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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標(biāo)物>常用實(shí)驗(yàn)試劑>普通試劑>A0604 2XRAPA HiFi PCR Mix試劑

A0604 2XRAPA HiFi PCR Mix試劑

參考價(jià) 300
訂貨量 ≥1
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海雅吉生物科技有限公司
  • 品牌 雅吉生物
  • 型號(hào) A0604
  • 產(chǎn)地 中國(guó)
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2024/10/31 18:55:30
  • 訪問(wèn)次數(shù) 249

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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域,提供科研類(lèi)試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門(mén)員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽(yù),深得新老客戶厚愛(ài)。本著“服務(wù)、誠(chéng)信、進(jìn)取”的精神,堅(jiān)持溝通你我,創(chuàng)新服務(wù),為國(guó)內(nèi)外廣大用戶提供產(chǎn)品和服務(wù)。


       雅吉生物專(zhuān)營(yíng)ATCC細(xì)胞,種類(lèi)齊全,服務(wù)周到,歡迎新老客戶咨詢訂購(gòu)。ATCC成立于1925年,是很大的生物資源中心,由美國(guó)14家生化、醫(yī)學(xué)類(lèi)行業(yè)協(xié)會(huì)組成的理事會(huì)負(fù)責(zé)管理,是一家非盈利生物標(biāo)準(zhǔn)品資源中心。ATCC發(fā)布其獲取、鑒定、保存及開(kāi)發(fā)的生物標(biāo)準(zhǔn)品,推動(dòng)科學(xué)研究的驗(yàn)證,應(yīng)用及進(jìn)步。


目前,ATCC可以提供以下類(lèi)別生物標(biāo)準(zhǔn)品:細(xì)胞株(3000多種);菌株(15000多種);動(dòng)植物病毒株(2500多種)以及重組物質(zhì)等。

 

      本公司鄭重承諾:質(zhì)量穩(wěn)定、供貨及時(shí)。

 

ATCC細(xì)胞,耐藥株,細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存液,STR鑒定服務(wù)等

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1ml/10ml
貨號(hào) A0604 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合
主要用途 科研實(shí)驗(yàn)

2XRAPA HiFi PCR Mix試劑其來(lái)源于高保真DNA聚合酶,并加入了Sso7d延伸結(jié)合域,能夠提高反應(yīng)速度、保真度和穩(wěn)定性。該HiFi PCR Mix為單酶制品,不含其它DNA聚合酶,具有超保真擴(kuò)增性能(~280倍Taq)、長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力、高產(chǎn)量等優(yōu)勢(shì)。RAPA HiFi DNA聚合酶在保真性方面與Q5 DNA聚合酶相似,在優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液中,RAPA HiFi PCR Mix在長(zhǎng)片段擴(kuò)增、產(chǎn)量、成功率方面要超過(guò)Q5 PCR Mix。使用該酶可輕松擴(kuò)增8kb的基因組片段,20kb的λ DNA,8kb的cDNA。RAPA HiFi DNA聚合酶具有6kb/min以上的擴(kuò)增速度。對(duì)于常規(guī)或GC含量≤ 65%的復(fù)雜模板,使用該制品可以進(jìn)行可靠的、的擴(kuò)增。對(duì)于高GC含量的模板(>65%),添加5×Q-Solution(Cat. No.: A3002)確保最大的擴(kuò)增性能。該HiFi PCR Mix具有5'-3'的聚合酶活性、3'-5'的強(qiáng)外切酶活性,產(chǎn)物為平末端。

特征

  • 超保真擴(kuò)增:~280倍Taq的保真性能,是載體構(gòu)建、點(diǎn)突變、NGS模板擴(kuò)增、基因合成的最佳用酶。

  • 快速擴(kuò)增:具有6kb/min的擴(kuò)增能力。

  • 長(zhǎng)片段擴(kuò)增:質(zhì)粒、λ DNA 等簡(jiǎn)單模板可以有效擴(kuò)增>20 kb,基因組可以有效擴(kuò)增>8 kb,cDNA可以有效擴(kuò)增>8kb。

儲(chǔ)存

長(zhǎng)期儲(chǔ)存置于-20°C以下,可保存2年,避免反復(fù)凍融;短期使用置于4°C(3個(gè)月)保存,一經(jīng)融化后請(qǐng)放置于4°C,勿再凍存。

反應(yīng)實(shí)例

1. 長(zhǎng)片段擴(kuò)增能力
分別以λDNA、human gDNA、human cDNA為模板,使用RAPA HIFI PCR Mix進(jìn)行擴(kuò)增,循環(huán)數(shù)統(tǒng)一為28 cycles,結(jié)果如上圖所示,對(duì)于不同種類(lèi)DNA模板的長(zhǎng)片段靶基因,RAPA HIFI PCR Mix均有良好的擴(kuò)增性能。

常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案:

無(wú)擴(kuò)增或產(chǎn)量低循環(huán)數(shù)
退火溫度
模板DNA純度和用量
延伸時(shí)間
引物用量
引物設(shè)計(jì)
增加循環(huán)數(shù)至35~40cycles
以2℃為單位降低退火溫度
使用高純度的模板DNA,使用合適的模板量。
適當(dāng)增加延伸時(shí)間
在0.1μM~0.5μM之間選取合適的引物量
重新設(shè)計(jì)優(yōu)化引物
出現(xiàn)雜帶或Smear退火溫度
引物濃度
循環(huán)數(shù)
模板DNA使用量
引物

以2℃為單位提高退火溫度
降低引物濃度至0.2μM
降低循環(huán)數(shù)至25~28cycles
使用合適的模板量,不要過(guò)多使用
重新設(shè)計(jì)優(yōu)化引物

2XRAPA HiFi PCR Mix試劑恒溫?cái)U(kuò)增使用策略及實(shí)例展示

應(yīng)用實(shí)例1:A3825-01 紅黃變色反應(yīng)(肉眼觀察)

以 體外轉(zhuǎn)錄 RNA 為模板,1-6分別為1、10 、100、1000、104和106Copy,NTC為ddH2O為模板。 上圖為加樣結(jié)束反應(yīng)起始前,下圖為 65 度反應(yīng) 30min 后。

圖4.jpg

應(yīng)用實(shí)例2:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。Bst4.0 SYBR Green試劑可在標(biāo)準(zhǔn)定量PCR儀或恒溫?zé)晒鈨x上進(jìn)行反應(yīng)。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)25min的檢測(cè)結(jié)果,可以看到檢測(cè)反應(yīng)<20min(達(dá)平臺(tái)期)。

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應(yīng)用實(shí)例3: 用 LP1002引物組進(jìn)行的LAMP測(cè)試。OG變色法為終點(diǎn)變色策略,在反應(yīng)結(jié)束后,倒置反應(yīng)管,溶解管蓋上染料后,陽(yáng)性樣本呈現(xiàn)出醒目的綠色,陰性表現(xiàn)出橙色,區(qū)分明顯。且該方法不受樣本類(lèi)型限制,雜質(zhì)耐受性很好。以體外轉(zhuǎn)錄RNA為模板,1-6分別為1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC為ddH2O為模板。下圖為65℃反應(yīng)20min后檢測(cè)結(jié)果。

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A3828-02Bst 4.0 Basic Bead

A3824-03Bst 4.0 SYBR Green Mix

A3828-03Bst 4.0 SYBR Green Bead

A3828-04Bst 4.0 HNB Bead

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A3831-02HotStart Bst 4.2 SYBR Green Mix(可凍干)

A3831-03HotStart Bst 4.2 Basic Bead(基礎(chǔ)凍干球)

A3831-04HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead(熒光凍干球)

A3831-05HotStart Bst 4.2 Red Bead(紅黃變色凍干球)

A3831-06HotStart Bst 4.2 L-HNB Bead(紫綠變色凍干球)

A3831-20Oligo Lyophilized Solution (引物凍干劑)

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