總巰基檢測試劑盒-微孔板
具體成交價以合同協(xié)議為準
- 公司名稱 上海貝博生物科技有限公司
- 品牌
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/11/25 13:10:00
- 訪問次數(shù) 85
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保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項
開蓋后組份按要求條件保存。
有效期
6個月
檢測方法
分光光度計
適用樣本
血清、血漿、尿液、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液、組織裂解液
產(chǎn)品應用
分光光度計
儀器準備
1.分光光度計
2.恒溫水浴鍋
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰盒
2.恒溫水浴鍋
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰盒
試劑準備
1.生理鹽水
2.純水
3.蛋白定量試劑盒
2.純水
3.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.96孔板
2.吸頭
2.吸頭
使用注意事項
1.試劑B2干粉開蓋使用前先敲入瓶底部，防止開蓋時灑落導致?lián)p失。
2.血清/培養(yǎng)液等液體樣本直接檢測或用生理鹽水稀釋后檢測。
3.檢出限為10μmol/L。
2.血清/培養(yǎng)液等液體樣本直接檢測或用生理鹽水稀釋后檢測。
3.檢出限為10μmol/L。
使用方法
1. 樣品準備
組織樣本：按照組織質(zhì)量（g）：生理鹽水體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL 生理鹽水）進行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
血清，培養(yǎng)液：直接測定。
2. 試劑配制：
使用前，準確吸取10ml試劑B1加入試劑B2干粉，充分溶解混勻，即成試劑B工作液，4℃避光保存。
3. 酶標儀預熱30min，調(diào)節(jié)波長至412nm，蒸餾水調(diào)零。
4. 總巰基的測定
按下表在96孔板中加入試劑，對照孔每個樣品均做。
混勻，25℃靜置10min，測定412nm 吸光值。
ΔA=A 測定-A 對照。
【注】：
? 如果OD值太大，可以將樣品用試劑A稀釋后再檢測。
5. 計算
血清中總巰基含量（mmol/L）
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷V 樣×103
=5800×ΔA
組織細胞中總巰基含量（mmol/g）
（1）按樣本重量計算
總巰基含量（μmol/g 鮮重）
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）
=5.8×ΔA÷W
（2）按樣本蛋白濃度計算
總巰基含量（μmol/mg prot）
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷（V 樣×Cpr）
=5.8×ΔA÷Cpr
【注】：
V 反總：反應總體積，0.2mL；
V 樣：反應中樣品體積，0.04mL；
V 樣總：加入提取液體積，1mL；
W：樣品質(zhì)量，g ；
Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；
103 ：1mmol/ L=103μmol/ L
組織樣本：按照組織質(zhì)量（g）：生理鹽水體積(mL)為1：5~10 的比例（建議稱取約0.1g 組織，加入1mL 生理鹽水）進行冰浴勻漿，然后8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
血清，培養(yǎng)液：直接測定。
2. 試劑配制：
使用前，準確吸取10ml試劑B1加入試劑B2干粉，充分溶解混勻，即成試劑B工作液，4℃避光保存。
3. 酶標儀預熱30min，調(diào)節(jié)波長至412nm，蒸餾水調(diào)零。
4. 總巰基的測定
按下表在96孔板中加入試劑，對照孔每個樣品均做。
混勻，25℃靜置10min，測定412nm 吸光值。
ΔA=A 測定-A 對照。
【注】：
? 如果OD值太大，可以將樣品用試劑A稀釋后再檢測。
5. 計算
血清中總巰基含量（mmol/L）
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷V 樣×103
=5800×ΔA
組織細胞中總巰基含量（mmol/g）
（1）按樣本重量計算
總巰基含量（μmol/g 鮮重）
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）
=5.8×ΔA÷W
（2）按樣本蛋白濃度計算
總巰基含量（μmol/mg prot）
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷（V 樣×Cpr）
=5.8×ΔA÷Cpr
【注】：
V 反總：反應總體積，0.2mL；
V 樣：反應中樣品體積，0.04mL；
V 樣總：加入提取液體積，1mL；
W：樣品質(zhì)量，g ；
Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL；
103 ：1mmol/ L=103μmol/ L
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