THP-1細(xì)胞siRNA轉(zhuǎn)染
- 公司名稱 廣州市超博科技有限公司
- 品牌 ZETA LIFE/美國
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 經(jīng)銷商
- 更新時間 2024/8/1 10:21:35
- 訪問次數(shù) 1926
THP-1細(xì)胞轉(zhuǎn)染免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染raw264.7raw264.7細(xì)胞轉(zhuǎn)染
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實驗儀器,實驗耗材,分子生物學(xué)試劑,免疫學(xué)試劑,細(xì)胞株,耐藥細(xì)胞,大鼠細(xì)胞,elisa試劑盒,細(xì)胞生物學(xué)試劑,生物化學(xué)試劑,蛋白質(zhì)研究試劑等
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) |
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THP-1細(xì)胞siRNA轉(zhuǎn)染
一、轉(zhuǎn)染材料準(zhǔn)備
1. 轉(zhuǎn)染試劑用量:10ul
2. siRNA濃度:20um/L
3. 細(xì)胞密度:1*106-1*105
4. 轉(zhuǎn)染用培養(yǎng)板:6孔板
5. 轉(zhuǎn)染試劑:Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑;貨號:AD600025
6. 轉(zhuǎn)染時間:48小時
7. 細(xì)胞培養(yǎng)胎牛血清:Z7180FBS-500低內(nèi)毒素胎牛血清
8. 細(xì)胞凍存液:L0100無血清細(xì)胞凍存液
注意:本細(xì)胞轉(zhuǎn)染用量條件不適合lipo使用。
操作過程:
1.提前1天接種細(xì)胞:細(xì)胞匯合度在60-80%左右,再進行轉(zhuǎn)染。
2. 核酸復(fù)合物制備:將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照比例關(guān)系直接混合,用移液器吹打、混勻,室溫靜止15分鐘。
3.在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物:根據(jù)參考用量在細(xì)胞中加入核酸復(fù)合物,并輕輕混勻;細(xì)胞培養(yǎng)基里面可以含有血清。
4.細(xì)胞換液:轉(zhuǎn)染24小時后對細(xì)胞進行正常換液,懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液。
5.分析結(jié)果:質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染48-72小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-96小時檢測mRNA或蛋白表達。若進行穩(wěn)定表達細(xì)胞株的篩選,則在轉(zhuǎn)染后24-48小時左右加入適量的藥物進行篩選。siRNA轉(zhuǎn)染后9小時熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-72小時檢測mRNA或蛋白表達。
一、轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品介紹
Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細(xì)胞、活體動物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑,此技術(shù)成為新的全球蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。
二、*表現(xiàn)
Zeta Life多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑尺寸大小是傳統(tǒng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑體積的1/10;
本轉(zhuǎn)染試劑是通過細(xì)胞內(nèi)?和細(xì)胞主動吸收進入細(xì)胞;
本轉(zhuǎn)染試劑進入后對細(xì)胞膜無物理性損傷,不易出現(xiàn)細(xì)胞變形,保持高的細(xì)胞活力;
不激活細(xì)胞表面或細(xì)胞體內(nèi)marker;
可反映真實的細(xì)胞通路蛋白原始數(shù)據(jù);
可轉(zhuǎn)染免疫細(xì)胞、懸浮細(xì)胞等;
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