DH12S 感受態(tài)
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- 公司名稱 上海語純生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產地
- 廠商性質 經(jīng)銷商
- 更新時間 2024/11/4 16:48:30
- 訪問次數(shù) 38
產品標簽
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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產品簡介
大腸桿菌 DH12S 來源于 DH10B,可用于生產特別純的單鏈 DNA;同時,M13KO7 輔助噬菌體可
用來生成單鏈 DNA。由于該菌株是 endA+基因型,其所生產的單鏈 DNA中很少污染雙鏈 DNA。在
F'中表達的 LacI 蛋白可以調控 lac 啟動子的表達。此外,由于消除了 mcrA,mcrBC,mrr,hsdRMS
等限制系統(tǒng),該菌株可以高效地克隆大部分基因組序列。DH12S 帶有 lacZΔM15 突變,可以進行藍
白斑篩選實驗。經(jīng) pUC18 質粒轉化檢測,DH12S 感受態(tài)細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
DH12S
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 ΔlacZΔM15 ΔlacX74 recA1 deoR Δ(ara, leu)7697 araD139 galU galK rpsL
F' [proAB+ lacIqZΔM15]
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留;
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用;
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保優(yōu)良轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。