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Thermo Scientific Phire熱啟動(dòng)II DNA聚合酶

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    Phire® 熱啟動(dòng)II DNA聚合酶的性能超越了市場上所有的Taq熱啟動(dòng)聚合酶。它反應(yīng)速度更快,性能更強(qiáng)勁,可以對長片段進(jìn)行高產(chǎn)量的PCR擴(kuò)增。這些優(yōu)點(diǎn)均來源于的蛋白質(zhì)工程技術(shù)的改造。Phire熱啟動(dòng)II DNA聚合酶帶有一個(gè)的雙鏈DNA結(jié)合域,這個(gè)結(jié)合域可以極大的提高酶與DNA的結(jié)合效率,從而縮短延伸時(shí)間 (10-15s /kb),增進(jìn)產(chǎn)量,且與Taq DNA聚合酶相比,保真度提高了2倍。此外,的熱啟動(dòng)技術(shù)使該酶在標(biāo)準(zhǔn)循環(huán)溫度下即可激活,無需額外處理,實(shí)現(xiàn)“零時(shí)間”激活。這些優(yōu)點(diǎn)使Phire熱啟動(dòng)II DNA聚合酶成為常規(guī)和高通量PCR的理想選擇。Phire在多種PCR儀上均顯示了的性能,包括傳統(tǒng)的熱循環(huán)儀,以及如Piko熱循環(huán)儀這樣的快速PCR儀。


    優(yōu)點(diǎn):

    ■ 快速熱啟動(dòng):無需額外激活步驟
    ■ 快速酶反應(yīng):擴(kuò)增速度是熱啟動(dòng)Taq酶的4倍
    ■ 性能強(qiáng)勁:對抑制劑的耐受程度高,減少了優(yōu)化步驟
    ■ 高產(chǎn)量:高效帶來高產(chǎn)量
    ■ 更長的PCR產(chǎn)物:與任何熱啟動(dòng)Taq酶相比,可以擴(kuò)增更長的DNA片段


    應(yīng)用:

    ■ 熱啟動(dòng)PCR
    ■ 常規(guī)PCR
    ■ 非高保真PCR
    ■ 快速PCR
    ■ 高通量PCR


    完整的PCR實(shí)驗(yàn)方案耗時(shí)少于傳統(tǒng)反應(yīng)的一半(圖1)
    將來自五個(gè)廠家的熱啟動(dòng)DNA聚合酶分別用于擴(kuò)增一段600bp的人類基因組DNA片段。與化學(xué)修飾或使用抗體熱啟動(dòng)技術(shù)的Taq DNA聚合酶(供應(yīng)商A-D)相比,使用Phire熱啟動(dòng)II DNA聚合酶,PCR實(shí)驗(yàn)最多可以快四倍。


    更短時(shí)間內(nèi)獲得超高產(chǎn)量(圖2)
    將來自五個(gè)廠家的熱啟動(dòng)DNA聚合酶用于擴(kuò)增1.5kb的人類cathepsin K基因。僅用29分鐘,Phire熱啟動(dòng)II DNA聚合酶即可擴(kuò)增得到大量的目標(biāo)PCR產(chǎn)物。相比之下,其他四個(gè)重要廠家提供的熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶(A-D)不僅耗時(shí)長,而且產(chǎn)量偏低。

    幾種高性能酶對比:
    對比項(xiàng)目 Phusion高保真DNA聚合酶 Phusion熱啟動(dòng)II高保真DNA聚合酶 Phusion Flash高保真DNA聚合酶 Phire熱啟動(dòng)IIDNA聚合酶
    特點(diǎn) 平端或3’A端 平端 平端 平端 平端
    目標(biāo)片段長度 ≤ 20 kb ≤ 20 kb ≤ 20 kb ≤ 7.5 kb
    熱啟動(dòng)
    推薦延伸時(shí)間 15-30 s/kb 15-30 s/kb 15 s/kb 10-15 s/kb
    校正功能 一般
    保真度 vs. Taq 52x 52x 25x 2x
    形式 單酶 1 -
    Master mix 2 - -
    試劑盒 3 - - -
    1. 單酶: DNA聚合酶,緩沖液,DMSO和MgCl2
    2. Master Mix:2X master mix
    3. 試劑盒:所有必需的PCR反應(yīng)成分包括對照模板和引物


    訂購信息:

    貨號 產(chǎn)品名稱 規(guī)格
    F-122S Phire熱啟動(dòng)II DNA聚合酶 200 x 50μl rxns (或 500 x 20μl rxns)
    F-122L Phire熱啟動(dòng)II DNA聚合酶 1000 x 50μl rxns (或 2500 x 20μl rxns)

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