一、小鼠細(xì)胞STR鑒定服務(wù)簡(jiǎn)介

      STR（Short Tandem Repeat，短串聯(lián)重復(fù)序列）是一類廣泛存在于真核生物基因組中的DNA 串聯(lián)重復(fù)序列，其核心序列重復(fù)次數(shù)存在個(gè)體差異多態(tài)性，因此STR也被稱為細(xì)胞的DNA指紋。據(jù)估計(jì)，已建立的細(xì)胞系中，約20%是錯(cuò)誤的細(xì)胞類型或物種起源，約30%存在種間或種內(nèi)交叉污染(ICLA受污染細(xì)胞清單)。細(xì)胞系的交叉污染和錯(cuò)誤辨識(shí)已成為生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究和生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)的重大危害，并導(dǎo)致科學(xué)研究結(jié)論錯(cuò)誤、結(jié)果不可重復(fù)、臨床細(xì)胞治療失敗等。因此NIH、ATCC、Science和Nature等機(jī)構(gòu)多次發(fā)出呼吁并要求研究者對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定。無(wú)論是文章投稿、基金申請(qǐng)、細(xì)胞治療還是構(gòu)建細(xì)胞庫(kù)，細(xì)胞是否有“身份”都是重要環(huán)節(jié)。

     依據(jù)美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所NIST 和ATCC 建議的9個(gè)四堿基重復(fù)位點(diǎn)：18-3、9-2、6-7、5-5、X-1、15-3、12-1、6-4、4-2和Jarid1。并額外添加人源位點(diǎn)CSF1PO和vWA，用于鑒定人鼠細(xì)胞交叉污染。

    美德華生小鼠細(xì)胞STR鑒定：本科研單位實(shí)驗(yàn)室20位點(diǎn)的小鼠細(xì)胞STR分型檢測(cè)：18-3、4-2、6-7、19-2、1-2、7-1、8-1、1-1、3-2、2-1、15-3、6-4、13-1、11-2、17-2、12-1、5-5、X-1   + TH01、D5S818。采用人鼠復(fù)合擴(kuò)增體系檢測(cè)人類細(xì)胞中的小鼠細(xì)胞污染，主要應(yīng)用在干細(xì)胞研究領(lǐng)域。同時(shí)可以用于判斷人鼠細(xì)胞混淆的情況。

二、小鼠細(xì)胞STR鑒定服務(wù)內(nèi)容

（一）小鼠細(xì)胞STR鑒定服務(wù)流程

（二）小鼠細(xì)胞STR鑒定服務(wù)特點(diǎn)

      1．采用國(guó)際目前的STR檢測(cè)技術(shù)。采用小鼠基因分型試劑盒（Mouse STR v3.0）對(duì)18-3、4-2、6-7、19-2、1-2、7-1、8-1、1-1、3-2、2-1、15-3、6-4、13-1、11-2、17-2、12-1、5-5、X-1等18個(gè)小鼠STR位點(diǎn)（與CELLOSAUROUS數(shù)據(jù)庫(kù)一致）和2個(gè)人源STR位點(diǎn)（同時(shí)監(jiān)控是否有人源細(xì)胞交叉污染）進(jìn)行復(fù)合擴(kuò)增，在ABI 3130XL型遺傳分析儀上對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)。

      2．靈敏度高。可以鑒別細(xì)胞樣本中含有的少量其他人源和小鼠細(xì)胞污染，檢測(cè)線為皮克級(jí)。

      3．參考國(guó)際細(xì)胞鑒定委員會(huì)（ICLAC）發(fā)布的細(xì)胞鑒定標(biāo)準(zhǔn)：其中舊版（ASN-0002-2011）。

      4．鑒定報(bào)告中文版或中英版（自選），以及圖譜（見(jiàn)小鼠細(xì)胞STR分型檢測(cè)圖譜）。報(bào)告列舉和標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫(kù)匹配度≥80%的細(xì)胞STR數(shù)據(jù)列表，同時(shí)附上STR分型數(shù)據(jù)結(jié)果在標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞庫(kù)的比對(duì)截圖，使結(jié)果更加直觀，便于分析理解。

      5．種屬鑒定作為輔助檢測(cè)。當(dāng)對(duì)樣本進(jìn)行小鼠細(xì)胞STR分型檢測(cè)時(shí)，發(fā)現(xiàn)是非小鼠的，則進(jìn)行種屬鑒定，確認(rèn)樣本種屬。

（三）小鼠細(xì)胞STR鑒定注意事項(xiàng)

      1．樣品寄送：用戶提供DNA或細(xì)胞 樣本，加冰袋運(yùn)輸；同時(shí)請(qǐng)注明細(xì)胞數(shù)量或DNA含量，DNA 含量大于50ng/μl，體積大于20μl。如提供細(xì)胞，請(qǐng)?zhí)峁㏄BS細(xì)胞懸浮液，離心沉淀，去上清液，可常溫特快專遞運(yùn)輸（京外客戶推薦方法）；細(xì)胞數(shù)量≥10⁶個(gè)。

      2．正常檢測(cè)周期5-7個(gè)工作日，加急2-3個(gè)工作日。同時(shí)，可以提供小鼠細(xì)胞STR分型檢測(cè)整體解決方案，即提供ABI 3130xl和配套的試劑軟件，技術(shù)培訓(xùn)，實(shí)現(xiàn)自行檢測(cè)，控制檢測(cè)時(shí)間。

      3．本單位所提供的小鼠細(xì)胞STR分型檢測(cè)可分為科研級(jí)，工業(yè)級(jí)。科研檢測(cè)：遵循ISO17025原則，樣本、數(shù)據(jù)長(zhǎng)期保存，不支持現(xiàn)場(chǎng)審查；工業(yè)級(jí)：遵循ISO17025原則，樣本、數(shù)據(jù)長(zhǎng)期保存，支持現(xiàn)場(chǎng)審查。

（四）小鼠細(xì)胞STR鑒定結(jié)果交付

      檢測(cè)結(jié)果以電子版的形式發(fā)放到訂單或合同上面預(yù)留的郵箱，書面報(bào)告可根據(jù)需要隨時(shí)提供，寄送到貴單位。

三、小鼠細(xì)胞STR鑒定20位點(diǎn)

      小鼠細(xì)胞20個(gè)基因座檢測(cè)：18個(gè)小鼠位點(diǎn)+2個(gè)人源位點(diǎn)。位點(diǎn)如下：