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FastDigest快速限制性內(nèi)切酶

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    2011年12月29日 — 賽默飛世爾科技近期推出Thermo Scientific Fermentas FastDigest快速酶,是為快速DNA酶切專門研發(fā)的進(jìn)階版限制性內(nèi)切酶。在30年的內(nèi)切酶研究當(dāng)中,我們積累的限制性內(nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫(kù)是業(yè)內(nèi)的限制性內(nèi)切酶生產(chǎn)菌株庫(kù)之一。大量可供選擇的同裂酶和優(yōu)異的生產(chǎn)能力促進(jìn)了這個(gè)包含176種FastDigest快酶的系統(tǒng)的誕生。

    所有FastDigest快速酶在通用的FastDigest緩沖液和FastDigest Green綠色緩沖液中都具有99%活性,并可在5-15分鐘內(nèi)迅速完成酶切。這就使得任意限制酶組合都能夠在同一反應(yīng)管中同時(shí)反應(yīng),避免了連續(xù)酶切。此外,F(xiàn)astDigest Green綠色緩沖液兼具上樣緩沖液的功能,可直接將反應(yīng)物上樣凝膠電泳,操作更為便利。

    FastDigest快速酶可用于酶切質(zhì)粒、基因組DNA、病毒DNA以及PCR產(chǎn)物。酶切時(shí)間和實(shí)驗(yàn)方案已經(jīng)過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,每種快速酶及其作用的模板都有相應(yīng)的酶切時(shí)間和實(shí)驗(yàn)方案提供。FastDigest系列尤其適合對(duì)于反應(yīng)組分純度、性能穩(wěn)定性和反應(yīng)體系配制簡(jiǎn)單化要求的應(yīng)用。


    特點(diǎn)
    • 所有FastDigest快酶在通用緩沖液中都具有99%活性
    • 5-15分鐘酶切
    • FastDigest通用緩沖液與所有下游應(yīng)用99%兼容
    • 直接上樣凝膠電泳
    • 共有176種FastDigest快酶可供選擇


    應(yīng)用

    • 快速克隆分析
    • 快速制備克隆用DNA
    • PCR產(chǎn)物酶切
    • 快速RFLP基因分型
    • 難切割DNA片段的酶切

    FastDigest 通用緩沖液與所有下游應(yīng)用99%兼容

    DNA/RNA 修飾酶 在FastDigest緩沖液和FastDigest Green綠色緩沖液中的活性
    DNA Polymerase I, E.coli 99%
    Klenow Fragment 99%
    Klenow Fragment, exo 99%
    T7 DNA Polymerase 99%
    T4 DNA Ligase* 75-99%
    FastAPTM Thermosensitive Alkaline Phosphatase 99%
    T4 Polynucleotide Kinase 99%


    通用緩沖液和直接凝膠上樣

    所有FastDigest快酶在FastDigest Green綠色緩沖液中都具有99%活性。此外FastDigest Green綠色緩沖液中還包含密度試劑和兩種示蹤染料,從而可直接將反應(yīng)產(chǎn)物添加到點(diǎn)樣孔中。藍(lán)色染料在1%瓊脂糖凝膠
    中的遷移率與3-5kb DNA片段接近, 并在424nm時(shí)出現(xiàn)激發(fā)峰;而黃色染料在1%瓊脂糖凝膠中的遷移速度稍快于10bp DNA片段,在615nm時(shí)出現(xiàn)激發(fā)峰。

    FastDigest Green綠色緩沖液和無色緩沖液一樣可進(jìn)行高性能的DNA酶切和下游應(yīng)用。對(duì)于需要用熒光激發(fā)進(jìn)行酶切產(chǎn)物分析的應(yīng)用(例如,在紫外光下測(cè)量濃度),我們建議使用無色的FastDigest緩沖液。



    FastDigest Green綠色緩沖液
    含有FastDigest Green綠色緩沖液的反應(yīng)混合物
    A: 電泳前,加入點(diǎn)樣孔中的反應(yīng)混合物;B: 電泳后,在凝膠中得到分離的條帶




    用FastDigest快速酶在FastDigest Green綠色緩沖液中5分鐘內(nèi)進(jìn)行質(zhì)粒DNA的三重酶切和連接
    M:Thermo Scientific Fermentas GeneRuler Express DNA Ladder (#SM1551)
    C:未酶切的質(zhì)粒DNA對(duì)照
    1:在FastDigest緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對(duì)質(zhì)粒DNA進(jìn)行三重酶切;2:在FastDigest緩沖液中的酶切和連接反應(yīng)混合物
    3:在FastDigest Green綠色緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對(duì)質(zhì)粒DNA進(jìn)行三重酶切;4:在FastDigest Green綠色緩沖液中的酶切和連接反應(yīng)混合物

    5分鐘內(nèi)酶切DNA

    • 在1種緩沖液中5-15分鐘內(nèi)可 進(jìn)行雙重和多重酶切
    • 高通量應(yīng)用的理想選擇
    • 所有種類的DNA模板都提供相應(yīng)的酶切時(shí)間:質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA
    • 任何模板都不需要酶切過夜
    • 沒有星活性——無需延長(zhǎng)孵育時(shí)間

    用FastDigest酶和傳統(tǒng)內(nèi)切酶進(jìn)行質(zhì)粒DNA酶切的比較
    M:GeneRulerTM 1kb Plus DNA Ladder;C:未酶切的質(zhì)粒DNA
    1:用FastDigest Xhol 5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA;2:用FastDigest ApaI 5分鐘內(nèi)酶切質(zhì)粒DNA
    3:用FastDigest Xhol和FastDigest ApaI 5分鐘內(nèi)雙酶切質(zhì)粒DNA;4:用Apal酶切質(zhì)粒DNA 1小時(shí)
    5:用Xhol酶切質(zhì)粒DNA 1小時(shí);6:在1X Tango緩沖液中用4倍的ApaI過量酶切質(zhì)粒DNA 1小時(shí),然后在2X Tango緩沖液中用XhoI再酶切1小時(shí)



    雙酶切可節(jié)省超過2個(gè)小時(shí)


    FastDigest限制性內(nèi)切酶為DNA酶建立新的標(biāo)準(zhǔn)
    的生產(chǎn)工藝

    所有生產(chǎn)均在符合歐盟指令和ISPE規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)的D級(jí)潔凈空間內(nèi)進(jìn)行
    ● 嚴(yán)格的質(zhì)控

    ● 依照ISO9001質(zhì)量管理體系和ISO14001環(huán)境管理體系運(yùn)作,確保產(chǎn)品均一性和批間重復(fù)性
    ● IVD產(chǎn)品生產(chǎn)符合ISO13845管理體系標(biāo)準(zhǔn)
    ● 根據(jù)要求進(jìn)行cGMP生產(chǎn)



    的生產(chǎn)工藝


    FastDigest限制性內(nèi)切酶應(yīng)用視頻:/v_show/id_XMzM3MDAxMTcy.html

    如需更多信息請(qǐng)登錄: /fastdigest



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