團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞；WCF價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
細(xì)胞名稱  團(tuán)頭魴尾鰭細(xì)胞；WCF價(jià)格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 團(tuán)頭魴細(xì)胞由長江水產(chǎn)所建立鑒定，用于鯉尾鰭魚基礎(chǔ)研究和病毒疾病防治研究。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS　

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C25

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶 同工酶鑒定

染色體

使用權(quán)限 A類

貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Cripto-1/FITC 熒光素標(biāo)記表皮生長因子相關(guān)肽抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-KSR1/FITC 熒光素標(biāo)記Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh CCDC138 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白138抗體 規(guī)格 0.2ml

Glypican 4(Glypican proteoglycan 4) 磷脂?；嫉鞍拙厶?4抗原 0.5mg

HECTD2 英文名稱： E3連接酶抑制素受體2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh SLU7 SLU7蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-KSR1/FITC 熒光素標(biāo)記Ras信號轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit 小鼠白介素7Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Caspase-6 (NT)/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ELOVL6 長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL6抗體 規(guī)格 0.2ml

phytohaemagglutinin,PHA ELISA Kit 植物血凝素 96T

METTL11A 英文名稱： 甲基化樣蛋白11抗體(N端) 0.1ml

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr743) 英文名稱： 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml

Anti-Caspase-6 (NT)/FITC 熒光素標(biāo)記半胱胺酸蛋白酶蛋白-6抗體(N端)IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM 兔抗人IgM 1mg

C9orf59 英文名稱： 9號染色體開放閱讀框59抗體 0.2ml

缺氧誘導(dǎo)因子1α 抗體 Anti-HIF-1α 0.1ml

Anti-PKN2 /FITC 熒光素標(biāo)記蛋白激酶N2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-ROCK1(Thr455/Ser456) 磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Human Fibrinogen (親和純化)人纖維蛋白原Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg
LIF 小鼠白血病抑制因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-FAK2/Pyk2 富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

ENA-78/CXCL5(Human Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit 人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78 96T

Secretin 英文名稱： 分泌素抗體 0.1ml

CST8 英文名稱： 胱抑素8/半胱酸蛋白酶抑制劑8抗體 0.2ml

Anti-FAK2/Pyk2 富含脯氨酸的酪氨酸激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml