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WERSTER 進(jìn)口化學(xué)發(fā)光多功能成像系統(tǒng)

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一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

本試劑盒是化學(xué)發(fā)光系統(tǒng),用于檢測(cè)固定在膜上的蛋白或核酸,靈敏度高,背景低,檢測(cè)靈敏度可達(dá)低飛克(femtogram)級(jí)乃至飛克級(jí)以下,適用于檢測(cè)極痕量蛋白或核酸。發(fā)光信號(hào)持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng),半小時(shí)以后仍可維持75%的發(fā)光,便于反復(fù)曝光操作。與其他 ECL 化學(xué)發(fā)光底物相比,可顯著減少樣本及一抗和二抗的使用量。

二、原理:

極敏型ECL化學(xué)發(fā)光底物試劑盒用于檢測(cè)直接或間接標(biāo)記辣根過氧化物酶(HRP)的抗體、抗原或者核酸。蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上,以HRP標(biāo)記的抗體或探針結(jié)合膜上的目的蛋白或核酸,洗膜后置于用本產(chǎn)品配制的ECL工作液中,室溫孵育數(shù)分鐘,HRP使工作液中的魯米諾(Luminol)氧化并發(fā)光,試劑中添加的增強(qiáng)配方可以使這種發(fā)光得到*增強(qiáng),從而能夠檢測(cè)更低表達(dá)量的蛋白質(zhì)或核酸。此光經(jīng)X光膠片或者電子裝置感光記錄下來,可清晰顯示蛋白質(zhì)或核酸條帶。

三、產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn):

低飛克級(jí)靈敏度——*的靈敏度,能快速檢測(cè)更廣泛的蛋白范圍,可檢測(cè)低飛克級(jí)乃至飛克以下的蛋白量。

信號(hào)穩(wěn)定——發(fā)光時(shí)間較長(zhǎng),能進(jìn)行多次曝光,半小時(shí)以后仍可維持75%的發(fā)光。

信號(hào)強(qiáng)——發(fā)光信號(hào)比對(duì)碘苯酚增強(qiáng)的 HRP-魯米諾檢測(cè)體系得到*增強(qiáng)。

穩(wěn)定性較高——試劑盒可在4度穩(wěn)定存放一年。

節(jié)約抗體——需要更少(稀釋更多)的一抗和二抗,特別節(jié)省抗體(*用量:一抗0.01-0.2 μg/mL,二抗2-10 ng/mL)。

四、使用方法:

1. 印跡膜制備:執(zhí)行常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記的抗體或者HRP標(biāo)記的核酸探針孵育、洗膜;ECL工作液含有HRP催化的發(fā)光底物,檢測(cè)系統(tǒng)必須基于HRP酶標(biāo)記的抗體或者核酸探針。充分的洗滌對(duì)于降低背景非常重要,所有步驟均在室溫下完成。

2. ECL工作液的配置:在使用前取等量A液和B液,充分混勻后盡快使用;將膜片置混合液中,于室溫下孵育約2分鐘,每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2ml以覆蓋全膜片,注意不要在膜片表面形成氣泡。

3.蛋白或核酸信號(hào)顯現(xiàn):

1). 用平頭鑷鉗住膜片,垂直置于吸水紙上以吸去過量試劑,僅留下少量液體覆蓋表面,不可讓膜*干燥;

2). 將膜片置于保鮮膜上,吸附蛋白面朝上,小心趕盡氣泡;

3). 用電子裝置感光,或在暗室中用X光片曝光;

4). 根據(jù)信號(hào)強(qiáng)弱適當(dāng)調(diào)整曝光時(shí)間,也可選擇不同時(shí)間多次曝光,以取得更佳效果。

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