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Dxy_ PIERCE MAGNETIC CHIP KIT 30 RXNS KIT

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    Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒提供了一種通過(guò)免疫沉淀(染色質(zhì) IP)高效分離染色質(zhì)結(jié)合 DNA 的便利方法,用于隨后通過(guò) PCR 進(jìn)行定量分析。

    磁性 ChIP 試劑盒的特點(diǎn):

    ?快速— 可在約 8 小時(shí)內(nèi)獲得適于進(jìn)行定量 PCR 的純化 DNA
    ?高效且可重現(xiàn)—微球菌核酸酶酶切過(guò)程和細(xì)胞核裂解過(guò)程均經(jīng)高度優(yōu)化
    ?靈敏—只需 10,000 個(gè)細(xì)胞 (1 x 10^4) 即可獲得結(jié)果
    ?低背景—Pierce 蛋白 A/G 磁珠已在不含 DNA 的試劑中進(jìn)行封閉,可極大限度地降低背景
    ?全面—包括優(yōu)化的陽(yáng)性對(duì)照試劑:RNA 聚合酶 II 抗體和 GAPDH 啟動(dòng)子 PCR 引物

    Pierce 磁性染色質(zhì)免疫沉淀分析 (ChIP) 試劑盒含有足夠的試劑,可使用優(yōu)化的方案采用適當(dāng)對(duì)照品進(jìn)行 30 次 ChIP 檢測(cè)。試劑盒中包含的試劑可用于裂解細(xì)胞、捕獲蛋白-DNA 復(fù)合物,逆轉(zhuǎn)交聯(lián)以及分離 DNA。封閉 Pierce 蛋白 A/G 磁珠具有的結(jié)合容量和較低的非特異性背景,可與很多種抗體一起使用。這些微珠可與磁力架或自動(dòng)化平臺(tái)(例如,Thermo Scientific KingFisher 儀器)一起用于手動(dòng)工作流程。還提供經(jīng)驗(yàn)證適用于 ChIP 且具備質(zhì)量保證的抗體,與 Pierce 磁性 ChIP 試劑盒配合使用。

    包括:
    試劑盒含有用于染色質(zhì)制備、IP 以及 DNA 純化的試劑,同時(shí)也包含陽(yáng)性對(duì)照品(抗體和引物)

    需要:
    體內(nèi)交聯(lián)劑(如甲醛)、微量吸頭超聲波儀(如 Misonix 超聲波儀 3000)、符合 ChIP 要求的抗體、目標(biāo) DNA 序列的 PCR 引物、PCR 預(yù)混液(如果需要 qPCR,則含有一種染料,如 SYBR Green)和 qPCR 儀器

    應(yīng)用:
    ? 通過(guò) PCR 或 ChIP-Seq 確定基因組 DNA 上特異性蛋白-DNA 相互作用的位點(diǎn)
    ? 監(jiān)測(cè)組蛋白修飾或化學(xué)制劑對(duì) DNA 結(jié)合的影響

    要想成功進(jìn)行 ChIP 檢測(cè),需要在檢測(cè)靶標(biāo)基因組 DNA 之前執(zhí)行多個(gè)關(guān)鍵步驟(交聯(lián)、染色質(zhì)制備、免疫沉淀)。單獨(dú)來(lái)講,ChIP 實(shí)驗(yàn)方案中的每一步在優(yōu)化時(shí)都很費(fèi)時(shí)間。Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒簡(jiǎn)化了 ChIP 流程,可獲得準(zhǔn)確且可重現(xiàn)的結(jié)果。

    蛋白-DNA 復(fù)合物首先在體內(nèi)與甲醛交聯(lián)。試劑盒含有的試劑可以裂解細(xì)胞,并可提取和溶解交聯(lián)復(fù)合物。然后,將復(fù)合物和特異性抗體放在一起進(jìn)行孵育,最后用 Pierce 蛋白 A/G 磁珠進(jìn)行分離。在逆轉(zhuǎn)交聯(lián)和酶切蛋白后,純化所得 DNA 片段,然后準(zhǔn)備進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)或定量 PCR。

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