117-01 jetOPTIMUS® DNA體外轉(zhuǎn)染試劑
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Polyplus
- 型號(hào) 117-01
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2023/3/15 9:02:09
- 訪問次數(shù) 2682
polyplusjetOPTIMUSDNA體外轉(zhuǎn)染試劑dna轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染
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供貨周期 | 一周 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
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jetOPTIMUS® in vitro DNA transfection reagent
jetOPTIMUS® DNA體外轉(zhuǎn)染試劑
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
jetOPTIMUS® in vitro DNA transfection reagent jetOPTIMUS® DNA體外轉(zhuǎn)染試劑 | 117-01 | 0.1 mL | 835.00 |
117-15 | 1.5 mL | 6855.00 |
產(chǎn)品描述
jetOPTIMUS®是Polyplus公司生產(chǎn)的一款///佳的DNA轉(zhuǎn)染試劑,具有陽離子納米結(jié)構(gòu),針對難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系,包括原代細(xì)胞、干細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等都有很高的轉(zhuǎn)染效率。jetOPTIMUS®通過增加細(xì)胞攝取DNA的量,實(shí)現(xiàn)了原代細(xì)胞、干細(xì)胞較高的轉(zhuǎn)染效率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),在一定的生理?xiàng)l件下,只需要少的DNA和轉(zhuǎn)染試劑用量,都可以實(shí)現(xiàn)高的轉(zhuǎn)染水平,且細(xì)胞毒性小,保持了細(xì)胞的活力狀態(tài)。
按照標(biāo)準(zhǔn)方案,1.5 mL jetOPTIMUS®轉(zhuǎn)染試劑足以在24孔板中進(jìn)行750次轉(zhuǎn)染 (DNA:試劑比例=1:1)。除此之外,也可根據(jù)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系、核酸種類、轉(zhuǎn)染時(shí)間等,登錄Polyplus公司的網(wǎng)///址,搜索該產(chǎn)品引文數(shù)據(jù)庫。Polyplus數(shù)據(jù)庫提供了400多種的轉(zhuǎn)染條件數(shù)據(jù),Polyplus:w/w/w.polyplus transfection.c/o/m.
產(chǎn)品組分
組分 | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | ||
117-01 | 117-07 | 117-15 | |
jetOPTIMUS® Reagent | 0.1 mL | 0.75 mL | 1.5 mL |
jetOPTIMUS® Buffer | 10 mL | 2×60 mL | 4×60 mL |
運(yùn)輸與保存方法
冰袋(wet ice)運(yùn)輸。產(chǎn)品4 ºC保存,一年有效。不可冷凍!
注意事項(xiàng)
1)該轉(zhuǎn)染試劑可以滿足多質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染,共轉(zhuǎn)染時(shí),每孔/板的總DNA量不應(yīng)超過表2所示DNA的數(shù)量。且每個(gè)質(zhì)粒的量不少于10%的DNA總量。
2)制備復(fù)合物時(shí),一定要用試劑盒里的jetOPTIMUS® 緩沖溶液稀釋DNA。禁止使用無血清培養(yǎng)基稀釋DNA。
3)若穩(wěn)定轉(zhuǎn)染基于質(zhì)粒的CRISPR/Cas9基因組編輯,建議聯(lián)系polyplus的科學(xué)支持團(tuán)隊(duì):support@polyplus-transferion.c/o/m。
4)jetOPTIMUS®轉(zhuǎn)染試劑應(yīng)該在4 ºC保存,要注意避免多次反復(fù)長時(shí)間開蓋,否則可能會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)染試劑揮發(fā),降低轉(zhuǎn)染效率。
5)轉(zhuǎn)染前一天,確保接種貼壁細(xì)胞密度在60%-80%,對于一些小細(xì)胞和生長緩慢的細(xì)胞,接種密度可適當(dāng)擴(kuò)大2倍。
6)該產(chǎn)品只適合體外轉(zhuǎn)染,不能用于體內(nèi)轉(zhuǎn)染。
操作流程(以24孔板和轉(zhuǎn)染0.5 μg的DNA為例)
1.接種細(xì)胞
為了保證jetOPTIMUS®轉(zhuǎn)染試劑達(dá)到///佳轉(zhuǎn)染效率,建議轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度建議60%-80%左右。通常在24孔板,每孔5萬個(gè)貼壁細(xì)胞接種在500 µL*生長培養(yǎng)基中,培養(yǎng)24小時(shí)后進(jìn)行轉(zhuǎn)染。其他培養(yǎng)板細(xì)胞數(shù)量請參考表1
表1轉(zhuǎn)染前一天,接種的細(xì)胞數(shù)量參考值
培養(yǎng)皿 | 每孔的表面積 (cm²) | 每孔接種細(xì)胞的數(shù)量 | 生長培養(yǎng)基體積(mL) |
96孔板 | 0.3 | 7.5×103 ~2.5×104 | 0.125 |
24孔板 | 1.9 | 4×104 ~ 1×105 | 0.5 |
6孔板 | 9.4 | 1.5 ×105~ 4×105 | 2 |
25cm2培養(yǎng)瓶 | 25 ~ 28 | 2 ×105~ 8.5×105 | 5 |
75cm2培養(yǎng)瓶 | 75 ~ 78.5 | 1×106 ~ 4×106 | 10 |
2.加入轉(zhuǎn)染試劑(轉(zhuǎn)染試劑、DNA用量與培養(yǎng)皿大小有關(guān)系,請參考表2)
表2根據(jù)培養(yǎng)皿的大小,轉(zhuǎn)染試劑、DNA用量參考值
培養(yǎng)皿 | jetOPTIMUS®緩沖溶液的體積(µL) | 每孔DNA的含量(μg) | jetOPTIMUS®轉(zhuǎn)染試劑體積(µL) | 培養(yǎng)基體積 (mL) |
96孔板 | 12.5 | 0.13 | 0.13 ~ 0.19 | 0.125 |
24孔板 | 50 | 0.5 | 0.5 ~ 0.75 | 0.5 |
6孔板 | 200 | 2 | 2~ 3 | 2 |
25 cm2培養(yǎng)瓶 | 500 | 4 | 4 ~ 6 | 5 |
75 cm2培養(yǎng)瓶 | 1000 | 10 | 10 ~ 15 | 10 |
【注】:除此之外,客戶也可以根據(jù)自身?xiàng)l件需求,調(diào)整轉(zhuǎn)染試劑的體積/DNA的濃度。我們建議測試DNA:jetOPTIMUS®試劑比值=1:1~1:1.5(µgDNA:µlRepeagent),具體條件和優(yōu)化指南請參考表3
表3 轉(zhuǎn)染當(dāng)天,根據(jù)培養(yǎng)皿的大小的優(yōu)化指南
培養(yǎng)皿 | jetOPTIMUS®緩沖溶液的體積(µL) | 每孔DNA的含量(μg) | jetOPTIMUS®轉(zhuǎn)染試劑體積(µL) | 培養(yǎng)基體積 (mL) |
96孔板 | 12.5 | 0.10~ 0.20 | 0.10 ~ 0.30 | 0.125 |
24孔板 | 50 | 0.25 ~ 0.75 | 0.25 ~ 1 | 0.5 |
6孔板 | 200 | 1 ~ 3 | 1 ~ 4.5 | 2 |
25 cm2培養(yǎng)瓶 | 500 | 2 ~ 6 | 2 ~ 9 | 5 |
75 cm2培養(yǎng)瓶 | 1000 | 5 ~ 15 | 5 ~ 22 | 10 |
在我們的細(xì)胞轉(zhuǎn)染數(shù)據(jù)庫中可以找到許多細(xì)胞類型的具體條件,如下:w/w/w.polyplus-transferion.c/o/m/resources/cell transferion database/。
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114-15 | 1.5 mL | 6395.00 | |
jetOPTIMUS® in vitro DNA transfection reagent | 117-01 | 0.1 mL | 835.00 |
117-15 | 1.5 mL | 6855.00 | |
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