手工沖洗

毛細(xì)管斷裂

更換毛細(xì)管

緩沖液瓶中沒有緩沖液或者裝錯(cuò)緩沖液

灌裝/改變緩沖液瓶

大體積進(jìn)樣

正常情況。分祈過程中電流應(yīng)該穩(wěn)定。

基線不穩(wěn)定

基線有毛剌

 

 

緩沖液沉淀

采用0.20.45µm的濾膜過濾緩沖液

緩沖液中有微小的氣泡

用超聲波或真空對(duì)緩沖液進(jìn)行脫氣

樣品沉淀

驗(yàn)證樣品組分在緩沖液中有足夠的溶解度

基線噪聲大

 

 

 

 

毛細(xì)管接口中的狹縫堵塞

用甲醇或水清洗狹縫。在放大鏡下觀察

氘燈老化

使用DAD測(cè)試來測(cè)定氘燈的光強(qiáng)度和工作時(shí)間。若必要就更換新的氘燈

數(shù)據(jù)采集速率太高

確定峰寬,需要的話降低采集速率

參比波長(zhǎng)設(shè)置不合適

分析過程中采集1^光譜圖。在不影響樣品吸收的情況下 采用盡可能低的波長(zhǎng)。并且采用寬的帶寬

緩沖液在檢測(cè)波長(zhǎng)有吸收

使用UV吸收更低的緩沖液,如磷酸鹽和硼酸鹽,特別是在低于210nm檢測(cè)時(shí)

基線飄移

 

 

毛細(xì)管準(zhǔn)直定位不合適

重新在檢測(cè)器塊中安裝毛細(xì)管卡套

溫度未平衡

打開頂蓋之后要有10-20分鐘的平衡時(shí)間

氘燈剛剛開啟

開啟氘燈后要有15-30分鐘的平衡時(shí)間

分離效率差

寬色譜峰

 

樣品超載

降低樣品濃度或進(jìn)樣量

過量的焦耳熱

降低電壓、緩沖液電導(dǎo)或毛細(xì)管內(nèi)徑

變形的色譜峰

 

樣品和緩沖液的離子淌度不匹配

調(diào)節(jié)淌度或增大緩沖液和樣品的電導(dǎo)差異

樣品超載

降低樣品濃度或進(jìn)樣量

峰拖尾

 

樣品吸附到毛細(xì)管壁

使用葉I極值、高的緩沖液濃度、聚合物添加劑或涂層毛 細(xì)管

 

 

現(xiàn)象

可能的原因

解決方案

遷移時(shí)間重現(xiàn)性差

樣品吸附到毛細(xì)管壁

緩沖液導(dǎo)致的EOF變化(特別是磷酸鹽和表面活性劑) 或樣品吸附

老化毛細(xì)管并要有足夠的平衡時(shí)間。更換毛細(xì)管

管壁電荷滯后

在高(或低)PH條件下老化毛細(xì)管和使用低(或高)PH運(yùn)行緩沖液引起

避免PH差異 要有足夠的平衡時(shí)間

緩沖液組分變化

 

 

 

電解導(dǎo)致的PH變化

更新緩沖液

緩沖液揮發(fā)

扣緊緩沖液瓶蓋和降低樣品盤溫度

再生溶液廢液流進(jìn)了出口緩沖液瓶

使用單獨(dú)的樣品瓶收集廢液

再生溶液遺留在緩沖液瓶中

先將毛細(xì)管插入單獨(dú)的緩沖液瓶或水瓶中

緩沖液瓶液面不*

生成層流

使緩沖液瓶液面*。如果不更新緩沖液,就不要使用入 口瓶沖洗毛細(xì)管

不同批次毛細(xì)管的硅羥 基含量不同

內(nèi)壁電荷差異和EOF波動(dòng)

測(cè)定EOF并歸一化

溫度變化

粘度和EOF變化

使用可控溫的毛細(xì)管的系統(tǒng)

皡面積重現(xiàn)性差

突然施加高電壓

緩沖液受熱膨脹和樣品排出

程序升高分離電壓或在樣品之后注射緩沖液

樣品揮發(fā)

增加樣品濃度和峰面積

扣緊樣品瓶蓋和義或降低樣品盤溫度

儀器局限

系統(tǒng)增加了進(jìn)樣時(shí)間的權(quán)重

增加進(jìn)樣時(shí)間

峰面積重現(xiàn)性差

樣品記憶效應(yīng)

外部進(jìn)樣

使用進(jìn)樣端平整光滑的毛細(xì)管。除去毛細(xì)管端口外面的聚 酰亞胺涂層

簡(jiǎn)單地將毛細(xì)管伸進(jìn)樣 品中引起的零進(jìn)樣

外部進(jìn)樣

不能*消除。增大進(jìn)樣量以消除該效應(yīng)

樣品吸附到毛細(xì)管壁

峰形變差(拖尾)未洗脫樣品

改變緩沖液的PH。增大緩沖液濃度 使用添加劑.比如纖維素或涂層毛細(xì)管

信噪比低

積分誤差

優(yōu)化積分參數(shù)。增大樣品濃度。使用峰高

毛細(xì)管環(huán)境的溫度變化

粘度和進(jìn)樣量的變化

使用可控溫的毛細(xì)管的系統(tǒng)

 

8

毛細(xì)管電泳實(shí)驗(yàn)常見問題解答

 

 

 

毛細(xì)管電泳實(shí)驗(yàn)常見問題解答

目次

現(xiàn)象

檢查

檢查現(xiàn)象/結(jié)果

可能原因

解決方法

方案

1

無樣品峰出現(xiàn)

檢查電流是否穩(wěn)定

沒有電流

毛細(xì)管堵塞或斷裂

用水沖洗毛細(xì)管,并觀察是否有水流出,若無水流出請(qǐng)拆下卡盒檢查毛細(xì)管兩端和窗口是否斷裂;毛細(xì)管沒有斷裂的話可以用水反向高壓沖洗以試圖解決此問題。緩沖溶液需要過濾,將樣品過濾或者離心去除其中的顆粒。

電流波動(dòng)很大,直至幾乎消失

緩沖溶液中有氣泡產(chǎn)生或者區(qū)帶中樣品析出

將緩沖溶液超聲脫氣,如果還有此現(xiàn)象發(fā)生,則可能是樣品區(qū)帶有析出,可以通過降低樣品濃度/延長(zhǎng)ramp time來試圖解決這一問題;對(duì)于在緩沖溶液中溶解度不高的樣品則需要在緩沖溶液中加入添加劑以解決此問題。

電流初始值較小,后逐漸增大

樣品進(jìn)樣量過大

減少進(jìn)樣量,通常進(jìn)樣參數(shù)設(shè)置在0.5psi,5sec左右

電流正常

樣品濃度過低

使用高濃度樣品測(cè)試,如果無法解決則有可能是以下其他原因

檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置不正確

請(qǐng)確認(rèn)被分析物的特征吸收,檢查方法中的檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置

分離極性錯(cuò)誤

對(duì)于蛋白樣品,請(qǐng)注意蛋白在分離條件下其PI及所帶電荷;對(duì)于核酸樣品,通常條件下會(huì)帶負(fù)電荷

樣品在毛細(xì)管內(nèi)壁吸附

對(duì)于蛋白及核酸樣品應(yīng)盡量采用涂層毛細(xì)管分離,或采用pH條件或動(dòng)態(tài)涂層防止樣品吸附。

光學(xué)檢測(cè)器或光纖損壞

進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)樣品的測(cè)試,如果沒有對(duì)應(yīng)的結(jié)果出現(xiàn),則有可能存在硬件問題,請(qǐng)工程師

檢查毛細(xì)管窗口

是否有透明窗口

忘記開毛細(xì)管窗口或窗口位置不正

重新開毛細(xì)管檢測(cè)窗口,或?qū)⒋翱谡{(diào)整到正確位置

2

樣品峰出現(xiàn)拖尾

 

 

樣品在毛細(xì)管內(nèi)壁吸附

對(duì)于蛋白及核酸樣品應(yīng)盡量采用涂層毛細(xì)管分離,或采用pH條件或動(dòng)態(tài)涂層防止樣品吸附。

3

樣品峰形不對(duì)稱

毛細(xì)管入口

 

毛細(xì)管入口切口不平齊

重新切割毛細(xì)管入口,注意毛細(xì)管切割方法,不可以用力過猛或反復(fù)刮擦

更改樣品溶劑

 

緩沖溶液與樣品溶液電解率差別過大

可采用緩沖溶液作為樣品溶劑

4

樣品峰過寬

降低樣品進(jìn)樣量

有改善

樣品濃度太大

可降低樣品濃度或減少進(jìn)樣量

無改善

樣品本身性質(zhì)不均一

此原因主要是針對(duì)蛋白樣品,小分子樣品發(fā)生的概率較低

5

遷移時(shí)間不穩(wěn)定

 

出峰時(shí)間不穩(wěn)定且無規(guī)律

緩沖溶液與毛細(xì)管內(nèi)壁平衡較慢

每次樣品運(yùn)行之間避免用NaOH沖洗毛細(xì)管

出峰時(shí)間依次后延

樣品中有物質(zhì)易發(fā)生吸附

首先在每次樣品運(yùn)行之前用0.1N NaOH短時(shí)間沖洗毛細(xì)管,看遷移時(shí)間能否重復(fù),如果效果不佳請(qǐng)使用涂層毛細(xì)管來改善結(jié)果或者將樣品再次處理,以去除樣品中易吸附的組分

6

峰形和出峰時(shí)間不穩(wěn)定

更換緩沖溶液種類

峰形和時(shí)間穩(wěn)定

緩沖溶液不穩(wěn)定,易電解,或者是樣品在原緩沖溶液條件下不穩(wěn)定

更換其它種類的緩沖溶液

峰形和出峰情況仍不穩(wěn)定

樣品中物質(zhì)易在毛細(xì)管內(nèi)壁吸附

可采用涂層毛細(xì)管來克服此問題,或?qū)悠愤M(jìn)行前處理

7

電流泄漏(Current Leakage)

檢查毛細(xì)管是否在窗口處斷裂

毛細(xì)管斷裂

毛細(xì)管內(nèi)緩沖溶液流出造成電流泄漏

更換新毛細(xì)管,并用水清洗光纖頭及檢測(cè)窗口

毛細(xì)管無斷裂

實(shí)驗(yàn)環(huán)境濕度過大

使用抽濕機(jī),并打開儀器Cartridge Cover;如果沒有抽濕機(jī)可以使用空調(diào),在濕度過大的情況下可在儀器關(guān)閉時(shí)放置干燥劑,但是在儀器運(yùn)行時(shí)一定要將干燥劑取出

8

無法加氣壓

檢查瓶塞是否蓋緊或更換瓶塞

更換后問題解決

瓶塞老化,失去彈性

請(qǐng)購買新的瓶塞,并注意瓶塞不可烘干,只能自然晾干

瓶頸處有液體,導(dǎo)致瓶塞易滑

向瓶中裝液體時(shí)不要過滿,也不要沾濕瓶頸

若瓶塞無問題,可先采用真空方式,若真空方式可以使用,但壓力仍不可用

壓力系統(tǒng)問題

請(qǐng)工程師

9

遷移時(shí)間可重復(fù)但峰面積重復(fù)性不好

重新切割毛細(xì)管兩端

若問題解決

毛細(xì)管入口處不平

重新切割毛細(xì)管入口,注意毛細(xì)管切割方法,不可以用力過猛或反復(fù)刮擦

問題依然存在,嘗試電動(dòng)進(jìn)樣

若電動(dòng)進(jìn)樣可保持重現(xiàn),則壓力控制或氣路存在問題

請(qǐng)工程師

10

毛細(xì)管或電極易折斷

檢查瓶蓋是否老化

 

瓶蓋老化

購買新的瓶蓋

電極是否不垂直

電極不垂直

將電極拉直

11

冷卻液泄漏

檢查卡盒內(nèi)墊圈和卡子

 

漏裝或裝錯(cuò)順序

嚴(yán)格按照操作手冊(cè)上的安裝順序安裝

儀器內(nèi)部管路密封不嚴(yán)

請(qǐng)工程師

12

PDA光強(qiáng)低

檢測(cè)窗口Aperture型號(hào)

 

使用了窄細(xì)縫的Aperture

請(qǐng)?jiān)谑褂肈AD檢測(cè)器時(shí)務(wù)必使用標(biāo)有8的Aperture

13

譜圖基線不穩(wěn)定

先用0.1N NaOH沖洗毛細(xì)管,然后不進(jìn)樣運(yùn)行原方法

基線改善

則為樣品中物質(zhì)有吸附

重新預(yù)處理樣品或更改電泳條件

基線未改善

毛細(xì)管內(nèi)有強(qiáng)烈吸附,或緩沖體系不穩(wěn)定

更換新的毛細(xì)管,不進(jìn)樣,只運(yùn)行緩沖,觀察基線情況

更換新毛細(xì)管后基線仍然不穩(wěn),可采用Run Buffer A測(cè)試

基線改善

緩沖溶液與毛細(xì)管內(nèi)壁平衡較慢

更換緩沖溶液種類,若基線變化對(duì)檢測(cè)無干擾,可保持原來電泳條件

基線無改善

檢測(cè)光源或其他光學(xué)器件不正常

請(qǐng)工程師

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