10184ES70 動(dòng)物組織直接PCR試劑盒
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號(hào) 10184ES70
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2023/3/15 9:50:39
- 訪問(wèn)次數(shù) 821
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企業(yè)簡(jiǎn)介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化技術(shù)為驅(qū)動(dòng)，聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷(xiāo)售的高新技術(shù)企業(yè)，通過(guò)打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開(kāi)發(fā)路徑，成為國(guó)內(nèi)少數(shù)同時(shí)覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?；a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測(cè)領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
主營(yíng)業(yè)務(wù)
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢(shì)和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來(lái)，公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售的生物試劑超過(guò)3000種，涵蓋分子、蛋白、細(xì)胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購(gòu)需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細(xì)胞分析系列、細(xì)胞培養(yǎng)系列、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報(bào)告基因檢測(cè)系列等多個(gè)品類的生物試劑，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測(cè)和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。
發(fā)展歷程
榮譽(yù)資質(zhì)
翌圣生物通過(guò)申請(qǐng)商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，不斷加強(qiáng)公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項(xiàng)（其中發(fā)明14項(xiàng)、實(shí)用新型1項(xiàng)、外觀設(shè)計(jì)3項(xiàng)）和45項(xiàng)與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán)，擁有經(jīng)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊(cè)商標(biāo)權(quán)37項(xiàng)以及4項(xiàng)境外注冊(cè)商標(biāo)，是國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
創(chuàng)新平臺(tái)
經(jīng)過(guò)多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新，翌圣生物積極開(kāi)展“產(chǎn)學(xué)研”合作，與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點(diǎn)研究基地的江南大學(xué)展開(kāi)合作，優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達(dá)工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ)，建立了六大核心技術(shù)平臺(tái)——雙向分子酶理性設(shè)計(jì)與定向進(jìn)化平臺(tái)、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺(tái)、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺(tái)、高通量測(cè)序建庫(kù)試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺(tái)、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺(tái)和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺(tái)，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項(xiàng)核心技術(shù)，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開(kāi)發(fā)路徑，覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級(jí)、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運(yùn)營(yíng)的工業(yè)化生產(chǎn)基地，配有噸級(jí)發(fā)酵線、工業(yè)級(jí) AKTA 純化線和全自動(dòng)包裝線。同時(shí)，公司通過(guò)了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證，從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉(cāng)儲(chǔ)運(yùn)輸?shù)葘?duì)生產(chǎn)線進(jìn)行360度管理監(jiān)督，保證產(chǎn)品過(guò)程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。
客戶服務(wù)
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時(shí)的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認(rèn)可，為檢測(cè)公司、治療公司、工具類公司和科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測(cè)序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國(guó)科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國(guó)際頂級(jí)期刊論文發(fā)表中。
公司企業(yè)文化
幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值，讓世界更健康更快樂(lè)
◎ 成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
◎ 具備驅(qū)動(dòng)產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值，讓世界更健康更快樂(lè)”的使命，專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級(jí)，不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù)，助力我國(guó)打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時(shí)，翌圣生物將進(jìn)一步推進(jìn)國(guó)際化戰(zhàn)略，繼續(xù)布局和拓展海外市場(chǎng)，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻(xiàn)力量。
分子生物學(xué)試劑，細(xì)胞生物學(xué)試劑，免疫學(xué)試劑，蛋白組學(xué)試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 200T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 10184ES70 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱
產(chǎn)品編號(hào)
規(guī)格
價(jià)格（元）
Animal Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 動(dòng)物組織直接 PCR 試劑盒
10184ES50
50T
433.00
Animal Tissue Direct PCR Kit (With Dye) 動(dòng)物組織直接 PCR 試劑盒
10184ES70
200T
1453.00
產(chǎn)品描述動(dòng)物組織直接 PCR 試劑盒是一款可直接對(duì)不同動(dòng)物組織進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增的試劑盒，適應(yīng)性廣、穩(wěn)定性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)易。
本試劑盒采用*的裂解緩沖液體系，可以快速的裂解多種動(dòng)物組織樣品并釋放出基因組 DNA，如昆蟲(chóng)足翅、鼠尾、 鼠趾、動(dòng)物皮膚和內(nèi)臟等。裂解產(chǎn)物可以用于 DNA 提取純化、也可以直接用于 PCR 反應(yīng)、也可以在 -20℃ 或以下溫度條件下長(zhǎng)期保存?zhèn)溆谩?/span>
本試劑盒中提供的 2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)具有很強(qiáng)的擴(kuò)增兼容性，不需要額外采用純化提取試劑去除裂解產(chǎn)物中的各種殘骸雜質(zhì)，能直接以待測(cè)樣品裂解液為模板，進(jìn)行高效特異性擴(kuò)增。該試劑為 2 倍濃縮 PCR 反應(yīng)混合液，包含了用于 PCR 擴(kuò)增除模板和引物外的所有組分，大大簡(jiǎn)化擴(kuò)增步驟的操作過(guò)程，降低污染機(jī)率。
該試劑盒可用于動(dòng)物基因擴(kuò)增檢測(cè)、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因型鑒定等。
產(chǎn)品組分編號(hào)
組分
產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格
儲(chǔ)存
10184ES50（50 T）
10184ES70（200 T）
10184-A
Lysis Buffer
10 mL
20 mL × 2
2-8℃
10184-B
Proteases
100 μL
400 μL
-20℃
10184-C
10184-D
2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)
5 × PCR Enhancer
500 μL
200 μL
1 mL×2
800 μL
-20℃
-20℃
a）Lysis Buffer 和 Proteases 兩種組分配合使用于動(dòng)物組織裂解。
b）2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye) 包含 PCR 擴(kuò)增所需要的熱啟動(dòng) Taq DNA 聚合酶、dNTP 和 Mg2+等；已混有溴酚藍(lán)染料作為電泳指示劑， PCR 產(chǎn)物可以直接進(jìn)行電泳。
c）5 × PCR Enhancer ：高GC含量擴(kuò)增（如大于65%）時(shí)，建議使用5 × PCR Enhancer。
運(yùn)輸方法冰袋運(yùn)輸，有效期1年。
保存方式1. 試劑 10184-A【Lysis Buffer】為動(dòng)物組織裂解緩沖液，建議保存于2-8℃。
2. 試劑 10184-B【Proteases】為動(dòng)物組織裂解劑，使用時(shí)請(qǐng)勿長(zhǎng)久開(kāi)蓋，建議保存于-20℃，避免反復(fù)凍融。
3. 試劑 10184-C【2× Tissue Direct PCR Mix (With Dye)】，建議保存于-20℃，避免反復(fù)凍融。
4. 試劑 10184-D【5 × PCR Enhancer】，建議保存于-20℃，避免反復(fù)凍融。
操作方法
1. 在離心管中加入 200 μL Lysis Buffer和2 μL Proteases，輕輕渦旋混勻。
2. 取約 10 mg（長(zhǎng)度2 mm左右）動(dòng)物組織，置于上述離心管中，輕輕渦旋混勻。
3. 55℃孵育5-30 min，然后 95℃處理5 min。
4. 12000 rpm 離心2 min。
5. 將上清轉(zhuǎn)移至新的離心管，-20℃保存或直接用于 PCR 擴(kuò)增。
【注】：
a）Lysis Buffer 與 Proteases 混合后盡快使用，不宜長(zhǎng)期保存；大量樣本操作時(shí)，可以將 Lysis Buffer 與 Proteases 按 100 μL:1 μL 的比例混勻備用。
b）組織應(yīng)取少量并盡量剪碎，以便裂解反應(yīng)更順利進(jìn)行。各組織推薦使用量：鼠尾：長(zhǎng)度2-4 mm；鼠趾：1-4個(gè)；鼠臟器、腦：直徑2-4 mm；斑馬魚(yú)、線蟲(chóng)、果蠅等昆蟲(chóng)組織：1-4個(gè)；細(xì)胞數(shù)量:105-108個(gè)。斑馬魚(yú)、線蟲(chóng)、果蠅等較小樣本的組織，可適當(dāng)減少Lysis Buffer至50-100 μL。昆蟲(chóng)等外殼堅(jiān)硬的樣本，建議剪碎樣本并增加Proteases至4 μL。
c）55℃孵育，一般 5 min 即可滿足多數(shù) PCR 需求，如鼠尾、鼠耳等組織；若需要的 DNA 量較大或樣品較難裂解，可將時(shí)間延長(zhǎng)至 30 min 或更久；裂解時(shí)間可在5-30 min之間調(diào)整，組織塊不需*裂解，殘余的部分在后續(xù)離心步驟中可被除去。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)體系組分
體積（μL）
終濃度
2× Tissue Direct PCR Mix（With Dye）
10
1 ×
Forward Primer（10 μM）
0.5
0.25 μM
Reverse Primer（10 μM）
0.5
0.25 μM
裂解產(chǎn)物（DNA模板）
2
-
無(wú)菌超純水
To 20
-
【注】：各組分使用前應(yīng)充分混勻。
a）模板使用量：建議總體系的5-20%之間，避免超過(guò)總體系的20%。
b）引物終濃度：反應(yīng)性能較差時(shí)，推薦在 0.1- 0.5 μM 范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度。
c）反應(yīng)體系：推薦使用 20 μL，以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
d）體系配制：配制好PCR反應(yīng)體系，置于渦旋儀上渦旋混勻，瞬時(shí)離心將反應(yīng)液集于管底。
e）對(duì)照反應(yīng)：建議進(jìn)行PCR時(shí)，設(shè)置陽(yáng)性和陰性PCR對(duì)照反應(yīng)以便于排除假陽(yáng)性或假陰性的干擾。
PCR反應(yīng)鑒定- PCR反應(yīng)條件循環(huán)步驟
溫度
時(shí)間
循環(huán)數(shù)
預(yù)變性
94℃
5 min
1
變性
94℃
10 sec
35
退火*
60℃
20 sec
延伸
72℃
20 sec
終延伸
72℃
5 min
1
*退火溫度：請(qǐng)參考引物的理論 Tm 值，退火溫度可設(shè)置低于引物理論值5℃，或通過(guò)梯度 PCR 確定最佳溫度。
注意事項(xiàng)：1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織，若為長(zhǎng)期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解，影響 PCR 效率。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服、佩戴口罩、眼罩、一次性手套等采取防護(hù)性措施進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
3. 本產(chǎn)品僅作科研用途！常見(jiàn)問(wèn)題與解決方法
常見(jiàn)問(wèn)題
可能原因
解決方法
陽(yáng)性對(duì)照、待測(cè)樣本均無(wú)條帶。
PCR反應(yīng)體系或反應(yīng)條件不合適。
使用梯度PCR摸索PCR最佳反應(yīng)條件。
PCR試劑保存不當(dāng)失去活性。
2× PCR Mix應(yīng)保存于-20℃，使用時(shí)避免反復(fù)凍融。若使用頻繁，可在4℃短時(shí)間存放。
引物設(shè)計(jì)問(wèn)題。
嘗試重新設(shè)計(jì)引物進(jìn)行檢查。
陽(yáng)性對(duì)照有目的條帶，待測(cè)樣本無(wú)條帶或條帶弱。
不當(dāng)儲(chǔ)存或長(zhǎng)期儲(chǔ)存引起試劑活性喪失。
使用新鮮的試劑。
加入組織裂解液過(guò)量。
增大反應(yīng)體系，或減少裂解液的用量。
樣本裂解混合液保存不當(dāng)或保存時(shí)間過(guò)久，DNA基因組已經(jīng)降解。
裂解混合液可在4℃保存2-3天，盡量使用新制備的裂解液混合液進(jìn)行PCR。
模板加入量不適合。
在反應(yīng)體系5-20%范圍內(nèi)優(yōu)化模板加入量。
PCR循環(huán)數(shù)不足。
適當(dāng)增加PCR的循環(huán)數(shù)，推薦在35-40循環(huán)為佳。因?yàn)槟０鍙?fù)雜，一般PCR反應(yīng)要比用純化的 DNA模板多5-10個(gè)循環(huán)為佳。
非特異性擴(kuò)增
PCR退火溫度太低，循環(huán)數(shù)、引物濃度或模板濃度太高。
提高PCR退火溫度，降低PCR循環(huán)數(shù)、引物濃度或模板濃度。
PCR引物錯(cuò)配。
重新設(shè)計(jì)PCR引物。
配制PCR反應(yīng)體系時(shí)溫度太高或配制完成后放置時(shí)間太久。
PCR反應(yīng)體系的配制在低溫下進(jìn)行，配制完成后盡快進(jìn)行PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
陰性對(duì)照出現(xiàn)目的條帶
操作工具或試劑污染。
實(shí)驗(yàn)所有試劑或器材均應(yīng)高壓滅菌。操作時(shí)應(yīng)小心輕柔，防止將靶序列吸入加樣槍內(nèi)或?yàn)R出離心管外。
樣本間交叉污染。
每個(gè)取樣器只對(duì)一個(gè)樣本使用；或取完一個(gè)樣本后，將取樣器刃口浸入2%的次氯酸鈉溶液中，反復(fù)涮洗，然后用干凈的紙巾擦干殘液。
相關(guān)產(chǎn)品產(chǎn)品名稱
貨號(hào)
規(guī)格
Agarose瓊脂糖HOT
10208ES60/76
100/500 g
YeaRed 核酸染料（10,000× 水溶液）HOT
10202ES76
500 μL
2000 DNA Marker HOT
10501ES60/80
100/1000 T
5000 DNA Marker HOT
10504ES60/80
100 /10×100 T
100 bp DNA ladder
10507ES60/80
100 /10×100 T
1 kb DNA ladder HOT
10510ES60/80
100 /10×100 T
15000 DNA Marker
10512ES60/80
100 /10×100 T
HB210824
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