大鼠肝細胞;BRL價格
- 公司名稱 上海研生實業(yè)有限公司
- 品牌 ATCC
- 型號
- 產地 進口/國產
- 廠商性質 經銷商
- 更新時間 2018/5/7 14:47:32
- 訪問次數(shù) 279
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大鼠肝細胞;BRL價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 大鼠肝細胞;BRL價格
形態(tài)特性 上皮細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 DMEM-H:
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:
3。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內,加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線
Anti-Phospho-MK6 (Ser202)/FITC 熒光素標記磷酸化原活化蛋白激酶MKK6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-TRAF3/CD40bp /FITC 熒光素標記CD40結合蛋白/CD40受體相關因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABHD3 肺α/β水解酶蛋白3抗體 規(guī)格 0.2ml
Rabbit Anti-Avidin/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的兔抗親和素 0.1ml
GRB10 英文名稱: 生長因子受體結合蛋白10抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh RAB8 ras癌基因家族Rab8蛋白抗體(原癌基因c MEL) 規(guī)格 0.1ml
Anti-TRAF3/CD40bp /FITC 熒光素標記CD40結合蛋白/CD40受體相關因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
M2-PK(Mouse Pyruvate Kinase) ELISA Kit 小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CD58/LFA-3/FITC 熒光素標記淋巴細胞功能相關抗原-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DPY19L1 短粗矮胖19蛋白樣1抗體 規(guī)格 0.2ml
RV IgM 風疹胞病毒 IgM(捕獲法二步法)
Midkine 英文名稱: 中期因子/肝素結合生長因子抗體 0.1ml
Annexin A7 英文名稱: 膜粘連蛋白7抗體 0.1ml
Anti-CD58/LFA-3/FITC 熒光素標記淋巴細胞功能相關抗原-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml
GIMAP7 英文名稱: GTP酶IMAP家族成員7抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APE/Girdin 肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體 規(guī)格 0.1ml
Anti-IL-17(Interleukin-17)human/FITC 熒光素標記白介素-17抗體(人)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
Anti-Phospho-Rad17 (Ser645) /FITC 熒光素標記磷酸化細胞周期檢控Rad17蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Anti-phospho-PKC delta (Tyr311)/FITC 熒光素標記磷酸化蛋白激酶C亞性D型抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Donkey Anti-Guinea IgG 驢抗豚鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg
抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗體 Anti-HBV/pre S1/S2 protein 0.1ml
Dog IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml
FRMD8 英文名稱: FRMD8蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-RSK2 (Ser227) 磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體 規(guī)格 0.1ml
Donkey Anti-Guinea IgG 驢抗豚鼠IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 1mg