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IMP-H018 人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)

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  南京賽泓瑞生物科技有限公司專注于是一家專注于研發(fā)和生產(chǎn)原代細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑產(chǎn)品的生物高科技企業(yè),可以為各類研究機構(gòu)提供符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范的原代細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞及相關(guān)實驗技術(shù)服務(wù);

   南京賽泓瑞生物科技有限公司有一支由中國藥科大學(xué)和南京醫(yī)科大學(xué)多名博士組成的研發(fā)團隊,致力于為您的細(xì)胞研究及細(xì)胞培養(yǎng)實驗提供高品質(zhì)、穩(wěn)定性良好的產(chǎn)品,做“您身邊的細(xì)胞培養(yǎng)專家”。細(xì)胞培養(yǎng)提供全程服務(wù),產(chǎn)品涵蓋原代細(xì)胞、細(xì)胞系、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞、胎牛血清、無血清非程序凍存液、培養(yǎng)基、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、“支原體”、“黑膠蟲”清除試劑、細(xì)胞因子、胰酶、雙抗等細(xì)胞培養(yǎng)及實驗相關(guān)產(chǎn)品。

  公司設(shè)立質(zhì)量管理部,建立了高標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)檢系統(tǒng),產(chǎn)品從原料、半成品、成品入庫到銷售之前,每一個環(huán)節(jié)都有嚴(yán)格的質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn),并以標(biāo)準(zhǔn)的生產(chǎn)工藝,保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。



胎牛血清,原代細(xì)胞,耐藥細(xì)胞,標(biāo)記細(xì)胞,LUC標(biāo)記細(xì)胞,培養(yǎng)基

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱人外周血樹突狀細(xì)胞(DC細(xì)胞)
種屬來源
組織來源外周血
生長特性半貼半懸浮
細(xì)胞形態(tài)樹突狀細(xì)胞樣
質(zhì)量檢測CD11c免疫熒光染色為陽性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基人外周血樹突狀細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率每2-3天換液一次
消化液0.25%
產(chǎn)品貨期7-8周左右
運輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制于科學(xué)研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
背景介紹
人外周血DC細(xì)胞采用密度梯度離心法分離外周血單個核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,人外周血DC細(xì)胞分離自外周血,由外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。DC細(xì)胞,全稱樹突狀細(xì)胞(DC),是近年來倍受們關(guān)注的專職抗原呈遞細(xì)胞(APC),能攝取、加工及呈遞抗原,啟動T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)。由美國學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結(jié)中發(fā)現(xiàn),從脾臟中分離出一類與粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞形態(tài)和功都不同的白細(xì)胞,因其細(xì)胞膜向外伸出,形成與神經(jīng)細(xì)胞軸突相似的膜性樹狀突起,故而命名為樹突狀細(xì)胞。未成熟DC具有較強的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。樹突狀細(xì)胞(Dendritic cells, DC)是機體功能的專職抗原遞呈細(xì)胞,它能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原,未成熟DC具有較強的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細(xì)胞,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié)。
DC的來源有兩條途徑:①髓樣干細(xì)胞在GM-CSF的刺激下分化為DC,稱為髓樣DC,也稱DCl,與單核細(xì)胞和粒細(xì)胞有共同的前體細(xì)胞;包括朗格漢斯細(xì)胞,間皮(或真皮)DCs以及單核細(xì)胞衍生的DCs等,②來源于淋巴樣干細(xì)胞,稱為淋巴樣DC或漿細(xì)胞樣DC,即DC2,與T細(xì)胞和NK細(xì)胞有共同的前體細(xì)胞。樹突狀細(xì)胞(DC)表面具有豐富的抗原遞呈分子、共刺激因子和粘附因子,是功能強大的專職抗原遞呈細(xì)胞(APC)。DC自身具有免疫刺激能力,是目前發(fā)現(xiàn)的惟一能激活未致敏的初始型T細(xì)胞的APC。
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代特征屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群,建議收到細(xì)胞后盡快進行相關(guān)實驗
傳代比例不傳代
半貼壁半懸浮細(xì)胞處理1.收集T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基至50ml離心管中,用吸管吸取PBS,吹洗細(xì)胞培養(yǎng)瓶1-2次,收集清洗液;經(jīng)1200-1500rpm離心3min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀①;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,收集細(xì)胞懸液至離心管中;經(jīng)1200-1500rpm離心3min,棄上清,收集細(xì)胞沉淀②;
4.吸取5ml新鮮培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞沉淀①、細(xì)胞沉淀②,把①、②混勻。
5.用吸管輕輕吹打混勻、分散細(xì)胞,按實驗需求接種于實驗器皿內(nèi),然后補充適量新鮮的培養(yǎng)基,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
6.待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,用于實驗;可以每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
備注:由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同,以上方法僅供各實驗室參考
客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以技術(shù)服務(wù)電話: 按 2,我們隨時給予解答。
三、注意事項
重要提醒
1.培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3.傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4.運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。
到貨須知
1.收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2.靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
3.由于運輸?shù)脑?,部分?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
4.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
四、售后服務(wù)
重發(fā)標(biāo)準(zhǔn)
1.細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā);
2.收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā);
3.收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實后,重發(fā);
4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 2 小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實后,重發(fā);
5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置 22 小時并且未開封,出現(xiàn)污染,經(jīng)核實后,重發(fā);
6.細(xì)胞活性問題,請在收到產(chǎn)品 3 天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實后,重發(fā);
7.視具體情況而定。
不予重發(fā)
1.客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4.細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實清晰的培養(yǎng)前 3 天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā);
5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā);
6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的,不重發(fā);
7.視具體情況而定。


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