Agilent 流式細(xì)胞儀,實(shí)時(shí)無標(biāo)記細(xì)胞分析儀(RTCA),BioTek洗板機(jī),酶標(biāo)儀,細(xì)胞成像,高內(nèi)涵等
NovoCyte 流式細(xì)胞儀系統(tǒng)特性
功能強(qiáng)大,多達(dá) 17 個(gè)參數(shù)檢測(cè),更高的靈敏度和分辨率。
直觀、*的數(shù)據(jù)分析功能,具有更高的易用性和自動(dòng)化儀器維護(hù)功能。
可實(shí)現(xiàn)定制化:可靈活配置 1 至 3 個(gè)激光器,可更換的濾光片,多種上樣選項(xiàng),以及靈活的分析形式。
更高的易用性:固定的光路設(shè)置;24 位動(dòng)態(tài)檢測(cè)范圍,無需調(diào)整 PMT 增益電壓;基于體積法的精確細(xì)胞juedui計(jì)數(shù);配備實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)液路狀態(tài)的壓力傳感器;以及自動(dòng)化清洗和消毒等功能。
NovoExpress 軟件界面直觀且易于使用。靈活的分析模板和畫圖工具可節(jié)省數(shù)據(jù)分析時(shí)間,提高效率。
NovoCyte 流式細(xì)胞儀系統(tǒng)應(yīng)用
凋亡分析
細(xì)胞凋亡也稱為細(xì)胞程序性死亡,是細(xì)胞調(diào)控自身死亡的過程,通過激活特定通路使細(xì)胞發(fā)生收縮、凝聚,并最終通過吞噬作用被清除。這與壞死細(xì)胞死亡形成鮮明對(duì)比,壞死細(xì)胞死亡時(shí)細(xì)胞失控死亡并裂解,可產(chǎn)生免疫反應(yīng)異常激活等有害影響。因此,凋亡細(xì)胞以非常有序的方式死亡,可限制其對(duì)周圍細(xì)胞和組織的破壞。
多種方法可用于測(cè)定細(xì)胞死亡并區(qū)分其為凋亡還是壞死。NovoCyte 流式細(xì)胞儀具有自動(dòng)補(bǔ)償設(shè)置和寬熒光檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍,可輕松對(duì)檢測(cè)進(jìn)行定量,無需調(diào)整 PMT 電壓
免疫表型分析
免疫狀態(tài)與疾病狀態(tài)、治療效率以及對(duì)疫苗等外部刺激的反應(yīng)有關(guān)。免疫表型分析可快速識(shí)別候選細(xì)胞類型、亞類和功能。由于免疫細(xì)胞可能影響疫苗的免疫原性及其效能,因此監(jiān)測(cè)多種免疫細(xì)胞群的頻率以及特定細(xì)胞亞群(如單核細(xì)胞、NK 細(xì)胞、T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞)的分化或活化狀態(tài)至關(guān)重要。NovoCyte 流式細(xì)胞儀可同時(shí)定量分析多種白細(xì)胞,以便更好地了解患者的免疫狀態(tài)并監(jiān)測(cè)機(jī)體對(duì)傳染病的免疫反應(yīng)。
細(xì)胞增殖
細(xì)胞增殖是一種重要功能,是高度結(jié)構(gòu)化的事件,如果不受控制,會(huì)導(dǎo)致疾病。我們可以通過juedui細(xì)胞計(jì)數(shù)或使用染料(例如 CFSE)測(cè)量增殖。當(dāng) CFSE 標(biāo)記的細(xì)胞發(fā)生分裂時(shí),染料在子細(xì)胞之間平均分配,隨著染料的不斷稀釋,我們可以測(cè)量 CFSE 熒光隨時(shí)間的損失。此外,還繪制染料的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 與細(xì)胞濃度隨時(shí)間的變化曲線,以揭示兩者之間的反比關(guān)系。這類分析方法通常用于觀察 T 淋巴細(xì)胞活化的變化。
圖:使用 CFSE 測(cè)量 Jurkat T 細(xì)胞增殖。A) 使用 CFSE 標(biāo)記 Jurkat T 細(xì)胞,并通過 NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞隨時(shí)間的變化,以測(cè)定細(xì)胞分裂。每個(gè)峰值都對(duì)應(yīng)于一個(gè)單獨(dú)的時(shí)間點(diǎn)。B) 使用隨細(xì)胞分裂產(chǎn)生的信號(hào)稀釋,繪制juedui細(xì)胞計(jì)數(shù)與 CFSE 的平均熒光強(qiáng)度 (MFI) 隨時(shí)間的變化曲線。
細(xì)胞因子檢測(cè)
細(xì)胞因子是免疫細(xì)胞對(duì)病原體、自身免疫或治療藥物的激活反應(yīng)所必需的小分子。細(xì)胞因子的信號(hào)傳導(dǎo)可以調(diào)節(jié)基因調(diào)控、先天免疫反應(yīng)和適應(yīng)性免疫反應(yīng)以及炎癥。因此,測(cè)量細(xì)胞因子產(chǎn)生并確定細(xì)胞因子產(chǎn)生的來源對(duì)于深入了解免疫反應(yīng)非常重要?;谖⑶虻牧魇郊?xì)胞術(shù)檢測(cè)是測(cè)量細(xì)胞因子的高效方法,可以使用具有不同熒光強(qiáng)度的混合微球來測(cè)量單個(gè)樣品中的多種可溶性分析物。
細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)檢測(cè)
對(duì)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的檢測(cè)和分析有助于細(xì)胞亞群和細(xì)胞過程的額外表征。為分析非細(xì)胞表面蛋白質(zhì),需要進(jìn)行細(xì)胞固定和破膜。然而,許多磷酸特異性抗體與許多基于去垢劑的常用破膜方法(用于細(xì)胞內(nèi)染色)不兼容。在確定磷酸特異性抗體的適宜固定和破膜方法時(shí),需要特別注意。常見的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定,然后用 百分之一百 甲醇破膜。雖然這種方法適用于多種抗體,但請(qǐng)注意,并非每種磷酸特異性抗體都適用。
此外,在異質(zhì)性樣品中鑒定不同的細(xì)胞群,需要對(duì)表面蛋白連接的磷酸化蛋白進(jìn)行染色。必須特別考慮這些表位對(duì)固定劑的敏感性,并采取相應(yīng)預(yù)防措施,避免損害表位。因此,樣品在固定前可能需要對(duì)特定的表面標(biāo)記物進(jìn)行染色
細(xì)胞周期分析
正常的人體細(xì)胞是含有恒定數(shù)量 DNA 的二倍體。在細(xì)胞分裂的過程中,DNA 合成導(dǎo)致總 DNA 含量翻倍,隨后在有絲分裂后恢復(fù)正常的 DNA 含量。利用 NovoCyte 流式細(xì)胞儀,可以進(jìn)行詳細(xì)的細(xì)胞周期分析,了解腫瘤細(xì)胞分化、細(xì)胞轉(zhuǎn)化以及細(xì)胞與化合物之間的相互作用。
圖:在 10 µg/M MG132 或 500 µg/M 5-FU 處理 16 小時(shí)后,使用 ACEA NovoCyte 流式細(xì)胞儀分析 A549 細(xì)胞的細(xì)胞周期分布。NovoExpress 內(nèi)置的細(xì)胞周期分析模塊中的圖像顯示了處于 G0/G1 期(綠色)、S 期(黃色)和 G2/M 期(藍(lán)色)的細(xì)胞。與正常未處理的細(xì)胞相比,MG132 處理的細(xì)胞停滯在 G2/M 期,而 5-FU 處理的細(xì)胞停滯在 G0/G1 期。