60020 Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑
- 公司名稱 西安百螢生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) 60020
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2021/8/17 17:15:11
- 訪問(wèn)次數(shù) 97
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑
貨號(hào) | 60020 | 存儲(chǔ)條件 | 在零下15度以下保存, 避免光照 | |
規(guī)格 | 0.5 mL | |||
Ex (nm) | Em (nm) | |||
分子量 | 溶劑 | |||
產(chǎn)品詳細(xì)介紹 |
簡(jiǎn)要概述
Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑是美國(guó)AAT Bioquest生產(chǎn)的轉(zhuǎn)染試劑,Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑是一種功能強(qiáng)大且用途廣泛的轉(zhuǎn)染試劑,可將核酸引入真核細(xì)胞,引入動(dòng)物細(xì)胞。它可以有效地將各種有效載荷轉(zhuǎn)染到各種貼壁和懸浮細(xì)胞系中。它可用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染以及基于siRNA和shRNA的基因敲低實(shí)驗(yàn)和基因表達(dá)研究。它對(duì)所有轉(zhuǎn)染細(xì)胞均提供轉(zhuǎn)染效率。Transfectamine 5000的低毒性也使轉(zhuǎn)染細(xì)胞具有更高的生存能力。與大多數(shù)其他轉(zhuǎn)染試劑相比,Transfectamine 5000更易于使用,并且不需要特殊的介質(zhì)。百螢生物是AAT Bioquest的中國(guó)代理商,為您提供Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑。
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
樣品實(shí)驗(yàn)方案
簡(jiǎn)要概述
1.準(zhǔn)備細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染
2.準(zhǔn)備Transfectamine 5000-DNA混合物
3.將Transfectamine 5000-DNA混合物添加到細(xì)胞培養(yǎng)物中
4.過(guò)夜培養(yǎng)
5.用適當(dāng)?shù)姆椒ǚ治鲛D(zhuǎn)染效率
溶液制備
1.工作溶液配制
1.1將2.5ug DNA與200uL無(wú)血清培養(yǎng)基混合。
1.2在步驟1中添加7.5 uL Transfectamine 5000。
1.3充分混合并在室溫下孵育20分鐘。 注意:Transfectamine 5000和DNA的比例需要針對(duì)不同的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化,通常:Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑(uL)與DNA(ug)的比例= 3-5 uL至1ug
6孔板與10cm板樣品方案
組成 | 6孔板(每孔) | 10厘米板 |
新鮮培養(yǎng)基 | 2ml | 6ml |
質(zhì)粒 | ~2.5ug | 7.5-10ug |
無(wú)血清培養(yǎng)基 | 200ul | 600ul |
Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑 | 7.5ul | ~22.5ul |
樣品示例及操作
1.細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備
1.1轉(zhuǎn)染時(shí)將細(xì)胞培養(yǎng)至約90%融合。
1.2轉(zhuǎn)染前用新鮮的生長(zhǎng)培養(yǎng)基替換。 例如,對(duì)于6孔板,每孔用2 mL培養(yǎng)基替換,對(duì)于10 cm板,用6 mL培養(yǎng)基替換。
2.轉(zhuǎn)染方案
將Transfectamine 5000 -DNA混合物添加至培養(yǎng)板并培養(yǎng)過(guò)夜。 注意:重組蛋白可在轉(zhuǎn)染后16小時(shí)開(kāi)始檢測(cè)。轉(zhuǎn)染后72?96小時(shí)可觀察到大表達(dá)水平。
圖1.使用Transfectamine 5000,Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000試劑在HeLa細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染效率比較。 每種試劑用于以96孔格式轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后24小時(shí)分析GFP表達(dá)。 與Lipofectamine 2000和Lipofectamine 3000試劑相比,Transfectamine 5000轉(zhuǎn)染試劑可提供更高的GFP轉(zhuǎn)染效率。 |