產(chǎn)品信息

其他自備材料和試劑

MG&ABW基質(zhì)膠

上皮類器官基礎培養(yǎng)基  

類器官消化液  

潤洗液

類器官冷凍保存培養(yǎng)基(無血清)  

DPBS (1X)，液體，不含鈣和鎂  

胎牛血清(FBS)  

EDTA

人胃上皮類器官原代培養(yǎng)培養(yǎng)基和穩(wěn)態(tài)培養(yǎng)基的制備

采用無菌技術制備人胃上皮類器官原代培養(yǎng)培養(yǎng)基和穩(wěn)態(tài)培養(yǎng)基的制備。在人胃上皮類器官穩(wěn)態(tài)培養(yǎng)基中生長的胃上皮類器官絕大多數(shù)由LGR5+干細胞，抗粘膜細胞、腺粘膜細胞、主細胞，以及少量腸內(nèi)分泌細胞組成。

以下是準備 10mL原代培養(yǎng)培養(yǎng)基和穩(wěn)態(tài)培養(yǎng)基的示例，如所需量不同，可相應調(diào)整用量。

1.冰上解凍人胃上皮類器官培養(yǎng)因子B、人胃上皮類器官培養(yǎng)因子C、人胃上皮類器官培養(yǎng)因子D。

注意： 解凍后，建議將人胃上皮類器官培養(yǎng)因子B、人胃上皮類器官培養(yǎng)因子C、人胃上皮類器官培養(yǎng)因子D分別分裝后保存取用，避免反復凍融。

2. 配制人胃上皮類器官原代培養(yǎng)培養(yǎng)基，專門用于原代培養(yǎng)和復蘇。添加200 μL人胃上皮類器官培養(yǎng)因子B (50x)、40 μL人胃上皮類器官培養(yǎng)因子C (250x)、40 μL人胃上皮類器官培養(yǎng)因子D (250x)、至9.72 mL人胃上皮類器官基礎培養(yǎng)基中，混合均勻。

3.配制人胃上皮類器官穩(wěn)態(tài)培養(yǎng)基，專門用于培養(yǎng)傳代。添加200 μL人胃上皮類器官培養(yǎng)因子B (50x)、40 μL人胃上皮類器官培養(yǎng)因子C (250x)至9.76 mL人胃上皮類器官基礎培養(yǎng)基中，混合均勻。

注意：配制后的人胃上皮類器官原代培養(yǎng)培養(yǎng)基和穩(wěn)態(tài)培養(yǎng)基可在 2-8°C 儲存，建議在兩周內(nèi)使用。人胃上皮類器官培養(yǎng)因子B(50x)內(nèi)含有細菌及真菌抗生素(50x)。