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LFB髓鞘染色實(shí)驗(yàn)技巧

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應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè)

 

LFB髓鞘染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

 

LFB髓鞘染色簡介:

勞克堅(jiān)牢藍(lán)(LFB)屬于銅-酞箐染料,在酒精溶液中具有與髓鞘磷脂結(jié)合的染色特性。應(yīng)用LFB髓鞘染色可以很好地顯示出神經(jīng)組織的髓鞘結(jié)構(gòu)。

LFB髓鞘染色實(shí)驗(yàn)意義:

LFB染色觀察染色陽性纖維的深淺和多少,還可用來定量分析脫髓鞘病變及髓鞘再生等有關(guān)髓鞘改變情況。

實(shí)驗(yàn)步驟:

(1)石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯I 20min-二甲苯I 20min-無水乙醇I 10min-無水乙醇I 10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min- 70%酒精5min蒸餾水洗。

(2) 染色:切片置于0.1% LFB染液60°C孵育過夜, 自來水沖洗。

(3)分化:切片放入70%乙醇中(無固定時(shí)間) ;切片浸入0.05%碳酸鋰中,鏡下控制分色時(shí)間至分色*(可見灰質(zhì)部分顏色變淡) ;如分化不好這兩步交替進(jìn)行幾次至鏡檢滿意,水洗。

(4)伊紅復(fù)染: 0.1%伊紅復(fù)染1min,水洗。

(5)封片:電吹風(fēng)吹干或烘箱吹干;二甲苯逶明數(shù)分鐘,中性樹膠封片。

(6)顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果: 

經(jīng)髓鞘呈藍(lán)色;其他成分呈紅色。

實(shí)驗(yàn)技巧:

(1) 切片若為石蠟切片,要在二甲苯中先脫蠟,再至無水乙醇。

(2) 0.05%碳酸鋰水溶液分色應(yīng)該在顯微鏡下進(jìn)行,至背景呈灰色為止。70%酒精再次分色時(shí),至背景無色為止。

(3) LFB染色完后, 可用焦油紫溶液或蘇木素-伊紅復(fù)染,這樣能更好地顯示出細(xì)胞的形態(tài)。

(4) 復(fù)染之后要入正丁醇漂洗脫水,這樣染色效果更佳。

(5) 溶液配制:勞克堅(jiān)牢藍(lán)1g, 95%酒精100ml, 10%冰醋酸0.5ml。 混勻后過濾,室溫保存。

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測

CCK8檢測

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA測序

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

探針合成

ATP/ADP檢測

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測

細(xì)胞生長曲線的測定

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)



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