MIA PaCa-2 胰腺癌細(xì)胞系
- 公司名稱 蘇州千舍生物科技有限公司
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- 更新時(shí)間 2023/12/22 13:17:06
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供貨周期 | 一周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
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MIA PaCa-2 胰腺癌細(xì)胞系
背景:
胰腺癌是第四大致死性腫瘤,預(yù)計(jì)2030年將位居第二。基于是否可切除,非轉(zhuǎn)移性胰腺癌患者分為三類:1)可切除2)可能切除3)局部進(jìn)展。根據(jù)目前NCCN和ASCO的指南推薦,患者處于可切除狀態(tài)且無顯著升高的CA-19-9、大的原位腫瘤、局部大淋巴結(jié)或極其疼痛,應(yīng)在吉西他濱+卡培他濱或FOLFIRIN OX(5-FU、亞葉酸、奧沙利鉑和伊立替康)治療后直接手術(shù)。輔助治療的作用仍不清楚,但邊緣陽性切除尤應(yīng)考慮采用輔助治療。FOLFIRINOX是目前可能切除或局部進(jìn)展的優(yōu)選新輔助治療方案。臨床研究持續(xù)關(guān)注可切除腫瘤患者是否應(yīng)接受術(shù)前。我們比較了改良FOLFIRINOX(mFOLFIRINOX)新輔助治療與吉西他濱輔助治療(adj-gem)對(duì)行切除的胰腺癌患者的臨床轉(zhuǎn)歸與病理標(biāo)志。
方法:
本研究回顧性入組了2006年至2017年俄亥俄州立大學(xué)患者。雖然認(rèn)為接受吉西他濱輔助治療的患者可以通過切除,但機(jī)構(gòu)腫瘤委員會(huì)小組規(guī)定,接受neo-mFOLFIRINOX治療的患者分為可切除性(BR)或不可切除性(UR)胰腺癌患者。111例患者接受了adj-gem(平均周期為5.5),52例患者接受了neo-mFOLFIRINOX治療(平均周期為3.5)。采用Kaplan-Meier模型法計(jì)算各自生存率,并用Cox回歸及l(fā)og-rank檢驗(yàn)進(jìn)行了分析。
結(jié)果:
中位隨訪時(shí)間為21.3個(gè)月時(shí),neo-mFOLFIRINOX組和adj-gem 組的中位OS分別為 35.4個(gè)月和21.8個(gè)月(HR 0.56,95% CI,0.37-0.84,p = 0.005)。neo-mFOLFIRINOX組和吉西他濱輔助治療組的3年OS率分別為46%和 22%(p = 0.001)。neo-mFOLFIRINOX組和adj-gem組的中位無疾病生存期(DFS)分別為18.6個(gè)月和12.0個(gè)月(HR 0.63,95%CI,0.43-0.93,p = 0.022)。neo-mFOLFIRINOX組和adj-gem組的3年DFS率分別為17%和11%(p = 0.02)。在手術(shù)病理標(biāo)本復(fù)查時(shí),與adj-gem組相比,neo-mFOLFIRINOX組具有較低的腫瘤等級(jí)、神經(jīng)浸潤(rùn)和淋巴管浸潤(rùn)率、病理T分期、病理N分期和較少的陽性淋巴結(jié)數(shù)量,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p < 0.05)。neo-mFOLFIRINOX組中R0切除率比adj-gem組高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(51.9%與40.4,p = 0.2)。兩組之間的平均年齡和體能狀態(tài)相似。
PC-12(高分化) 大鼠腎上腺髓質(zhì)嗜鉻瘤分化細(xì)胞株
PECA 小鼠皮膚鱗狀細(xì)胞癌
PH 成人急性單核細(xì)胞白血病
PK-15 豬腎細(xì)胞
Raji 人B淋巴瘤細(xì)胞
RAW264.7 小鼠單核細(xì)胞
RSC96 大鼠雪旺細(xì)胞
Saos-2 人成骨肉瘤細(xì)胞
SCL-1 人皮膚鱗癌細(xì)胞
SK-BR-3 人乳腺癌傳代細(xì)胞
SK-OV-3 人卵巢癌細(xì)胞
SMMC-7721 人肝癌細(xì)胞
SNU-899 上呼吸消化道鱗狀細(xì)胞癌
SPEC-2 子宮內(nèi)膜漿液性表面乳頭狀癌細(xì)胞
ST 豬胎睪丸細(xì)胞
SU-DHL-6 彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤生發(fā)中心B細(xì)胞型
SV40 MES 13 小鼠腎小球系膜細(xì)胞
SV-HUC-1 人正常膀胱上皮細(xì)胞
SW480 人結(jié)直腸癌細(xì)胞
SW620 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
SW900 肺鱗狀細(xì)胞癌
T24 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞
TE-1 人食管癌細(xì)胞
THP-1 人急性單核細(xì)胞白血病單核細(xì)胞株
TM3 小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞
TPC-1 人甲狀腺乳頭狀癌的細(xì)胞系
U118MG 人星形膠質(zhì)細(xì)胞
U266 人骨髓瘤細(xì)胞
U87MG 人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤
WiDr 人大腸癌細(xì)胞
Yac-1 小鼠淋巴瘤細(xì)胞
山羊MSC細(xì)胞 山羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
山羊關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞
MIA PaCa-2 胰腺癌細(xì)胞系
原代培養(yǎng)及其操作步驟
原代分離細(xì)胞培養(yǎng)是指從供體內(nèi)取出組織后,經(jīng)機(jī)械以及消化分離成單個(gè)細(xì)胞或單一型細(xì)胞群,使之在體外模擬人體生理環(huán)境,在無菌、適當(dāng)溫度和一定的營(yíng)養(yǎng)條件下,生存、生長(zhǎng)和繁殖。原代培養(yǎng)細(xì)胞常有不同的細(xì)胞成分,生長(zhǎng)緩慢,但是更能代表所來源的組織細(xì)胞類型和表達(dá)組織的特異性特征。利用原代細(xì)胞培養(yǎng)做各種實(shí)驗(yàn),如藥物測(cè)試、細(xì)胞分化及病毒學(xué)方面的試驗(yàn)效果很好。其操作步驟如下。
1、剪切組織:先將所取得的組織,用D-Hanks或Hanks液清洗,以去除表面血污,并用手術(shù)去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后,用刀將組織切成若干小塊,移入青霉素小瓶或小燒杯中,加入適量緩沖液,用彎頭眼科剪,反復(fù)剪切組織,直到組織成糊狀,約1mm3大小。靜置片刻后,用吸管吸去上層液體,加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2、消化分離:消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞,以利于進(jìn)一步的培養(yǎng),常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3、培養(yǎng):細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為(2~5)×105 cells/ml,或?qū)嶒?yàn)所需密度,分裝于培養(yǎng)瓶中,使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi),5%CO2,37℃靜置培養(yǎng)。一般3~5d,原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁,并伸展開始生長(zhǎng),可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1/2的新培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d后換液,一般7~14d可以長(zhǎng)滿瓶壁,進(jìn)行傳代。
4、注意事項(xiàng):
1)無菌操作:細(xì)菌或霉菌污染是培養(yǎng)失敗的常見原因,必須加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的無菌操作觀念,以預(yù)防為主,一旦污染,一般很難消除。
(2)培養(yǎng)液:所用的培養(yǎng)液必須滿足細(xì)胞生存和生長(zhǎng)的必要條件。由于細(xì)胞來源的動(dòng)物種類、組織類型不同,對(duì)培養(yǎng)液的要求有一定的差異,必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
(3)小牛血清:小牛血清對(duì)于維持培養(yǎng)細(xì)胞的生存和促進(jìn)細(xì)胞增殖起著關(guān)鍵性作用??蛇x擇多種不同批號(hào)的小牛血清進(jìn)行小樣分析。一旦確定某一廠家的某一批號(hào)小牛血清后,就保持應(yīng)用至實(shí)驗(yàn)完成。
(4)膠原酶溶液:必須新鮮配制,貯存時(shí)間過長(zhǎng)(即使是-20℃低溫保存),也將影響消化效力,導(dǎo)致消化時(shí)間過長(zhǎng),細(xì)胞損傷增加。
(5)L-谷氨酰胺:幾乎所有細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺都有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時(shí),細(xì)胞會(huì)因生長(zhǎng)不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,加有谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱貯存兩周以上時(shí),就應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。
(6)靜置培養(yǎng):原代細(xì)胞在消化分離后,置于CO2培養(yǎng)箱的頭24~48h (必要時(shí)72h)內(nèi),應(yīng)處于絕對(duì)靜置狀態(tài),切忌不時(shí)地取出培養(yǎng)瓶觀察生長(zhǎng)狀況,這將使原代分離細(xì)胞難以貼壁,更談不上伸展和增殖,初學(xué)者尤應(yīng)注意。不必?fù)?dān)心培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)成分會(huì)消耗光,在細(xì)胞增殖之前對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求并不大。原代培養(yǎng)初期僅加一薄層培養(yǎng)液的目的也在于有利于細(xì)胞貼壁伸展。
(7)消化時(shí)間:一般消化至肉眼尚可見微小組織顆粒即可,因?yàn)榇藭r(shí)組織顆粒已經(jīng)松散,略經(jīng)吹打即成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,過久的消化往往導(dǎo)致細(xì)胞損傷加重,細(xì)胞培養(yǎng)成活率降低。
(8)其他生長(zhǎng)因子:經(jīng)過以上處理,一般原代分離細(xì)胞培養(yǎng)均可以成功。對(duì)于少數(shù)特殊類型細(xì)胞也可以考慮加一些特殊的生長(zhǎng)因子,如胰島素能促使細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸。另外,內(nèi)毒素、EGF、FGF等均有促有絲分裂作用,但費(fèi)用較高。