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蛋白質(zhì)純化實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

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上海研謹(jǐn)生物科技有限公司提供RT-PCR技術(shù)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、原位雜交技術(shù)服務(wù)、免疫沉淀技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、PCR實(shí)驗(yàn)服務(wù),并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑、免疫學(xué)檢測(cè),ELISA試劑盒、生化試劑盒、分析標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、食品安全檢測(cè)試劑、動(dòng)物疫病類檢測(cè)產(chǎn)品、獸藥殘留檢測(cè)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)等,應(yīng)用覆蓋藥物分析領(lǐng)域、食品安全領(lǐng)域、聚合物研究領(lǐng)域、環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,客戶廣泛分布于食品、制藥、第三方檢測(cè)、環(huán)境測(cè)試機(jī)構(gòu)、化工、科研院校、生物工程等行業(yè)。

主營:

1生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、

2.ELISA試劑盒、分離液、分離液試劑盒

3.細(xì)胞:*細(xì)胞、國產(chǎn)腫瘤細(xì)胞、國產(chǎn)正常細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞

4.食品安全檢測(cè)試劑、動(dòng)物疫病類檢測(cè)產(chǎn)品、獸藥殘留檢測(cè)試劑

5.耗材:常用實(shí)驗(yàn)耗材、移液器


公司主營: 各種實(shí)驗(yàn)代做:WB代做,免疫組化,PCR代做,細(xì)胞檢測(cè),食品安全檢測(cè)試劑,獸藥殘留檢測(cè)試劑,動(dòng)物疫病類檢測(cè),銷售高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品,ELISA試劑盒,細(xì)胞,血清,等等

產(chǎn)地類別 國產(chǎn) 價(jià)格區(qū)間 面議
應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

                  蛋白質(zhì)純化實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

 

蛋白質(zhì)純化簡(jiǎn)介:

蛋白純化要利用不同蛋白間內(nèi)在的相似性與差異,利用各種蛋白間的相似性來除去非蛋白物質(zhì)的污染,而利用各蛋白質(zhì)的差異將目的蛋白從其他蛋白中純化出來。每種蛋白間的大小形狀、電荷、疏水性、溶解度和生物學(xué)活性都會(huì)有差異,利用這些差異可將蛋白從混合物如大腸桿菌裂解物中提取出來得到重組蛋白。

蛋白質(zhì)純化的實(shí)驗(yàn)方法:

蛋白的純化大致分為粗分離階段和精細(xì)純化階段二個(gè)階段。般蛋白純化采用的方法為樹脂法。粗分離階段主要將目的蛋白和其他細(xì)胞成分如DNA、RNA等分開,由于此時(shí)樣本體積大.成分雜,要求所用的樹脂高容量、高流速、顆粒大、粒徑分布寬.并可以迅速將蛋白與污染物分開,必要時(shí)可加入相應(yīng)的保護(hù)劑(例如蛋白酶抑制劑)。防止目的蛋白被降解。精細(xì)純化階段則需要更高的分辨率,此階段是要把目的蛋白與那些分子量大小及理化性質(zhì)接近的蛋白區(qū)分開來,要用更小的樹脂顆粒以提高分辨率,常用離子交換柱和疏水柱,應(yīng)用時(shí)要綜合考慮樹脂的選擇性和柱效兩個(gè)因素。選擇性指樹脂與目的蛋白結(jié)

的特異性,柱效則是指各蛋白成分逐個(gè)從樹脂上集中洗脫的能力,洗脫峰越窄,柱效越好。僅有好的選擇性,洗脫峰太寬,蛋白照樣不能有效分離。

白的表達(dá):

是指通過模式生物來表達(dá)目的的外源基因蛋白的一種現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù),表達(dá)系統(tǒng)主要是由宿主、外源基因、載體和輔助

成分組成,從而實(shí)現(xiàn)外源基因通過載體在宿主中的表達(dá)。

實(shí)驗(yàn)意義:

1.蛋白表達(dá)技術(shù)在基因工程技術(shù)中占有核心地位,在實(shí)際生產(chǎn)中具有重要的應(yīng)用意義。

2.蛋白表達(dá)技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)具體領(lǐng)域,特別是體內(nèi)的功能研究和蛋白質(zhì)的大規(guī)模生產(chǎn)都需要應(yīng)用。

實(shí)驗(yàn)原理:

1.獲得目的基因;

2.構(gòu)建合適的載體(注意根據(jù)目的基因和純化方式的選擇等多方面因素選擇融合標(biāo)簽) ;

3.將目的基因插入表達(dá)載體中。并通過測(cè)序進(jìn)行驗(yàn)證;

4.載體轉(zhuǎn)化進(jìn)入大腸桿菌等宿主菌后,測(cè)序篩選挑單克隆菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),IPTG誘導(dǎo)靶蛋白的表達(dá);

5.破碎菌體后提取蛋白。并通過融合標(biāo)簽純化得到靶蛋白。

分類:

1.真核表達(dá)系統(tǒng):真核表達(dá)系統(tǒng)主要有昆蟲表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá),其中酵母表達(dá)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞較為常見。

2.無細(xì)胞體外表達(dá)系統(tǒng),又稱為體外翻譯系統(tǒng),通過模擬細(xì)胞的生命活動(dòng)和現(xiàn)象來重現(xiàn)胞內(nèi)蛋白的轉(zhuǎn)錄和翻譯過程。

結(jié)果展示:

原核表達(dá)系統(tǒng)

 

真核表達(dá)系統(tǒng)

 

 

 

無細(xì)胞體外表達(dá)系統(tǒng)

 

Reaction temperature (C)

實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn):

1.實(shí)驗(yàn)周期: 4-6周

2.交付標(biāo)準(zhǔn):目的蛋白、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(試劑、 耗材、實(shí)驗(yàn)步驟)、原始數(shù)據(jù)等。

需確認(rèn)的信息:

1.表達(dá)系統(tǒng)采取方式。

2.純化步驟選擇。

 

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費(fèi)代檢測(cè)

CCK8檢測(cè)

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

 

免疫組化

熒光定量PCR

動(dòng)物模型服務(wù)

流式細(xì)胞檢測(cè)

細(xì)胞增殖

激光共聚焦

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)

細(xì)胞劃痕

鈣離子濃度檢測(cè)

掃描電鏡實(shí)驗(yàn)

microRNA 測(cè)序

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

Taqman探針

ATP/ADP檢測(cè)

 

石蠟/冰凍切片

定點(diǎn)突變

線粒體膜電位(MMP)檢測(cè)

細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

藥理毒理動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

 

免疫共沉淀

真核表達(dá)載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標(biāo)定量(Label-free)實(shí)驗(yàn)



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