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化工儀器網(wǎng)>產品展廳>生命科學儀器>細胞培養(yǎng)儀器>細胞培養(yǎng)系統(tǒng)> 溶液(0.25%,不含EDTA)

溶液(0.25%,不含EDTA)

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蛋白提取,細胞分析

保存溫度
-20℃保存
注意事項
1、長期存放請分裝后-20℃保存。
2、避免反復凍融。
3、凍存后溶解時注意重新混勻。
有效期
一年
儀器準備
1. 細胞培養(yǎng)設備
2. 離心機
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
試劑準備
1.PBS 緩沖液 或者HBSS
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
使用注意事項
1.盡量減少反復凍融的次數(shù),以免失效。
2.在使用溶液的過程中,要特別注意避免溶液被細菌污染。
3.溶液消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4.以下步驟僅供參考,以實際使用習慣為準。
使用方法
1. 貼壁細胞的消化:
(1) 吸除培養(yǎng)液,用無菌PBS、Hanks液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
(2) 加入少量溶液,略蓋過細胞即可。室溫放置0.5~2min,不同的細胞消化時間有所不同。
(3) 顯微鏡觀察,如果細胞明顯收縮并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化;或者用槍頭吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除溶液。加入含血清的細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
(4) 如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則再加入溶液重新消化。
(5) 如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用溶液把細胞全部吹打下來。1000~2000g離心1min,沉淀細胞,盡量去除溶液后,加入含血清的培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。

2. 組織的消化:
不同的組織需要消化的時間差異很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。


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