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自1982年第一款重組蛋白藥物進(jìn)入市場(chǎng)(第一款人胰島素¹實(shí)現(xiàn)商業(yè)化)以來，生物制藥領(lǐng)域見證了蛋白質(zhì)治療藥物數(shù)量的持續(xù)擴(kuò)大。例如，單克隆抗體(mAb)、生長因子、激素是目前用于治療癌癥、HIV、多發(fā)性硬化癥等多種疾病的生物治療藥物²。這些生物治療藥物的復(fù)雜生產(chǎn)工藝涉及精確的蛋白質(zhì)定量，以確保最終配方的療效和質(zhì)量。此外，蛋白質(zhì)還是研究酶活性、基因表達(dá)調(diào)控、信號(hào)通路和疾病機(jī)理的各種生物分子檢測(cè)的關(guān)鍵成分。所有執(zhí)行這些檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室均會(huì)進(jìn)行蛋白質(zhì)定量分析，以揭示復(fù)雜的生物分子機(jī)制。

根據(jù)所需的精度、動(dòng)態(tài)定量范圍、與潛在污染物(洗滌劑、還原劑和溶劑)的相容性以及蛋白質(zhì)間的差異，目前有多種方法可用于蛋白質(zhì)定量。這些方法包括直接蛋白質(zhì)紫外吸收測(cè)量法(A₂₈₀)、銅基測(cè)定法(BCA和Lowry方法)、蛋白質(zhì)-染料復(fù)合物吸收(Bradford)、熒光基測(cè)定和更復(fù)雜的測(cè)定，如ELISA或Western-Blot測(cè)定。

在本研究中，選擇熒光法是基于其優(yōu)異的靈敏度、特異性以及特別適合于復(fù)雜生物樣品中低豐度蛋白質(zhì)的檢測(cè)。使用珀金埃爾默F(xiàn)L 6500™熒光光譜儀監(jiān)測(cè)NanoOrange^®熒光團(tuán)與BSA非共價(jià)相互作用時(shí)觀察到的熒光增強(qiáng)，并構(gòu)建了標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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