LabServ細(xì)胞培養(yǎng)板，提供6孔/12孔/24孔/96孔，四種規(guī)格；每孔均有數(shù)字和字母標(biāo)注，易于定位標(biāo)識(shí)，降低出錯(cuò)情況；板蓋采用斜邊導(dǎo)向設(shè)計(jì)，防止交叉污染。

• 高透明度醫(yī)用級(jí)聚苯乙烯材質(zhì)，真空等離子TC表面處理，保證孔與孔的*性

• 萬級(jí)無塵車間生產(chǎn)，無菌，無熱原

• 底部的薄壁設(shè)計(jì)，能大限度降低細(xì)胞培養(yǎng)中因?yàn)闇囟纫鸬倪吘壭?yīng)

• 提供4種規(guī)格：6孔、12孔、24孔、96孔

• 平底，易于細(xì)胞生長(zhǎng)

• 每孔均有數(shù)字和字母標(biāo)注，易于定位

• 板蓋的斜邊導(dǎo)向設(shè)計(jì)，防止交叉污染

• 易撕型醫(yī)學(xué)紙塑包裝，具有優(yōu)良的阻菌功能，每塊培養(yǎng)板均單獨(dú)包裝

• 每個(gè)批次都進(jìn)行了細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)

Tips:

1、藥物篩選和對(duì)照性實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)板是較為不錯(cuò)的選擇

2、6孔板的細(xì)胞數(shù)量適宜做western blot（3孔對(duì)照/3孔實(shí)驗(yàn)）

3、96孔板是單克隆篩選的*，應(yīng)避免邊緣效應(yīng)

4、細(xì)胞爬片一般放在6孔、12孔、24孔板里使用

5、常見細(xì)胞培養(yǎng)污染及防治

常見污染有細(xì)菌污染、霉菌污染、支原體污染、真菌污染、原蟲污染等。

6、細(xì)胞培養(yǎng)過程中污染的來源主要有以下幾條途徑：

• 不潔的動(dòng)物組織標(biāo)本，很多動(dòng)物組織本該是無菌的，但由于取材時(shí)不小心也會(huì)有污染的機(jī)會(huì)。另外有的組織本身含有細(xì)菌，如

取材時(shí)不用濃的抗生素洗液洗滌浸泡，也會(huì)帶菌，造成細(xì)胞污染。

• 空氣中含有大量的微生物，如果操作室與外界隔離不嚴(yán)或消毒不充分，很容易造成污染。另外，凈化工作臺(tái)使用過久，濾板未定期更換或長(zhǎng)久不更換，工作時(shí)不帶口罩或外界氣流過強(qiáng)，污染空氣進(jìn)入操作區(qū)，也會(huì)導(dǎo)致污染。春夏季南方地區(qū)多雨，空氣濕度大，含菌量多，工作不注意也易造成污染。

• 清洗消毒培養(yǎng)用物品、材料洗刷不凈，培養(yǎng)用液和器材滅菌不*也會(huì)引入微生物和有毒物質(zhì)。

• 操作來自操作者的污染主要有以下幾方面：

- 器材和溶液使用前未仔細(xì)檢查是否污染過，或者是否已經(jīng)消毒滅菌處理過，或者雖經(jīng)處理，時(shí)隔已久又末重新處理。

- 操作者未戴口罩、帽子，呼出氣中含有細(xì)菌和支原體。

- 培養(yǎng)瓶口未用酒精擦和燒灼。

- 操作者不當(dāng)心，動(dòng)作不正確而將吸管或無菌器具碰到了污染的物品，如手上皮膚和瓶子外壁等。

- 操作者操作時(shí)大聲說話，來回走動(dòng)揚(yáng)起灰塵等

- 細(xì)胞傾液時(shí)倒出培養(yǎng)瓶或者滴落在超凈臺(tái)上，未及時(shí)擦凈或者灼燒。

- 移液管吸取液體時(shí)將空氣中的氣流吸入培養(yǎng)瓶中。

- 長(zhǎng)時(shí)間的將離心管放在離心機(jī)中，可能由于口沒有*封閉而造成污染。

- 同一移液管交叉污染多瓶細(xì)胞。

- 血清，非正規(guī)來源，潛在病毒和支原體污染

1.細(xì)菌：

細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀，不同的細(xì)菌類型，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會(huì)快速渾濁變黃，有時(shí)候有異味，對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響明顯。

預(yù)防及補(bǔ)救措施：

• 使用LabServ系列耗材，已無菌無熱源處理。

• 可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理，例如雙抗青霉素，鏈霉素。或者四環(huán)素，慶大霉素。

• 嚴(yán)格無菌操作

2. 霉菌：

培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，37度孵箱培養(yǎng)2-3天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細(xì)胞仍可生長(zhǎng)，但時(shí)間長(zhǎng)之后，細(xì)胞的活力狀態(tài)變差。

解決方法：

• 用硫酸銅溶液擦拭培養(yǎng)箱，再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。

• 被霉菌污染后，可把所有細(xì)胞暫時(shí)轉(zhuǎn)移，采用過氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把過氧乙酸放置在孵箱內(nèi)一個(gè)小時(shí)，使其蒸汽彌漫。待過氧乙酸的氣味消散后，再移入細(xì)胞。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加3u/mL的兩性霉素或制霉菌素或放線菌素D或雙抗。

3. 支原體：

黑色的，好象多為多形,光學(xué)顯微鏡很難觀察到，國(guó)內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測(cè)，而支原體是牛血清中較常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細(xì)胞以后，細(xì)胞病變不很明顯，只是慢慢si去。

解決方法：

• 支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有：抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。要注意的是：支原體沒有細(xì)胞壁，故作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如內(nèi)酰胺類、萬古霉素等是不敏感的；對(duì)多粘菌素、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體較有抑制活性抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類等，氨基糖苷類、氯霉素對(duì)支原體有較小的抑制作用。必要時(shí)更換所有培養(yǎng)用物。通常，濾過除菌的方法對(duì)支原體是沒有作用的。

4. 真菌：

一般培養(yǎng)液清亮，不變色，鏡下有絲狀物，有些真菌開始很像死細(xì)胞碎片，只是它很多很多的小塊很清楚，象珊瑚狀，不象細(xì)胞碎片分不清，慢慢的會(huì)長(zhǎng)出很細(xì)的黑色絲狀物。真菌生長(zhǎng)的比較慢，不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn)，但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了，也很難救活了。

解決方法：

• 果斷扔掉，然后*消毒滅菌培養(yǎng)間，CO2培養(yǎng)箱，器皿和培養(yǎng)液。