20131ES06 植物蛋白提取試劑盒
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 20131ES06
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/7/23 14:09:20
- 訪問次數(shù) 451
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號 | 20131ES06 |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
植物蛋白提取試劑盒
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格(元) |
植物蛋白提取試劑盒 | 20131ES06 | 100 T | 785 |
植物蛋白提取試劑盒 | 20131ES10 | 200 T | 1455 |
產(chǎn)品描述
本試劑盒在利用液氮充分磨碎植物組織的同時,采用在變性條件下的利用特殊的試劑對植物細(xì)胞釋放出來的蛋白進(jìn)行提取,試劑A中含有sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多種抑制劑,有效抑制蛋白酶活性,///大程度地保持所抽提蛋白質(zhì)的完整性;而且可以實現(xiàn)植物細(xì)胞、組織或原生質(zhì)體樣品總蛋白的提取。
Yeasen開發(fā)的本產(chǎn)品,每次可以根據(jù)樣本與裂解液的推薦體積,實現(xiàn)包括膜蛋白、核蛋白、胞質(zhì)蛋白以及在植物組織中含有的稀有蛋白在內(nèi)的全蛋白。分離得到的蛋白組份可應(yīng)用于SDS-PAGE、Western Blot、免疫沉淀等。試劑盒的使用次數(shù)按照植物組織樣本提取的量來確定。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
20131ES06(100T) | 20131ES10(200T) | |
試劑A | 50 mL | 100 mL |
試劑B | 0.5 mL | 1 mL |
運輸和保存方法
冰袋下運輸,建議A組分產(chǎn)品分裝保存在-20℃;B組分保存于-20℃,有效期1年。
操作說明
由于A組分溶解較慢,所以實驗前需要提前從冰箱中取出溶解待使用!取適量的A組分,按照B組分與A組分1:100的比例進(jìn)行配置好裂解緩沖液。
1.植物細(xì)胞樣品蛋白提取
1)離心收集植物細(xì)胞,按照每5~10×105細(xì)胞加入100-200μL的裂解緩沖液的比例。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸,在冰上裂解5-10 min。
2)充分裂解后,10000-14000 g離心5 min,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
2.對于植物原生質(zhì)體樣品
1)把組織/剪切成細(xì)小的碎片,制備原生質(zhì)體。(可選)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化原生質(zhì)體,繼續(xù)培養(yǎng)16-48 h,并可以根據(jù)需要給予適當(dāng)?shù)膶嶒灄l件處理。
2)100-500g低速離心收集原生質(zhì)體。
3)按照每5~10×105原生質(zhì)體加入100-200μL的裂解緩沖液。輕彈管底以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的原生質(zhì)體沉淀。如果原生質(zhì)體量較多,必需分裝成5~10×105原生質(zhì)體/管,然后再裂解。
3.對于植物組織樣品
1)取出-80℃低溫保存或者冷凍處理的新鮮植物組織/剪切成細(xì)小的碎片(新鮮組織可用液氮處理后再進(jìn)行剪切)。
2)將植物碎片放入預(yù)冷消毒的研缽中,往研缽中小心加入液氮,然后利用研磨杵充分研磨植物碎片至粉末。
3)轉(zhuǎn)移粉末至干凈的離心管中,按照每100 mg植物組織加入500-1000μL的裂解緩沖液 (如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量),加入裂解液后強(qiáng)烈vortex充分混勻,使其充分裂解;
4)裂解后,10000-14000g離心3-5min,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意事項
1. 使用液氮時,請注意戴上防凍手套,避免液氮凍傷。若研磨的組織量較多,可多次加入液氮,保持植物組織處于充分冷凍狀態(tài)時研磨。
2. 植物細(xì)胞壁的破碎程度會影響蛋白的抽提效果。盡量將植物組織充分研磨粉碎,以破碎細(xì)胞壁。促進(jìn)細(xì)胞蛋白的釋放,同時盡量不要取植物的維管組織。
3.植物在裂解后,產(chǎn)物中經(jīng)常會出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正?,F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實驗;如果需要檢測和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實驗。如果檢測一些常見的轉(zhuǎn)錄因子,通常不必進(jìn)行超聲處理,就可以檢測到這些轉(zhuǎn)錄因子。
4. 可以采用我公司生產(chǎn)的蛋白質(zhì)濃度定量試劑盒(20201ES)對提取樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行定量。
5. 對于SDS-PAGE 電泳,可以采用我公司生產(chǎn)的8分鐘快速考馬斯藍(lán)染色液(20309ES) 對膠進(jìn)行染色。
6 本試劑盒只能夠用于體外實驗,不能夠用于臨床、治療和動物體內(nèi)實驗等。
HB200907