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大鼠骨髓來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞體外培養(yǎng)

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伊萊博生物科技(上海)有限公司,公司總部位于上海長江軟件園。2024年1月與上海大學(xué)醫(yī)學(xué)院成立聯(lián)合研究中心,主要以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ),專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)創(chuàng)新,建立了包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等學(xué)科的研究服務(wù)體系,為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。


目前已建成并投入使用的實(shí)驗(yàn)室面積近2800平方米,包含基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)、組學(xué)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái),基本能夠滿足科研課題研究的全流程。


伊萊博生物擁有專業(yè)的技術(shù)支持和實(shí)驗(yàn)操作人員團(tuán)隊(duì),核心成員來自中科院、復(fù)旦、交大、同濟(jì)等國內(nèi)重點(diǎn)高校及科研機(jī)構(gòu),能夠提供前沿的、完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)咨詢與服務(wù)。


為了響應(yīng)國家大力發(fā)展基礎(chǔ)研究的號(hào)召,推動(dòng)實(shí)驗(yàn)科學(xué)領(lǐng)域的進(jìn)步,伊萊博生物充分利用積累多年的科研資源優(yōu)勢(shì),為廣大科研工作者提供實(shí)驗(yàn)技術(shù)培訓(xùn)服務(wù),從理論和實(shí)操兩個(gè)部分,培養(yǎng)其科研思維以及解決問題的能力,為今后的科研工作奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。








免疫學(xué);ELISA試劑盒,抗體,生化試劑,相關(guān)試劑。原代細(xì)胞,傳代細(xì)胞,及培養(yǎng)試劑

1. SD大鼠,250g,通過頸椎脫位處死大鼠,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤中。

2. 打開皮膚,暴露、收集股骨,無菌狀態(tài)下移除附著的肌肉和組織。

3. 并轉(zhuǎn)移股骨至預(yù)冷含雙抗的PBS中,洗滌三次。冰上操作。

4. 切斷股骨骨骺, 使用5mlPBS,1ml注射器針頭沖洗,沖洗液由棕色變成粉紅色即可(股骨變白)。沖洗后,用1ml注射器吹打3-5次。

5. 70um濾網(wǎng)過濾,棄去篩網(wǎng)。使用 15ml 離心管,先加入分離液,然后緩慢加入濾過的懸液。20℃環(huán)境下,600g 離心 25min

6. 離心后,離心管中液體由上至下分為四層。第一層為稀釋液層。第二層為環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。

7. 小心吸取離心管中的,環(huán)狀乳白色單個(gè)核細(xì)胞層,轉(zhuǎn)移到新離心管中,加入 5-10ml 洗滌液,混勻細(xì)胞。400g,離心 10min。

8. 棄去上清,用吸管吸取 5ml 清洗液重懸所得細(xì)胞。 250g,離心 10min,棄去上清。 再用M199wq培養(yǎng)基(10 ng/mL VEGF,1 ng/mL b-FGF1 ng/mL EGF,20%胎牛血清、1%雙抗清洗一次,棄去上清,M199wq培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。250g,離心 10min,棄去上清。M199wq培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù)。

9. 3×106/孔種入纖連蛋白包被過的24孔板,每3天換一次培養(yǎng)基,以去除非貼壁細(xì)胞,持續(xù)誘導(dǎo)培養(yǎng)2-3周。






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