細(xì)胞名稱  婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞；BOS-3培養(yǎng)
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性婆羅門牛的耳部皮膚組織，2010年由中科院昆明細(xì)胞庫建立。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 1：

2傳代；3-4天一次  

傳代情況 P2

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 熒光法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類
婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞；BOS-3培養(yǎng)操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長曲線
貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。
Anti-Phospho-Cyclin B1 (Ser133) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化周期素B1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-LH/Biotin 生物素標(biāo)記抗人促黃體生成素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Caspase-3(Active) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗體 規(guī)格 0.1ml

phospho-ERK1/MAPK-1/2(pThr183 + pTyr185) 磷酸化原活化蛋白激酶1/2抗原 0.5mg

HDAC11 英文名稱： 組蛋白去乙?；?1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh SIRT6 沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-LH/Biotin 生物素標(biāo)記抗人促黃體生成素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
IP-10/CXCL10 ELISA Kit 大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-5-HTR3/FITC 熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FNDC2/5 Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白2/5抗體 規(guī)格 0.2ml

Trx ELISA Kit 大鼠硫氧化還原蛋白 96T

MAGEC1 英文名稱： 黑色素瘤相關(guān)抗原C1抗體 0.2ml

ARHG7 英文名稱： p21活化蛋白激酶ARHG7抗體 0.2ml

Anti-5-HTR3/FITC 熒光素標(biāo)記5-羥色胺受體3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit anti-MG IgG/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.1ml

FOXD3 英文名稱： 叉頭蛋白D3抗體 0.2ml

多巴胺受體-D2抗體 Anti-DAD2 0.1ml

Anti-PAX2/FITC 熒光素標(biāo)記配對盒基因2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser939) 磷酸化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-mouse IgG/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗小鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
CD68 CD68抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CCL4/MIP-1 Beta 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PCDHA7 原鈣粘附蛋白α7抗體 規(guī)格 0.2ml

ECM1 Kit Human 人 ECM1 ELISA配對抗體 ELISA

TBLR1 英文名稱： 轉(zhuǎn)導(dǎo)素β1X連鎖受體蛋白1抗體 0.2ml

CLCN2 英文名稱： 氯離子通道蛋白2抗體 0.2ml

Anti-CCL4/MIP-1 Beta 巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml