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Cas9x3.0 CRISPR基因敲除試劑盒

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蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區(qū)生物納米園(BiobayA5301室。公司管理團隊專注于科學(xué)儀器行業(yè)十三年,擁有專業(yè)的技術(shù)團隊與完善的售后服務(wù)體系,目前已為300余家實驗室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),涵蓋各大高校、醫(yī)療機構(gòu)、檢測中心、科研機構(gòu)、制藥企業(yè)等13個群體。代理的實驗室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,PCR儀,移液器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,移液器,超低溫冰箱,醫(yī)用冰箱,液氮罐,高壓滅菌器,超純水機,天平,離心機等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱,梅特勒,樂楓,搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)等多家等。在提供產(chǎn)品的同時也為您提供生物實驗室常用的耗材試劑,以及實驗室整體搬遷、第三方檢測、計量與校準(zhǔn),二手儀器調(diào)劑等服務(wù)。完整的實驗室一站式體驗使您的選擇更加方便、快捷、靈活。

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供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合

CRISPR基因敲除試劑盒


| 產(chǎn)品名稱:CRISPR基因敲除試劑盒

| 產(chǎn)品貨號:Cas9x3.0

| 產(chǎn)品介紹

該試劑盒(Cas9x3.0)是海星生物在多年基因編輯服務(wù)的基礎(chǔ)上研發(fā)的高效快捷的基因敲除試劑盒。包括了人(Human) 和小鼠(Mouse)的所有基因的敲除。

Cas9x3.0試劑盒包含2個Cas9X™算法優(yōu)化的 gRNA序列載體和特異的同源DNA片段,DNA片段含有抗性和GFP 熒光,并攜帶有一段特殊同源序列,不僅可為后續(xù)基因敲除細(xì)胞的篩選提供藥物抗性,也可以通過流式篩選獲得敲除細(xì)胞。

Cas9x3.0試劑盒對分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞都有非常高的敲除效率。

| 產(chǎn)品特點

敲除高效率——比病毒敲除方式更實惠、更穩(wěn)定、更安全

實驗超簡單——操作流程簡單,能養(yǎng)好細(xì)胞就能做基因敲除

| 產(chǎn)品構(gòu)成


產(chǎn)品構(gòu)成

| 產(chǎn)品原理

Cas9x3.0試劑盒依據(jù)HDR和 NHEJ修復(fù)原理進行產(chǎn)品開發(fā)。

優(yōu)化的gRNA引導(dǎo)Cas9蛋白對特定位點進行切割,產(chǎn)生DNA 雙鏈斷裂(Double-Strand Break, DSB),并誘導(dǎo)同源線性化DNA片段(攜帶抗性基因和熒光基因)整合到該位點,再通過抗性藥物(puroR )或熒光(GFP)進行篩選,從而獲得基因敲除的細(xì)胞和單克隆。

該試劑盒 (Cas9x3.0) 的敲除效率是傳統(tǒng)基因敲除策略的2~5倍。因為的除策略是通過在基因位導(dǎo)入 Donor DNA( puroR & GFP )從而達(dá)到敲除目的蛋白效果,同時也可以在DSB位點導(dǎo)入序列移碼,導(dǎo)致蛋白翻譯提前終止。這兩個原理的疊加,可以輕松獲得“等位基因”純合敲除細(xì)胞株。

<strong>CRISPR基因敲除試劑盒</strong>1

| 應(yīng)用流程

該基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)操作步驟(脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法):

本試劑盒建議采用轉(zhuǎn)染試劑是Lipofectamine® 2000 Reagent (cat#11668-030),具體參照轉(zhuǎn)染試劑說明材料。不同類型的轉(zhuǎn)染試劑,請按照制造商的操作說明進行轉(zhuǎn)染。

注意:懸浮細(xì)胞不推薦使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法。

基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)操作步驟(電轉(zhuǎn)化法):

本試劑盒推薦Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng),具體參照設(shè)備對每種細(xì)胞參數(shù)。不同類型的電轉(zhuǎn)設(shè)備,請按照制造商的操作說明進行優(yōu)化。

注意:懸浮細(xì)胞推薦使用電轉(zhuǎn)化法。


細(xì)胞轉(zhuǎn)染


該基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)配有eGFP對照DNA,可以按照實際使用的方法和細(xì)胞情況,進行實驗摸索,建議48小時后的目的細(xì)胞的eGFP的陽性率不低于50%, Cas9x3.0試劑盒才能獲得良好的敲除效果。





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