細(xì)胞名稱  長尾綠猴胚胎細(xì)胞；4179培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞，上皮細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%  

傳代方法 消化3-5分鐘。1：

2。3天內(nèi)可長滿。  

傳代情況 PN5

凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
長尾綠猴胚胎細(xì)胞；4179培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-GLUT12/slc2a12/FITC 熒光素標(biāo)記葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-OVA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Bid BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Cytomegalovirus (CMV)PP65 細(xì)胞巨化病毒(多肽) 0.5mg

HDAC7 英文名稱： 組蛋白去乙?；?抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh RASSF7 RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-OVA/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Integrin alpha E2 peptide 整合素alpha E2抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-BTK/BPK(Tyr223) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體 規(guī)格 0.1ml

胰蛋白酶工作液(水劑、中度消化) 10ml pH 7.8, 0.05%，免疫組化用

VCAM-1 英文名稱： 血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子抗體 0.1ml

DENND2D 英文名稱： DENN域內(nèi)含蛋白2D抗體 0.2ml

Anti-phospho-APS(Ser598) 磷酸化APS抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rabbit anti-MG IgG whole serum 兔抗長爪沙鼠IgG抗血清 1ml

FAHD1 英文名稱： FAHD1蛋白抗體 0.2ml

白介素13抗體 Anti-IL-13 0.1ml

Anti-PRMT1/FITC 熒光素標(biāo)記蛋白質(zhì)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-PTPN6(Tyr476) 磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit Anti-human IgM Whole serum 兔抗人IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
Integrin Alpha 4/ITGA4(Integrin alpha 4) 整合素-α(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml

Anti-CD24 CD24抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAK7/PAK5/MBT 激活激酶PAK7抗體 規(guī)格 0.2ml

EFNA1 Kit Human 人 Ephrin-A1 / EFNA1 ELISA配對抗體 ELISA

Tropomyosin 英文名稱： 原肌球蛋白1抗體 0.1ml

NLF3 英文名稱： 限局性核因子3抗體 0.2ml

Anti-CD24 CD24抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。