總體DNA甲基化極易定量檢測試劑盒（比色法）  

介紹 

產(chǎn)品特性： 總體DNA甲基化極易定量檢測試劑盒（比色法）檢測全基因組DNA甲基含量時是非常 適合的.不論是從哺乳類動物,植物,真菌,細菌,病毒和培養(yǎng)細胞,新鮮與冷凍的組織,石蠟包埋 組織,血漿/血清樣本,體液等樣本. 此品尤其適合僅有少量樣品在激光顯微捕獲了的解剖樣 品和胚胎。不論是單鏈DNA和雙鏈DNA，片段在200bp到全長都很適用。 

DNA輸（比色法）入量：     每次分析DNA的上樣量為20 - 200ng。*DNA的輸入量為100 ng,在某些種屬中，組 織樣本間的甲基化的DNA含量一般都小于1%的總DNA。 

（比色法）試劑盒曾經(jīng)對來自小鼠大腦和海拉細胞系的樣品成功地進行了 5-hmC 的定量，所得到 的結(jié)果與用 HPLC 和 LC-MS 的方法相當。通過使用本試劑盒，研究者們*在正常人類腦部 組織和結(jié)腸組織中發(fā)現(xiàn)了高豐度的 5-hmC。同時，研究結(jié)果還顯示，正常人類腦部組織和結(jié) 腸組織中 5-hmC 分別占總甲基化胞嘧啶(5-mC 和 5-hmC 的總和)的 32%和 16%。相反，在結(jié) 腸癌細胞系(HCT116)和宮頸癌細胞系(HeLa)中，5-hmC 的比率很低，幾乎沒有。 

    一些核苷酸的修飾改變，5-羥甲基胞嘧啶，5-甲?；奏?，5-羧基胞嘧啶，已經(jīng)被發(fā) 現(xiàn)在人類和小鼠的組織以及胚胎干細胞中。在哺乳動物中，這些修飾的核苷酸可通過 5-甲 基胞嘧啶的氧化反應(yīng)得到，中間伴隨有 TET 酶家族介導(dǎo)的反應(yīng)。 

（比色法）

這條技術(shù)路線圖表明：胞嘧啶的不同存在形式在調(diào)節(jié)基因功能中發(fā)揮著關(guān)鍵的作用，其 中 DNA 甲基化的結(jié)構(gòu)和模式尤為重要。 精確和便利的檢測 5-mC 水平，對于 DNA 在不同的生理和病理過程中的變化，變得非常 重要，尤其是癌癥。基于色譜分析技術(shù)比如：HPLC 和質(zhì)譜分析法：TLC 來檢測 5-mC。但是， 這些方法耗時，通量低，高成本。為了解決這些問題，我們的技術(shù)團隊提供了一系列甲基化 DNA定量檢測的方法來定量檢測 5-mC或甲基化的 DNA和更為深入的改變甲基化 DNA實驗， 優(yōu)化出了：總體 DNA甲基化極易定量檢測試劑盒（比色法）。 

本試劑盒有以下優(yōu)點和特性： l 快速：減少的步驟，整個操作僅需要 2 小時； l 穩(wěn)定性：優(yōu)化的試劑盒組分，允許在做復(fù)孔時，有更大的“觸發(fā)信號”，盡量減少變化；

 l 方便性：固定的低背景噪音，從而消除了 DNA 變性和板孔的限定性； l 靈敏度：檢測下限低至 0.05%的甲基化 DNA，輸入量在 100ng； l 特異性：高效特異結(jié)合 5-mC，在復(fù)孔的濃度范圍內(nèi)，對于未甲基化的胞嘧啶和羥甲基 的胞嘧啶無特異性反應(yīng)，僅對甲基化 DNA（5-mC）進行高度專一的檢測; l 通用型：陽性與陰性對照，對于任何種屬的甲基化 DNA 狀態(tài)進行定量檢測是非常理想 的； l 精確性：標準的陽性對照可以得到標準曲線，可以與 HPLC-MS 相媲美，用時短，效率 高，。 l 靈活性：微孔板（96 孔）的設(shè)計使實驗更靈活，無論對于手動還是高通量分析簡單、 可信和檢測實驗條件恒始終如一。 

注：基于同一樣本分 2 份來測定。