大鼠胰島細胞瘤細胞；INS-1價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)，如要高濃度可先離心1000rpm，5min后加入*培養(yǎng)基，輕輕吹勻后，分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是，在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。
細胞名稱  大鼠胰島細胞瘤細胞；INS-1價格
形態(tài)特性 不規(guī)則，多角

品牌 貼壁生長

特征特性 該細胞源自X射線照射的移植胰島瘤的大鼠，胰島素陽性，可合成胰島素原I和II，可用于beta細胞功能研究。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；50 μmol/L 2－巰基

傳代方法

傳代情況 C9

凍存條件 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法（-）　

STR -

同工酶

染色體

使用權限 A類

貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據(jù)經(jīng)驗)，晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘，鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后，輕輕振動瓶底使細胞全部脫落，加入2-3ml*培養(yǎng)基后，輕輕吹打，使細胞基本成單個懸浮，然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi)，加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。

操作流程：
1.1 主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%胰酶消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞，以0.25％胰酶消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100％，計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d，繪制細胞生長曲線
Anti-Contactin-6/mNB-3/FITC 熒光素標記NB-3神經(jīng)粘附蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-V.cholera Ogawa/Biotin 生物素化01群小川型霍亂弧菌抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

脂肪細胞增強結合蛋白1 Anti-AEBP1 0.1ml

Mouse Anti-human IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗人IgM 0.1ml

GREB1 英文名稱： 癌雌激素調(diào)控蛋白GREB1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Proteasome 20S alpha 2 蛋白酶體PSMα2抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-V.cholera Ogawa/Biotin 生物素化01群小川型霍亂弧菌抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LZM(Human Lysozyme) ELISA Kit 人溶菌酶Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-NPY2R 神經(jīng)肽Y受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh IGSF12/CD300 免疫球蛋白超家族成員12抗體 規(guī)格 0.2ml

CTGF ELISA Kit 大鼠結締組織生長因子 96T

PNPO 英文名稱： 磷酸吡哆醇氧化酶抗體 0.2ml

CMTM2 英文名稱： 趨化素樣因子超家族成員2抗體 0.2ml

Anti-NPY2R 神經(jīng)肽Y受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG 兔抗大鼠IgG 1mg

FLAG Tag (NT) 英文名稱： FLAG Tag標簽抗體(N端) 0.1ml

熱休克蛋白-90β 抗體 Anti-HSP-90β 0.1ml

Anti-PMP-22/FITC 熒光素標記外周髓鞘蛋白-22IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Rb(Ser612) 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-Mouse IgM Whole serum 羊抗小鼠IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
Anti-phospho-PKC delta (Thr505)/FITC 熒光素標記磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Donkey Anti-rabbit IgG 驢抗兔IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg

人類血紅蛋白α1抗體 Anti-HBA1 0.1ml

Dog IgM/Bio 生物素標記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml

FAM40A 英文名稱： FAM家族蛋白40A抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-RSK2(Tyr529) 磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體 規(guī)格 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG 驢抗兔IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg