74904-- RNeasy Plant Mini Kit (50)
參考價 | ¥ 4080 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 北京華夏遠洋科技有限公司
- 品牌 Qiagen/凱杰
- 型號 74904--
- 產(chǎn)地 進口/國產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 代理商
- 更新時間 2015/9/11 23:17:56
- 訪問次數(shù) 885
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原理
RNeasy Plant Mini Kit 適用于從各種植物和真菌樣本中分離包括病毒RNA在內(nèi)的總RNA(見圖"Detection of Viruses from a Variety of Plant Species by RT-PCR" 和表"Selected samples processed with RNeasy Plant Mini Kit")。
規(guī)格: | 帶1.5ml和2ml收集管的Mini分離柱 |
樣本類型: | 植物和真菌的細胞或組織 |
樣本量: | 10-100 mg 組織,100 - 1 x 107 細胞* |
制備時間: | 30 分鐘 |
結(jié)合能力: | zui多100 µg RNA |
產(chǎn)量(100 mg 組織)†: | |
擬南芥 | 35 µg |
玉米葉 | 25 µg |
番茄葉 | 65 µg |
煙草葉 | 60 µg |
洗脫體積: | 30-100 µl |
*請致電QIAGEN咨詢實驗放大的方法。 †:由于發(fā)育階段、生長條件等不同,獲得產(chǎn)量將有所不同。由于RNeasy流程富集濃縮>200nt的RNA,因此RNA產(chǎn)物不包括5s rRNA、tRNAs或其他低分子量RNAs。
RNeasy技術(shù)將高效的異硫氰酸胍裂解技術(shù)與快速高純度的硅膠膜純化技術(shù)相結(jié)合,使總RNA分離變得簡單化。該技術(shù)無需通過氯化銫(CsCl)梯度離心或氯化鋰/乙醇沉淀。RNeasy樣本制備技術(shù)已被*注冊,純化得到的核酸可用于任何分子檢測或其他下游應(yīng)用中,而無侵犯的風險。
RNeasy Plant Mini Kit提供QIAshredder分離柱(QIAshredder columns),用于勻質(zhì)化和通過離心法過濾高粘度的植物或真菌裂解物,同時采用RNeasy mini離心柱對RNA進行純化。各種污染物,如:多聚糖等被洗掉,經(jīng)洗脫的RNA可直接用于各種下游應(yīng)用(見圖"Tissue Specificity of Histone H4 Expression")。 RNeasy試劑盒提供高品質(zhì)RNA,幾乎無DNA殘留。對微量DNA非常敏感的RNA應(yīng)用,殘留的DNA可在RNeasy流程中使用RNase-Free DNase Set方便地通過DNA酶柱上消化去除。
操作流程
細菌樣品裂解后,在裂解液中加入乙醇來提供合適的結(jié)合條件,接著裂解液被上樣到RNeasy硅膠膜上。RNA與硅膠膜結(jié)合,其他各種污染物通過洗滌被有效去除。濃縮的純RNA被洗脫到無RNA酶的水中。
應(yīng)用
經(jīng)RNeasy技術(shù)純化得到的RNA,A260/A280比值可達1.9-2.1*,非常適合于各種下游應(yīng)用,包括:
- Northern雜交、點雜交和狹縫雜交
- RT-PCR(見QIAGEN RT-PCR Systems Overview)
- Real-time RT-PCR(見Quantitect SYBR Green PCR and RT-PCR System)
- 芯片分析(Array analysis)
*測于10mMTris-Cl,pH7.5
Selected samples processed with RNeasy Plant Mini Kit 植物 | |
Anemone sp. Arabidopsis thaliana1 Begonia sp. Beta vulgaris (甜菜)2 Chlamydomonas reinhardii (單細胞藻) 菊花 Clarkia spp.3 Daucus carota (胡蘿卜)4 Diascia sp. Dendranthema sp. Euglena gracilis (單細胞藻) Funaria hygrometrica (苔蘚) Hordeum vulgare (大麥) Lycopersicon esculentum (番茄)5 Malus sp. (蘋果)6 Nicotiana tabacum (煙草) 絲狀真菌類 Acremonium crysogenum9Fusarium avenaceum9 | Oryza sativa (水稻) Pelargonium sp. (天竺葵) Petroselinum crispum (歐芹)7 Pisum sativum (豌豆) Prunus sp. (櫻桃)6 Ranunculus sp. Ribes nigrum (黑加侖) Riccia fluitans (地錢) Sinapis arvensis (芥菜) Solanum tuberosum (土豆)8 Spinacia oleracea (菠菜) Surfinia sp. Triticum aestivum (小麥) Vitis sp. (葡萄樹)6 Zea mays (玉米) |
Young leaves or needles, except as indicated: 1 Flowers, buds, siliques, roots; 2 roots; 3 petals, stamen, stigma, sepals, style; 4 cultured cells; 5 mature flower, expanded leaves, shoot tip, stem, green fruit; 6 budwood; 7 seedlings; 8 dormant tuber; 9 mycelium
引用文獻
1. MacKenzie, D.J., McLean, M.A., Mukerji, S., and Green, M. (1997) Improved RNA extraction from woody plants for the detection of viral pathogens by reverse transcription-polymerase chain reaction. Plant Disease 81, 222.
2. Brandstädter, J., Roßbach, C., and Theres, K. (1994) The pattern of histone H4 expression in the tomato shoot apex changes during development. Planta 192, 69.