基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白
- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號
- 產(chǎn)地 國產(chǎn)
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2023/3/20 21:13:38
- 訪問次數(shù) 344
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) |
| 種屬 | Bos taurus; Bovine (Cattle，牛) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
商品介紹：
CLG3; Collagenase 3 酶與激酶 腫瘤免疫 骨骼代謝 風濕病學(xué) 物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛) 來源：原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位：：分泌, 細胞外基質(zhì) 預(yù)測分子量：28.2kDa 實際分子量：32kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽：Tyr104~Glu319 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點：5.6 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) | Bos taurus; Bovine (Cattle，牛) |
蛋白表達及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品：
Recombinant Human SH3BP4宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human RUFY1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human HGS宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human MBD4宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
應(yīng)用類型: Other英文名稱: ERK5英文別名: Big MAP kinase 1; BMK 1; BMK 1 kinase; BMK-1; BMK1; BMK1 Kinase; EC 2.7.11.24; ERK 4; ERK 5; ERK-5; ERK4; Extracellular Signal Regulated Kinase 5; Extracellular signal-regulated kinase 5; MAP kinase 7; MAPK 7; MAPK7; Mitogen Activated Protein Kinase 7; Mitogen-activated protein kinase 7; MK07_HUMAN; OTTHUMP00000065906; OTTHUMP00000065907; PRKM 7; PRKM7; PROTEIN KINASE, MITOGEN-ACTIVATED, 7.
CDMP1產(chǎn)品名稱: 軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1/GDF 5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
PRCP產(chǎn)品名稱: 脯氨酰羧肽mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
Bax產(chǎn)品名稱: Bax單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Monkey
CYP2D6產(chǎn)品名稱: 細胞色suP450 2D6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Cat
Caspase-12產(chǎn)品名稱: 半胱胺suan蛋白mei蛋白-12抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
PI3 Kinase p110 beta產(chǎn)品名稱: 磷脂酰肌醇激mei（PI3Kβ）抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
Collagen II產(chǎn)品名稱: Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣su抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig
N-Cadherin產(chǎn)品名稱: N-鈣粘附分子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
CYP11A1產(chǎn)品名稱: 細胞色suP450 11A1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)重組蛋白人血漿抗凝蛋白S(PS)ELISA試劑盒PS血漿抗凝蛋白Selisa kitHuman PS ELISA Kit
人血漿抗凝蛋白C(PC)ELISA試劑盒PC血漿抗凝蛋白CELISA試劑盒Human plasma anticoagulant protein C,PC ELISA Kit
人血漿酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒CETP血漿酯轉(zhuǎn)移蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human cholesterolestertransferprotein，CETP ELISA Kit
人血紅su加氧mei2(HO-2)ELISA試劑盒HO-2血紅su加氧mei2elisa檢測試劑盒Human heme oxygenase2,HO-2 ELISA Kit
人血紅su加氧mei1(HO-1)ELISA試劑盒HO-1血紅su加氧mei1elisa kitHuman heme oxygenase1,HO-1 ELISA Kit
注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù)，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
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