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食用油中苯并(a)芘測(cè)定解決方案

檢測(cè)樣品:食用油

檢測(cè)項(xiàng)目:苯并(a)芘

方案概述:將實(shí)施的《GB2762-2022食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中污染物限。量》中規(guī)定,食用油中苯并(a)芘限。量為10µg/kg。本實(shí)驗(yàn)參考《GB5009.27-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中苯并(a)芘的測(cè)定》,采用青島盛瀚的高效液相色譜L-3000系列,對(duì)食用油中苯并(a)芘的液相色譜測(cè)定法進(jìn)行方法驗(yàn)證。

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更新時(shí)間2023年02月24日

上傳企業(yè)青島盛瀚色譜技術(shù)有限公司

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1.背景

苯并(a)芘(benzo(a)pyrene,BaP),又名3,4-苯并芘,結(jié)構(gòu)式如下圖1所示,屬于多環(huán)芳烴中的一種。苯并(a)芘是強(qiáng)致癌物,被世衛(wèi)組織定為1類致癌物。


食品中的苯并(a)芘來源比較復(fù)雜,主要有熏烤、高溫油炸、包裝材料污染和食品加工過程污染等。食用油中的苯并(a)芘主要來源有原材料帶入和加工過程產(chǎn)生。原材料帶入主要包含原材料種植區(qū)受到工業(yè)污染,在柏油馬路上晾曬油料作物,以及長(zhǎng)途運(yùn)輸過程環(huán)境污染物浸入和包裝容器遷移等。加工過程產(chǎn)生主要包含油料高溫烘烤等工藝處理過程和浸出工藝中溶劑殘留等。


將實(shí)施的《GB 2762-2022 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限。量》中規(guī)定,食用油中苯并(a)芘限。量為10 µg/kg。 本實(shí)驗(yàn)參考《GB 5009.27-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯并(a)芘的測(cè)定》,采用青島盛瀚的高效液相色譜L-3000系列,對(duì)食用油中苯并(a)芘的液相色譜測(cè)定法進(jìn)行方法驗(yàn)證。


2.  儀器和設(shè)備


表1 食品中苯并(a)芘的檢測(cè)所需液相色譜儀器配置

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圖2 盛瀚L-3000液相色譜儀


表2 食品中苯并(a)芘的檢測(cè)所需前處理設(shè)備

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3. 實(shí)驗(yàn)方法


3.1試劑和材料

除非另有說明,所用試劑均為優(yōu)級(jí)純。

乙腈、甲醇、正己烷:色譜純。

水:超純水(18.2 MΩ•cm)。

凈化柱:中性氧化鋁柱22g/60mL


3.2標(biāo)準(zhǔn)溶液

苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100 mg/L):自購100 mg/L苯并(a)芘乙腈標(biāo)準(zhǔn)溶液。


苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.0 mg/L):吸取0.1 mL苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(100 mg/L)于10 mL容量瓶,乙腈定容混勻備用。


苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)工作液:把苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)中間液(1.0 mg/L)用乙腈稀釋得到0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL標(biāo)準(zhǔn)曲線,現(xiàn)用現(xiàn)配。


3.3樣品的制備

提?。悍Q取0.4 g(A:0.4032 g,B:0.4014 g),加入5 mL正己烷,渦旋30 s,待過柱。


凈化:中性氧化鋁柱用30 mL正己烷活化,棄去不要。然后加入提取液,并用茄形瓶收集,再用50 mL正己烷洗脫,繼續(xù)收集凈化液。


濃縮:將凈化液40℃旋蒸至1-2 mL,轉(zhuǎn)移至離心管,用正己烷洗滌茄形瓶2次,洗滌液同樣轉(zhuǎn)移至離心管,40℃氮吹近干,0.4 mL乙腈渦旋復(fù)溶,過0.45 μm濾膜,上機(jī)檢測(cè)。


4. 色譜條件

流動(dòng)相:水:乙腈=12:88;

流速:1.0 mL/min;

色譜柱:Shinesil-C18 4.6×250,5μm;

柱溫:35℃;

檢測(cè)波長(zhǎng):激發(fā)波長(zhǎng)384 nm,發(fā)射波長(zhǎng)406 nm;

進(jìn)樣量:20 μL。

5. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

5.1典型譜圖

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圖3  1.0 ng/mL苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)溶液


5.2校準(zhǔn)曲線

0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL的苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)工作液線性方程:Y=216.17653X-5.92576。相關(guān)因子:R=0.9999934。


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圖4 苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)曲線


5.3重復(fù)性測(cè)試

苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 ng/mL)系統(tǒng)適應(yīng)性測(cè)試(SST)結(jié)果如下圖,保留時(shí)間RSD=0.08%,峰面積RSD=0.95%。


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圖5 苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)溶液(1 ng/mL)系統(tǒng)適應(yīng)性測(cè)試(SST)結(jié)果


5.4實(shí)際樣品測(cè)定

花生油樣品苯并(a)芘測(cè)試色譜圖及上機(jī)檢測(cè)結(jié)果如下所示。

表3 食品中苯并芘的檢測(cè)所需前處理設(shè)備

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圖6 實(shí)際樣品苯并(a)芘測(cè)試譜圖


平行樣品的絕對(duì)差值為0.022 μg/kg,與平行樣品算數(shù)平均值的比值為2.74%,小于20%,符合《GB 5009.27-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯并(a)芘的測(cè)定》的要求。


6. 結(jié)論

上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,采用盛瀚L-3000高效液相色譜儀,苯并(a)芘標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度范圍在0.5 ng/mL~20.0 ng/mL內(nèi),具有很好的線性,線性相關(guān)系數(shù)為0.9999934,定性定量重復(fù)性良好,可滿足《GB 5009.27-2016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯并(a)芘的測(cè)定》要求。



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