10906 通用型TOPO克隆試劑盒(兼容平末端/TA末端)
| 參考價 | ￥175.00 |
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌Yeasen/翌圣生物
- 型號10906
- 所在地上海市
- 廠商性質(zhì)生產(chǎn)廠家
- 更新時間2024/2/22 15:49:33
- 訪問次數(shù) 215
| 5 T | 175.00元 | 99 件可售 |
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企業(yè)簡介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進化技術(shù)為驅(qū)動，聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術(shù)企業(yè)，通過打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術(shù)開發(fā)路徑，成為國內(nèi)少數(shù)同時覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?；a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
主營業(yè)務(wù)
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗，構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來，公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過3000種，涵蓋分子、蛋白、細胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細胞分析系列、細胞培養(yǎng)系列、細胞轉(zhuǎn)染系列、報告基因檢測系列等多個品類的生物試劑，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。
發(fā)展歷程
榮譽資質(zhì)
翌圣生物通過申請商標和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場競爭力，不斷加強公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項（其中發(fā)明14項、實用新型1項、外觀設(shè)計3項）和45項與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán)，擁有經(jīng)國家知識產(chǎn)權(quán)局商標局核準的注冊商標權(quán)37項以及4項境外注冊商標，是國家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
創(chuàng)新平臺
經(jīng)過多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新，翌圣生物積極開展“產(chǎn)學(xué)研”合作，與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國家重點實驗室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點研究基地的江南大學(xué)展開合作，優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ)，建立了六大核心技術(shù)平臺——雙向分子酶理性設(shè)計與定向進化平臺、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺、高通量測序建庫試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項核心技術(shù)，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細胞的技術(shù)開發(fā)路徑，覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準GMP 標準建設(shè)運營的工業(yè)化生產(chǎn)基地，配有噸級發(fā)酵線、工業(yè)級 AKTA 純化線和全自動包裝線。同時，公司通過了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認證，從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉儲運輸?shù)葘ιa(chǎn)線進行360度管理監(jiān)督，保證產(chǎn)品過程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。
客戶服務(wù)
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認可，為檢測公司、治療公司、工具類公司和科學(xué)研究實驗室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國際頂級期刊論文發(fā)表中。
公司企業(yè)文化
幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂
◎ 成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
◎ 具備驅(qū)動產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價值，讓世界更健康更快樂”的使命，專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級，不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù)，助力我國打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時，翌圣生物將進一步推進國際化戰(zhàn)略，繼續(xù)布局和拓展海外市場，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻力量。
分子生物學(xué)試劑，細胞生物學(xué)試劑，免疫學(xué)試劑，蛋白組學(xué)試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit是利用新一代拓撲異構(gòu)酶(Topoisomerase)高效快速連接DNA片段的原理進一步研發(fā)而成，搭配高效的平末端化因子，兼容平末端產(chǎn)物及粘性末端產(chǎn)物的快速克隆。與傳統(tǒng)的連接酶相比，具有以下優(yōu)勢：1) 快速，僅需5分鐘即可完成連接反應(yīng)。2) 高效，無自連現(xiàn)象，陽性克隆率接近100%，無需設(shè)置藍白斑篩選；3) 可連接長達5 kb目的產(chǎn)物。
組分信息
組分編號 | 組分名稱 | 10906ES08 | 10906ES20 | 10906ES50 |
10906-A | 2× Hieff Clone® Universal TOPO Cloning Premix | 25 μL | 100 μL | 250 μL |
10906-B | 1 kb control insert (40 ng/μL) | 10 μL | 10 μL | 10 μL |
10906-C | M13 Forward Primer(10 μM) | 50 μL | 200 μL | 500 μL |
10906-D | M13 Reverse Primer(10 μM) | 50 μL | 200 μL | 500 μL |
儲存條件
-25~-15℃保存，有效期1年。
使用說明
反應(yīng)體系
組分 | 用量 |
2× Hieff Clone® Universal TOPO Cloning Premix | 5 μL |
插入片段* | 0.5-5 μL |
ddH2O | To 10 μL |
*PCR 產(chǎn)物不能磷酸化。如擴增模板為質(zhì)粒，模板質(zhì)粒會在后續(xù)實驗中引起假陽性，因此推薦PCR產(chǎn)物進行膠回收后連接。0.1-1 kb片段投入量推薦20-50 ng，1-2 kb片段投入量推薦50-100 ng，2-4 kb片段投入量推薦100-200 ng，4-5 kb片段投入量推薦200-300 ng。
反應(yīng)條件
混勻上述體系，于室溫(20-37℃)反應(yīng)5 min。連接反應(yīng)不可于冰上進行。室溫(20-37℃)下孵育時，建議孵育時間不超過5 min，如果PCR產(chǎn)物濃度較低或者片段較長，則可以適當(dāng)延長孵育時間，不宜超過15 min（推薦使用25℃，PCR儀控溫）。
轉(zhuǎn)化
1）在冰上解凍克隆感受態(tài)細胞（如：DH5α Chemically Competent Cell，Cat#11802ES）。
2）取10 μL冷卻重組產(chǎn)物，加入到100 μL感受態(tài)細胞中，輕彈管壁數(shù)下混勻，在冰上放置25 min。
3）42℃熱激60 sec，冰上孵育2 min。
4）加入500 μL SOC或LB培養(yǎng)基，37℃，200 rpm，搖菌60 min。
5）5000 rpm離心4 min，棄上清至100 μL，用剩余培養(yǎng)基重懸菌體。用無菌涂布棒將菌液均勻涂抹在含有正確抗性的平板上。待菌液被培養(yǎng)基吸收后，倒置平板，于37℃過夜培養(yǎng)。
克隆鑒定
可選擇測序法或酶切法進行鑒定。用無菌的槍頭或牙簽將單個菌落挑至菌落PCR Mix中混勻（如：2×Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)，Cat#10157ES），加入引物直接進行PCR反應(yīng)。測序引物：
M13F ：GTAAAACGACGGCCAGT
M13R ：CAGGAAACAGCTATGAC
載體信息
注意事項
需自備的材料：
1）自備試劑（僅羅列部分）：
超級感受態(tài)：轉(zhuǎn)化效率＞108 cfu/μg，如翌圣DH5α超級感受態(tài)細胞（Cat#11802ES）。
高保真酶：2× Hieff Canace® Plus PCR Master Mix (With Dye)（Cat#10154ES）或其他等效產(chǎn)品。
菌落PCR mix：2× Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)（Cat#10157ES）或其他等效產(chǎn)品。
核酸染料：YeaRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water)（Cat#10202ES）或其他等效產(chǎn)品。
2）自備儀器耗材（僅羅列部分）：PCR儀，水平電泳槽，切膠儀，EP管等。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
本產(chǎn)品僅作科研用途！
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