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細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)

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細(xì)胞劃痕

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伊萊博生物科技(上海)有限公司,公司總部位于上海長江軟件園。2024年1月與上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院成立聯(lián)合研究中心,主要以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ),專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)創(chuàng)新,建立了包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等學(xué)科的研究服務(wù)體系,為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。


目前已建成并投入使用的實(shí)驗(yàn)室面積近2800平方米,包含基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)平臺、組學(xué)實(shí)驗(yàn)平臺以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺,基本能夠滿足科研課題研究的全流程。


伊萊博生物擁有專業(yè)的技術(shù)支持和實(shí)驗(yàn)操作人員團(tuán)隊(duì),核心成員來自中科院、復(fù)旦、交大、同濟(jì)等國內(nèi)重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),能夠提供前沿的、完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)咨詢與服務(wù)。


為了響應(yīng)國家大力發(fā)展基礎(chǔ)研究的號召,推動(dòng)實(shí)驗(yàn)科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步,伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢,為廣大科研工作者提供實(shí)驗(yàn)技術(shù)培訓(xùn)服務(wù),從理論和實(shí)操兩個(gè)部分,培養(yǎng)其科研思維以及解決問題的能力,為今后的科研工作奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。








免疫學(xué);ELISA試劑盒,抗體,生化試劑,相關(guān)試劑。原代細(xì)胞,傳代細(xì)胞,及培養(yǎng)試劑

實(shí)驗(yàn)步驟

標(biāo)記六孔板

marker筆在六孔板底部畫平行線,平行線之間的距離0.5cm,為了保證后續(xù)拍照位置是相同的;

鋪板

細(xì)胞重懸鋪板,密度控制在第二天長滿,若過夜后細(xì)胞wq長滿,也可以適當(dāng)延長培養(yǎng)時(shí)間,但如果細(xì)胞密度已經(jīng)很大,盡量重新鋪板,因?yàn)榭赡苓^一天后細(xì)胞太滿,會導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)逐漸變差,后續(xù)細(xì)胞可能不遷移而是凋亡;

制造劃痕

第二天用直尺比著使用10ul槍頭制造劃痕,劃痕方向與標(biāo)志線垂直,最好保持力度一致,盡量一次性劃完,然后PBS沖洗3次,洗去漂浮的細(xì)胞

為了減少細(xì)胞增殖所引起的假陽性結(jié)果,降低細(xì)胞增殖對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,將wq培養(yǎng)基換成無血清培養(yǎng)基和低血清培養(yǎng)基(FBS2%繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞);

拍照

拍照前最好用PBS沖洗3次,一般認(rèn)為24h為細(xì)胞的一個(gè)周期,所以檢測時(shí)間最好不要超過一個(gè)周期的時(shí)間,按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕





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