抗酸染色實(shí)驗(yàn)代測
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抗酸染色實(shí)驗(yàn)代測
抗酸染色簡介:
抗酸染色法acid-fast staining method 1882年由埃利希(F.Ehrlich)*并經(jīng)F.齊爾(Ziehl)改進(jìn)而創(chuàng)造出的細(xì)菌染色法。
其中代表性的為對結(jié)核菌的齊爾-尼爾森(Ziehl-Neelsen)染色法和齊爾-加貝特(Ziehl-Gabbet)染色法。用石炭酸復(fù)紅染色后,用鹽酸乙醇分色,再用美藍(lán)進(jìn)行對比染色,即不再脫色而呈現(xiàn)石炭酸復(fù)紅的紅色。
抗酸染色原理:
分枝桿菌的細(xì)胞壁內(nèi)含有大量的脂質(zhì),包圍在肽聚糖的外面,所以分枝桿菌一般不易著色,要經(jīng)過加熱和延長染色時(shí)間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結(jié)合后,就很難被酸性脫色劑脫色,故名抗酸染色。
染色結(jié)果:麻風(fēng)桿菌結(jié)合桿菌等抗酸菌紅色,細(xì)胞核藍(lán)色
注意事項(xiàng):
1、苯-酚堿性品紅液保質(zhì)期只有1個(gè)月,過期需要更換;
2、苯-酚堿性品紅液染色時(shí)間的長短會(huì)對陽性結(jié)果的深淺(即明顯程度)會(huì)有很大影響,短時(shí)間5分鐘也可以染上色,并且用鹽酸酒精很容易分化背景,但是復(fù)染核后,抗酸菌的明顯程度不高;染色時(shí)間超過20分鐘,鹽酸酒精很難分化掉背景,但是用20%的硫酸可以比較容易分化掉背景,并且復(fù)染核后,抗酸菌的紅色依然很明顯;
3、復(fù)染蘇木素時(shí)間要短,半分鐘內(nèi)即可,并且染核后分化時(shí)間盡量短些(分化液中含有鹽酸,會(huì)對抗酸菌的顏色有一定的影響)。
抗酸染色實(shí)驗(yàn)代測