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1 背景

亞硝酸鹽和硝酸鹽是常見致癌物，過量攝入會(huì)影響人體健康，造成中毒，導(dǎo)致嬰幼兒高鐵血紅蛋白癥，孕婦流產(chǎn)、高血壓、甲狀腺腫大等。除此之外，亞硝酸鹽和硝酸鹽可在人體內(nèi)合成具有強(qiáng)致癌作用的亞硝胺類化合物。

奶粉是嬰幼兒主要食物來源之一。其食品衛(wèi)生安全性必然受到人們的廣泛關(guān)注。若攝入的奶粉中亞硝酸鹽的含量超標(biāo)，會(huì)對(duì)嬰幼兒身體健康產(chǎn)生較大威脅。乳及乳制品中亞硝酸鹽和硝酸鹽主要來源于飼料、飼養(yǎng)環(huán)境、生產(chǎn)用水及人為摻雜所致。

GB 2762-2022《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限。量》標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)嬰幼兒配方奶粉中的亞硝酸鹽、硝酸鹽含量要求非常嚴(yán)格，限值分別為2.0 mg/kg、100 mg/kg。因此，準(zhǔn)確測(cè)定奶粉中的硝酸鹽與亞硝酸鹽的含量對(duì)于奶制品的食品安全具有重要意義。

本方案參考國(guó)家強(qiáng)制標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.33-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定》中的第一法-離子色譜法，采用盛瀚新一代D120+離子色譜，對(duì)奶粉中亞硝酸鹽和硝酸鹽進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果滿足國(guó)標(biāo)要求，且準(zhǔn)確高效，靈敏度和重復(fù)性好。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1試劑和材料

除非另有說明，所用試劑均為優(yōu)級(jí)純。

水：超純水（18.2 MΩ•cm）。

凈化柱：SHINE C18柱（1cc），SHINE Ag柱（1cc），SHINE Na柱（1cc）

2.2標(biāo)準(zhǔn)溶液

亞硝酸根標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（100 mg/L）：準(zhǔn)確稱取0.0150g亞硝酸鈉，用水稀釋定容于100 mL容量瓶中，混勻備用。

硝酸根標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1000 mg/L）：市售標(biāo)準(zhǔn)溶液。

亞硝酸根和硝酸根混合標(biāo)準(zhǔn)中間液（NO2-：1.0 mg/L，NO3-：10.0 mg/L）：準(zhǔn)確移取亞硝酸根和硝酸根標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液各1.0 mL于100 mL容量瓶，用水定容至刻度，混勻備用。

亞硝酸根和硝酸根混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：由亞硝酸根和硝酸根混合標(biāo)準(zhǔn)中間液用水稀釋得到亞硝酸根濃度為0.02 mg/L、0.04 mg/L、0.06 mg/L、0.08 mg/L、0.10 mg/L、0.20 mg/L，硝酸根濃度為0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L、1.0 mg/L、2.0 mg/L標(biāo)準(zhǔn)曲線，現(xiàn)用現(xiàn)配。

2.3樣品的制備

提?。悍Q取2.5 g（精確到0.01 g）樣品，置于100 mL具塞錐形瓶中，加水約80mL，搖勻，超聲30 min，取出放置至室溫，定量轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，加入3 %乙酸溶液2 mL，于4℃放置20 min，取出放置至室溫。溶液經(jīng)濾紙過濾，取上清液備用。

凈化：取上述備用的上清液約15 mL，通過0.45 μm水性濾膜針頭過濾器、C18柱，棄去前面3 mL（如果氯離子大于100 mg/L，則需要依次通過針頭濾器、C18柱、Ag柱和Na柱，棄去前面7 mL。對(duì)于氯離子含量不高的樣品，不建議使用Ag柱和Na柱。因?yàn)锳g柱是優(yōu)先去除氯離子，但是當(dāng)氯離子含量不高時(shí)，剩余的Ag離子會(huì)吸附亞硝酸根離子，導(dǎo)致其回收率偏低。），收集后面洗脫液待測(cè)。

凈化小柱使用前需進(jìn)行活化，活化過程為：C18柱（1.0cc）使用前依次用10 mL甲醇、15 mL水通過，靜置活化30 min。Ag柱（1.0cc）和Na柱（1.0cc）用10 mL水通過，靜置活30 min。

3 色譜條件

淋 洗 液：

0-20 min，10 mM KOH

20-35 min，50 mM KOH

35-40 min，10 mM KOH；

流    速：1.0 mL/min；

色 譜 柱：SH-AS19；

柱    溫：30℃；

抑制電流：125 mA；

進(jìn) 樣 量：50 μL。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1校準(zhǔn)曲線

標(biāo)準(zhǔn)曲線譜圖和線性方程如下，NO2-在0.02-0.20 mg/L范圍內(nèi)，NO3-在0.2-2 mg/L范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)均大于0.999，線性良好。

4.2重復(fù)性測(cè)試

將亞硝酸根和硝酸根混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.02 mg/L和0.2 mg/L）連續(xù)進(jìn)樣7次，系統(tǒng)適應(yīng)性測(cè)試（SST）結(jié)果如下圖，保留時(shí)間RSD=0.02%，峰面積RSD≤0.67%，方法具有很好的重復(fù)性。

4.3實(shí)際樣品測(cè)定

奶粉樣品中亞硝酸鹽、硝酸鹽測(cè)試結(jié)果如下所示，NO2-未檢出，未列表格。

NO3-測(cè)試結(jié)果：

樣品中添加0.06 mg/L亞硝酸根、0.6 mg/L硝酸根濃度水平標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)試結(jié)果如下，亞硝酸根和硝酸根回收率符合要求。

NO2-加標(biāo)測(cè)試結(jié)果：

NO3-加標(biāo)測(cè)試結(jié)果：

樣品加標(biāo)測(cè)試譜圖：

5 結(jié)論

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用盛瀚新一代D120+離子色譜儀，亞硝酸鹽和硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液具有很好的線性，定性定量重復(fù)性好，滿足《GB 5009.27-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定》要求。