人抗髓鞘相關糖蛋白抗體ELISA檢測試劑盒 MAG AbELISA試劑盒
- 公司名稱 上海撫生科技發(fā)展有限公司
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- 產(chǎn)地 人抗髓鞘相關糖蛋白抗體ELISA檢測試劑盒 MAG AbELISA試劑盒
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- 更新時間 2015/7/23 5:53:31
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規(guī)格:48T/96T,可以提供定量和定性。
有效期:2-8℃,六個月
各種種屬 :人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊;標本 :血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水等 ;
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孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O·D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
Elisa試劑盒用于檢測未知抗體的間接法: 用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。 ↓ 加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照) ↓ 于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。 ↓ 其余步驟同“雙抗體夾心法”。
ELISA試劑盒常用的四種方法
1.直接法測定抗原 將抗原吸附在載體表面;加酶標抗體,形成抗原—抗體復合物; 加底物。底物的降解量=抗原量。
2.間接法測定抗體 將抗原吸附于固相載體表面;加抗體, 形成抗原-抗體復合物;加酶標抗體;加底物。 測定底物的降解量=抗體量。
3.雙抗體夾心法測定抗原 將抗原免疫*種動物獲得的抗體吸附于固相表面; 加抗原,形成抗原-抗體復合物; 加抗原免疫第二種動物獲得的抗體,形成抗體抗原抗體復合物; 加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體); 加底物。底物的降解量=抗原量。
4. 競爭法測定抗原 將抗體吸附在固相載體表面;
(1) 加入酶標抗原;
(2),(3)加入酶標抗原和待測抗原; 加底物。對照孔與樣品孔底物降解量的差=未知抗原量。
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