Leica TCS SP8 STED 3X超高分辨率激光共聚焦顯微鏡

儀器簡介：

   STED 3X 顯微技術*集成在TCS SP8平臺中。使用TCS SP8 STED 3X，可以獲得共聚焦的精髓。的光學元件與配備有 HyD™的多光譜檢測系統(tǒng)以及徠卡白激光相結合，不但可以增強靈敏度和對比度，還可同時降低激光照射功率。因此，即使是染色不佳的樣品，也可以得到真實的超高分辨率光學切片圖像。共振掃描技術輔以門控STED，幫助您獲得*的超高分辨率活細胞圖像。12kHZ 高速掃描鏡能夠在zui快的速度下，以512×16格式記錄多達420fps超高分辨率圖像。同時也可以利用STED-FCS（STED-熒光相關光譜）進行單分子檢測（SMD）。徠卡創(chuàng)新技術相輔相成，受益無限。

三維的STED-所有維度的超高分辨率，依靠TCS SP8 STED 3X，您可以根據您的需要自由設計PSF，從而選擇XY和Z方向上的*分辨率。

多色成像-在整個光譜范圍上的超高分辨率 TCS SP8 STED 3X可提供多條STED激光線。更多的熒光染料可以被用于STED成像。

活細胞成像-高速超高分辨率成像，門控STED提高了染料的光穩(wěn)定性，并且提高了系統(tǒng)的活細胞性能。

應用范圍： 

　　主要用于組織切片、活細胞的熒光標記、三維圖像重建分析研究；細胞生物物質、離子的定性、定量、定時和定位分布檢測等，可以在同一張樣品上同時進行多重熒光標記觀察。對活細胞或組織切片進行連續(xù)掃描，可獲得精細的細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統(tǒng)的三維圖像。與普通熒光顯微鏡相比，具有更高對比度、解析度和高靈敏度。 

技術規(guī)格：

• 在x、y和z中靈活可調的直接超分辨率，展示了zui精細的細節(jié)信息。
• 多條STED光線實現了可見光的全光譜超高分辨率成像。
• 門控檢測提高了分辨率以及活細胞性能。
• STED白色物鏡為全光譜范圍提供*色差校正。
• 自動光束校準保證系統(tǒng)的穩(wěn)定性和結果的可靠性。
• 基于TCS SP8的模塊化設計可隨時升級。
• 智能STED向導可直觀地控制實驗。
• 惠更斯反卷積可以從原始數據中獲取更多信息。

STED Key Publications

First publication on STED technology:

Hell, S. W. & Wichmann, J. Breaking the diffraction resolution limit by stimulated emission: stimulated-emission-depletion fluorescence microscopy. Optics letters 19, 780-782, (1994).http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19844443

First biological image:

Klar, T. A., Jakobs, S., Dyba, M., Egner, A. & Hell, S. W. Fluorescence microscopy with diffraction resolution barrier broken by stimulated emission. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 97, 8206-8210, (2000). http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/10899992

STED with genetically encoded marker: GFP

Willig, K. I. et al. Nanoscale resolution in GFP-based microscopy. Nature methods 3, 721-723, (2006).http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16896340

STED with continuous wave laser beams:

Willig, K. I., Harke, B., Medda, R. & Hell, S. W. STED microscopy with continuous wave beams. Nature methods 4, 915-918, (2007). http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17952088

Two-color STED with two STED lines

Donnert, G. et al. Two-color far-field fluorescence nanoscopy. Biophysical journal 92, L67-69, (2007).http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17307826

Iso-STED and two-color STED with one STED line

Schmidt, R. et al. Spherical nanosized focal spot unravels the interior of cells. Nature methods 5, 539-544, (2008).http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18488034

STED-FCS application

Eggeling, C. et al. Direct observation of the nanoscale dynamics of membrane lipids in a living cell. Nature 457, 1159-1162, (2009). http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19098897

Gated STED

Vicidomini, G. et al. Sharper low-power STED nanoscopy by time gating. Nature methods 8, 571-573, (2011).http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21642963

Selected Publications with Leica STED instrument

2016

Qiu, Z. et al. Translation Microscopy (TRAM) for super-resolution imaging. Scientific reports 6, 19993, (2016).http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26822455

Ruge, C. A. et al. Disintegration of nano-embedded microparticles after deposition on mucus: A mechanistic study. Colloids and surfaces. B, Biointerfaces 139, 219-227, (2016). http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26720142

Scheuring, D. et al. Actin-dependent vacuolar occupancy of the cell determines auxin-induced growth repression. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 113, 452-457, (2016).http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26715743

Torreno-Pina, J. A. et al. The actin cytoskeleton modulates the activation of iNKT cells by segregating CD1d nanoclusters on antigen-presenting cells. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 113, E772-781, (2016). http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/26798067