細胞名稱  大鼠正常食管上皮細胞；RNEEC/HL-011培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代，3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測 陰性　

STR

同工酶

染色體

使用權限 未定
大鼠正常食管上皮細胞；RNEEC/HL-011培養(yǎng)貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?/span>
操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti- Alpha-HCG/FITC 熒光素標記α亞基人絨毛膜促性腺激素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-PDGF-BB/FITC 熒光素標記血小板源性生長因子-BB抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh BASC4 癌擴增序列蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml

Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原) 0.5mg

GRP94 英文名稱： 葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-rat IgG/FITC FITC標記的兔抗大鼠IgG 規(guī)格 0.3ml

Anti-PDGF-BB/FITC 熒光素標記血小板源性生長因子-BB抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
L-selectin 大鼠可溶性L-選擇素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-EEF2k 真核延伸因子激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Myosin heavy chain 1 肌球蛋白重鏈抗體 規(guī)格 0.2ml

F XII a(Human activated coagulation factor XII ) ELISA Kit 人活化凝血因子Ⅻ 96T

SFTPD 英文名稱： 肺表面活性蛋白D抗體 0.1ml

Cbx8 英文名稱： 染色質(zhì)結(jié)合蛋白Cbx8抗體 0.2ml

Anti-EEF2k 真核延伸因子激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

GIMAP1 英文名稱： GTP酶IMAP家族成員1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh APBA3/Mint3/X11gamma β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-IL-27R/TCCR/FITC 熒光素標記白細胞介素27受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml

anti-RAP1A/FITC 熒光素標記抗Rap1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-HSP-60/FITC 熒光素標記熱休克蛋白-60蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-PNK1/PNKP/FITC 熒光素標記多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ASC2/POP1 感染性蛋白*蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml

Donkey Anti-Goat IgG/Cy3 Cy3標記的驢抗羊IgG 0.1ml

GLT25D2 英文名稱： 糖基轉(zhuǎn)移酶25結(jié)構域2/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-mouse IgG/Bio 生物素標記的兔抗小鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-PNK1/PNKP/FITC 熒光素標記多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。