48T/96T 科研用小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒
- 公司名稱 青島捷世康生物科技有限公司
- 品牌
- 型號 48T/96T
- 產(chǎn)地 中國·青島
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2024/11/11 20:49:20
- 訪問次數(shù) 1051
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簡介:
產(chǎn)品編號:SJH-033273
產(chǎn)品名稱:科研用小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒
英文名稱:Mouse intact Parathormone ,i-PTH ELISA Kit
檢測樣本:血清、血漿細(xì)胞上清液、灌洗液。
檢測方法:雙抗夾心法
樣本體積:50-100ul
規(guī) 格:48T/96T
產(chǎn) 地:中國·青島
產(chǎn) 地:國產(chǎn)/進(jìn)口
保存條件:2-8℃下,可放置6個月。
產(chǎn)品用途:僅用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床診斷
保存條件:2-8℃環(huán)境中遮光保存。
其他品牌:
試劑類:SIGMA、AMERSCO、TCI、TRC、美國中草藥
血 清:GIBCO、HYCLONE、四季青、MRC
抗 體:ABCAM、SANTA、CST、BD、華美、RD
在售的科研用小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒的產(chǎn)品優(yōu)勢:
1、本品采用天然抗體包被而成,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便等特點(diǎn)。
2、部分指標(biāo)產(chǎn)品采用進(jìn)口原裝抗體包被,質(zhì)量放心可靠。
3、可提供免費(fèi)打代測服務(wù),山東省內(nèi)可上門取樣。
4、一次購買十盒或一個月累計購買十盒可享受經(jīng)銷商提貨價。
5、可為 自測可戶提供全程。
操作舉例:
科研用小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒ELISA的種類很多,不同ELISA的具體操作過程不*相同,但是基本過程是*的。下面以簡潔競爭ELISA測定黃曲霉毒素B1為例,對ELISA的具體操作過程敘述如下。
抗原包被(antigen coating)將AFB1與牛許晴白蛋白(BSA)的練街舞AFB1-BSA(也可以是卵清蛋白的練街舞AFB1-OV)溶解于0.1mol/L pH9.5的碳酸鹽緩沖液中獎溶液加入酶標(biāo)板的微孔內(nèi),通常每孔加200ul,4℃放置過頁,去除恢復(fù)至室溫,傾去微孔內(nèi)溶液(包被液),已含有0.05%的TWEEN-20的PH7.0、0.05mol/L磷酸緩沖溶液生理鹽水(PBST)滿孔洗滌3次,每次5min,控干,即得到包被有AFB1-BSA的酶標(biāo)板。在這個過程中AFB1-BSA通過物理吸附包被(粘附)在酶標(biāo)板微孔的內(nèi)壁上,沒有包被的抗原被洗滌去除。
包被抗原的濃度對ELISA的測定結(jié)果由較大的影響,濃度過高或過低都會影響測定結(jié)果,如下圖是不同包被濃度時,競爭ELISA的抑制曲線。在圖中可以看出,包被濃度對靈敏度的影響較大,當(dāng)包被濃度為5ug/ml時,靈敏度(zui小檢出量)達(dá)1.57ng/ml,其他濃度的靈敏度都比該濃度的差,這說明5ug/ml是叫合適的包被濃度
從宏觀上看,包被濃度無論是過高還是過低都表現(xiàn)為靈敏度差,但是從微觀上分析,他們的情況是不同的,低包被濃度時,包被抗原的量不足,微孔內(nèi)吸附的抗原量少,可供抗體結(jié)合的抗原決定簇少,從而影響靈敏度高;二高濃度時包被抗原的量過多,微孔內(nèi)吸附的抗原包被抗原進(jìn)一步和抗體結(jié)合,降低了靈敏度,因此只有合適的包被抗原濃度,才能得到的靈敏度。這種關(guān)系見下圖
科研用小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒的封阻 所謂封阻是指酶標(biāo)板被抗原包被后,在微孔中加入一定濃度BSA、OV、明膠或脫脂牛奶等溶液以封阻微孔內(nèi)沒有被抗原包被的空襲,避免抗體非特異性吸附于這些空襲,以提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性,常用的封阻劑包括BSA、OV、明膠和脫脂奶等,其中以脫脂牛奶較為便宜,而且封阻效果和其他幾種封阻劑沒有明顯的差別。
抗原抗體競爭反應(yīng) 在酶標(biāo)板的每個微孔中加入一定量的適當(dāng)稀釋度的抗體(抗血清),同時分別加入一定量的準(zhǔn)溶液用于做標(biāo)準(zhǔn)曲線,混勻,37℃保溫1-2H,包被在酶標(biāo)板上的固定抗原(AFB1-BSA)和添加的AFB1標(biāo)準(zhǔn)品或樣品抽提液中的AFB1游離抗原競爭抗體的結(jié)合位點(diǎn),PBST洗滌扣干3次,游離的抗原抗體符合無被洗滌去除。
酶標(biāo)二抗與抗原抗體復(fù)合物的反應(yīng) 將一定量的適當(dāng)稀釋的酶標(biāo)二抗溶液加入個反應(yīng)孔,37℃保溫1-2h,酶標(biāo)二抗和抗原抗體符合無反應(yīng),形成抗原-抗體-酶標(biāo)二抗的復(fù)合物固定在酶標(biāo)板上,PBST洗滌扣干5次,將有力多余的酶標(biāo)二抗去除。
底物顯色反應(yīng)和吸光值的測定 每孔加反應(yīng)底物100ul(40mg臨本二胺溶于100ml、PH5.0/0.2mol/L檸檬酸0.1mol/l磷酸氫鈉緩沖溶液,加入150ul H2O2,現(xiàn)配現(xiàn)用,37℃保溫保濕,避光反應(yīng)30min,每孔加50ul 2mol/L,H2SO4終止反應(yīng),5min后,以酶聯(lián)免疫測定儀于490nm測吸光度。
科研用小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)elisa試劑盒Elisa競爭抑制曲線 以AFB1標(biāo)準(zhǔn)誤溶液中的AFB1的濃度對數(shù)為橫坐標(biāo),以不同AFB1濃度所對應(yīng)的吸光值和AFB1濃度為零時吸光值的比值的百分?jǐn)?shù)(稱為競爭抑制率)為縱坐標(biāo),繪制ELISA競爭抑制曲線,根據(jù)樣品抽提液的吸光值,利用競爭抑制曲線,計算出樣品中AFB1的含量,上述ELISA的操作過程
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