倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞；Lec1價(jià)格懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術(shù)語(yǔ)的定義會(huì)有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過(guò)了遺傳改造。
細(xì)胞名稱  倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞；Lec1價(jià)格
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞

品牌 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C)是從脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑選出來(lái)的能抗麥芽凝集素的突變株。 Lec1 缺乏稱作GlcNAc-T1的糖基轉(zhuǎn)移酶，從而N-連接碳水化合物被阻斷在Man5GlcNAc2Asn中間體。 對(duì)于研究N-連接糖基化改變對(duì)內(nèi)源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的糖蛋白的功能和區(qū)隔化的影響，這些細(xì)胞十分有用。

培養(yǎng)條件 α－MEM：

Alpha Minimum Essential Medium (with N?
貼壁細(xì)胞: 對(duì)于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強(qiáng)度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進(jìn)行消化，(根據(jù)經(jīng)驗(yàn))，晃動(dòng)使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見(jiàn)細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動(dòng)瓶底使細(xì)胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細(xì)胞基本成單個(gè)懸浮，然后分置其它無(wú)菌培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液1次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，以0.25％胰酶消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100％，計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
Anti-Insulin(1-51 protein)/FITC 熒光素標(biāo)記胰島素1-51蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-RUNX1/AML1(phospho SerS303) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ANKRD45/CT117 /抗原117 規(guī)格 0.2ml

Rabbit Anti-mouse IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

GSTA3 英文名稱： 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶A3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格 0.1ml

Anti-RUNX1/AML1(phospho SerS303) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化急性髓細(xì)胞白血病1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LPLUNC1 人鼻咽癌癌基因多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-ALR 肝再生增強(qiáng)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Abl(Thr754) 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 規(guī)格 0.1ml

鏈酶蛋白酶濃縮液(20X) 1ml 1% pH 7.2

Vinexin 英文名稱： 細(xì)胞間粘附蛋白Vinexin抗體 0.1ml

phospho-DAAM1 (Thr361) 英文名稱： 磷酸化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體 0.1ml

Anti-ALR 肝再生增強(qiáng)因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

FMDV Polyprotein (3D polymerase) 英文名稱： 口蹄疫病毒 0.2ml

細(xì)胞色素P450單氧化酶抗體 Anti-CYP450 0.2ml

Anti-Pan-ras/FITC 熒光素標(biāo)記抗Pan ras抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Tyk2(Tyr1054/1055) 磷酸化非受體酪氨酸蛋白激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-bovine IgG/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
Anti-Phospho-PRAS40 (Thr246)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶AKT底物1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

dog IgM (親和純化) 狗IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg

丙型肝炎病毒-NS4a抗體 Anti-HCV-NS4a 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG 驢抗豚鼠IgG 1mg

FAM153B 英文名稱： FAM153B蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KA1(Thr348) 磷酸化磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

dog IgM (親和純化) 狗IgMMulti-class antibodies規(guī)格： 1mg