10606ES TRIeasy總RNA提取試劑
- 公司名稱 翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號(hào) 10606ES
- 產(chǎn)地 上海
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2024/9/4 17:33:26
- 訪問(wèn)次數(shù) 2131
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企業(yè)簡(jiǎn)介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化技術(shù)為驅(qū)動(dòng)，聚焦生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)鏈上游核心原料，從事分子、蛋白和細(xì)胞三大品類生物試劑的研發(fā)、生產(chǎn)與銷售的高新技術(shù)企業(yè)，通過(guò)打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開(kāi)發(fā)路徑，成為國(guó)內(nèi)少數(shù)同時(shí)覆蓋三大品類生物試劑、兼?zhèn)浜诵募夹g(shù)自主研發(fā)能力和規(guī)?；a(chǎn)能力的高新技術(shù)企業(yè)，產(chǎn)品廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究領(lǐng)域、診斷與檢測(cè)領(lǐng)域和生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
主營(yíng)業(yè)務(wù)
公司憑借在蛋白質(zhì)改造和酶進(jìn)化領(lǐng)域的技術(shù)優(yōu)勢(shì)和深耕生物試劑行業(yè)多年積累的豐富經(jīng)驗(yàn)，構(gòu)建了品質(zhì)優(yōu)良、類型齊全、種類豐富的產(chǎn)品管線。自公司成立以來(lái)，公司研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的生物試劑超過(guò)3000種，涵蓋分子、蛋白、細(xì)胞三大品類的生物試劑，能夠滿足客戶多種類型生物試劑的一體化采購(gòu)需求。公司核心產(chǎn)品覆蓋qPCR系列、NGS系列、逆轉(zhuǎn)錄系列、核酸提取與純化系列、PCR系列、分子克隆系列、體外轉(zhuǎn)錄系列、抗體、蛋白純化系列、蛋白分析系列、重組蛋白、細(xì)胞分析系列、細(xì)胞培養(yǎng)系列、細(xì)胞轉(zhuǎn)染系列、報(bào)告基因檢測(cè)系列等多個(gè)品類的生物試劑，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究、診斷檢測(cè)和生物醫(yī)藥等領(lǐng)域。
發(fā)展歷程
榮譽(yù)資質(zhì)
翌圣生物通過(guò)申請(qǐng)商標(biāo)和軟件著作權(quán)的方式保障核心技術(shù)和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力，不斷加強(qiáng)公司品牌建設(shè)。截至2022年3月31日，公司已經(jīng)獲得授權(quán)18項(xiàng)（其中發(fā)明14項(xiàng)、實(shí)用新型1項(xiàng)、外觀設(shè)計(jì)3項(xiàng)）和45項(xiàng)與生物試劑相關(guān)的軟件著作權(quán)，擁有經(jīng)國(guó)家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局商標(biāo)局核準(zhǔn)的注冊(cè)商標(biāo)權(quán)37項(xiàng)以及4項(xiàng)境外注冊(cè)商標(biāo)，是國(guó)家高新技術(shù)企業(yè)和上海市專精特新企業(yè)。
創(chuàng)新平臺(tái)
經(jīng)過(guò)多年的產(chǎn)品研發(fā)技術(shù)經(jīng)驗(yàn)的沉淀以及持續(xù)的研發(fā)創(chuàng)新，翌圣生物積極開(kāi)展“產(chǎn)學(xué)研”合作，與擁有生物催化與酶領(lǐng)域國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的湖北大學(xué)、擁有教育部工業(yè)生物領(lǐng)域重點(diǎn)研究基地的江南大學(xué)展開(kāi)合作，優(yōu)化生物試劑關(guān)鍵原料的生產(chǎn)和表達(dá)工藝。翌圣生物以基因工程技術(shù)、生物信息技術(shù)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)、生化分析技術(shù)等生命科學(xué)領(lǐng)域的共性生物技術(shù)為基礎(chǔ)，建立了六大核心技術(shù)平臺(tái)——雙向分子酶理性設(shè)計(jì)與定向進(jìn)化平臺(tái)、密度發(fā)酵與超潔凈純化平臺(tái)、分子診斷試劑關(guān)鍵原料研發(fā)平臺(tái)、高通量測(cè)序建庫(kù)試劑創(chuàng)新研發(fā)平臺(tái)、高性能單克隆抗體研發(fā)平臺(tái)和mRNA醫(yī)藥應(yīng)用研發(fā)平臺(tái)，目前已經(jīng)自主研發(fā)出20項(xiàng)核心技術(shù)，打通分子酶、蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞的技術(shù)開(kāi)發(fā)路徑，覆蓋技術(shù)研發(fā)、產(chǎn)品升級(jí)、規(guī)模生產(chǎn)和質(zhì)量控制等生物試劑研發(fā)和生產(chǎn)的各關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
工業(yè)化生產(chǎn)
翌圣生物擁有按照準(zhǔn)GMP 標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)運(yùn)營(yíng)的工業(yè)化生產(chǎn)基地，配有噸級(jí)發(fā)酵線、工業(yè)級(jí) AKTA 純化線和全自動(dòng)包裝線。同時(shí)，公司通過(guò)了ISO 13485:2016質(zhì)量管理體系認(rèn)證，從原料控制、生產(chǎn)管理、質(zhì)檢管控、倉(cāng)儲(chǔ)運(yùn)輸?shù)葘?duì)生產(chǎn)線進(jìn)行360度管理監(jiān)督，保證產(chǎn)品過(guò)程的可控制性及可追溯性，竭盡全力為您提供可靠的產(chǎn)品。
客戶服務(wù)
翌圣生物憑借優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的產(chǎn)品質(zhì)量、高效及時(shí)的響應(yīng)能力、快速穩(wěn)定的交付能力和周到完備的售后服務(wù)獲得了眾多科研用戶和工業(yè)用戶的認(rèn)可，為檢測(cè)公司、治療公司、工具類公司和科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)室提供應(yīng)用于科學(xué)研究、體外診斷、基因測(cè)序、生物醫(yī)藥等的生物試劑。與中國(guó)科學(xué)院、清華大學(xué)、北京大學(xué)、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)、浙江大學(xué)等頂尖科研院所和華大基因、恒瑞醫(yī)藥、藥明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工業(yè)客戶建立了穩(wěn)定、緊密的合作關(guān)系，公司產(chǎn)品被多次使用在Nature、Science、Cell等國(guó)際頂級(jí)期刊論文發(fā)表中。
公司企業(yè)文化
幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值，讓世界更健康更快樂(lè)
◎ 成為生命科學(xué)工具領(lǐng)域全球Top⑩
◎ 具備驅(qū)動(dòng)產(chǎn)業(yè)變革的技術(shù)創(chuàng)新能力
◎ 擁有一支持續(xù)學(xué)習(xí)型的翌圣鐵軍
翌圣生物始終秉承“幫助客戶創(chuàng)造價(jià)值，讓世界更健康更快樂(lè)”的使命，專注于技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)品升級(jí)，不斷拓展核心技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，為客戶提供更為的產(chǎn)品與服務(wù)，助力我國(guó)打造自主可控的生物試劑產(chǎn)業(yè)鏈。同時(shí)，翌圣生物將進(jìn)一步推進(jìn)國(guó)際化戰(zhàn)略，繼續(xù)布局和拓展海外市場(chǎng)，為全球生物試劑產(chǎn)業(yè)發(fā)展貢獻(xiàn)力量。
分子生物學(xué)試劑，細(xì)胞生物學(xué)試劑，免疫學(xué)試劑，蛋白組學(xué)試劑等
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 10606ES60 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
TRIeasy總RNA提取試劑(TRIeasy Total RNA Extraction Reagent)
TRIeasyTM Total RNA Extraction Reagent是一種適用于各種動(dòng)植物、細(xì)菌組織、細(xì)胞的總RNA抽提試劑，具有*的裂解能力，可在短時(shí)間內(nèi)裂解細(xì)胞和組織樣本，并有效抑制樣本中RNA的降解，保持RNA的完整性。樣品在該試劑中能夠充分裂解，之后加入氯仿離心分層，形成上清層、中間層和有機(jī)層(鮮紅色下層)，RNA分布在上層水相中，收集上清層后，經(jīng)異丙醇沉淀便可得到總RNA。提取的總RNA純度高，基本不含蛋白質(zhì)及基因組DNA，可直接用于Northern、點(diǎn)雜交、mRNA純化、體外翻譯、RT-PCR、poly(A)+選擇、RNA酶保護(hù)分析以及構(gòu)建cDNA文庫(kù)等多種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
此外，樣品中的DNA和蛋白也能以沉淀的方式還原。乙醇沉淀能析出中間層的DNA，而在有機(jī)層中加入異丙醇能沉淀出蛋白。
本品操作簡(jiǎn)單快速，所有操作可在一小時(shí)內(nèi)完成。對(duì)少量的組織(50-100 mg)和細(xì)胞(5×106)以及大量的組織(≥1 g)和細(xì)胞(>107)均有較好的裂解效果。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸。4℃避光保存，有效期一年。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品中含有苯|酚，具有毒性和腐蝕性。如果吸入體內(nèi)、接觸皮膚、吞食等會(huì)引起中毒、灼傷及其他身體傷害。使用時(shí)應(yīng)穿戴防護(hù)物，如防護(hù)|服裝、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接觸到眼睛時(shí)，應(yīng)立即用大量的水沖洗并前往醫(yī)院治療。
2. 請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作，避免RNase污染。
3. 需自備氯仿、異丙醇（新開(kāi)封或提取RNA專用）、75%乙醇 (DEPC處理水配制)、DEPC和DEPC處理水。
4. 樣品用Total RNA Extraction Reagent勻漿后，如果不加入氯仿進(jìn)行下游實(shí)驗(yàn)，可先-70℃凍存，可保存一個(gè)月以上。
5. RNA沉淀在75%乙醇中，4℃可保存1周，-20℃可保存1年。
6. RNA半衰期比較短，易降解，建議抽提后盡快進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
參考用量
表1 每毫升Total RNA Extraction Reagent能夠充分裂解的最大樣本量
樣本類型 | 樣本使用量 |
貼壁細(xì)胞 | 10 cm2培養(yǎng)面積 |
懸浮動(dòng)植物細(xì)胞或酵母細(xì)胞 | 5×106-1×107個(gè) |
細(xì)菌 | 107個(gè) |
動(dòng)物組織 | 50-100 mg |
植物組織(多糖和多酚含量不高的) | 50-100 mg |
注：過(guò)多的樣本量可能會(huì)導(dǎo)致裂解不充分，并使產(chǎn)物純度降低。
操作流程
1. 樣品的處理
1) 樣品勻漿
A. 貼壁細(xì)胞
棄去培養(yǎng)液，直接往直徑3.5 cm的培養(yǎng)板中加入1 mL Total RNA Extraction Reagent，覆蓋并反復(fù)吹打裂解細(xì)胞。
注：1. 依據(jù)培養(yǎng)板的面積而不是細(xì)胞的數(shù)量來(lái)決定Total RNA Extraction Reagent的所需量（每10 cm2 加1 mL）。
2. 加入Total RNA Extraction Reagent量不足時(shí)，會(huì)導(dǎo)致DNA污染。
3. 貼壁細(xì)胞往往不能*從培養(yǎng)瓶（皿）脫落，這并不意味著裂解不*。此時(shí)，細(xì)胞膜實(shí)際已*裂開(kāi)，并釋放RNA，繼續(xù)后續(xù)實(shí)驗(yàn)即可。
B. 懸浮細(xì)胞
離心收集細(xì)胞沉淀，每5×106-1×107個(gè)細(xì)胞加入1 mL Total RNA Extraction Reagent，用移液器反復(fù)吹打。
注：加入Total RNA Extraction Reagent前應(yīng)避免洗滌細(xì)胞，否則會(huì)增加mRNA降解的可能性。裂解某些酵母和細(xì)菌可能需要使用勻漿器。
C. 動(dòng)、植物組織
取-70℃凍存動(dòng)物組織在液氮中充分研磨，按照表1加入適當(dāng)量Total RNA Extraction Reagent混勻?；蛉⌒迈r動(dòng)植物組織盡量剪碎，加入適當(dāng)量Total RNA Extraction Reagent，勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。
注：樣品體積不要超過(guò)加入Total RNA Extraction Reagent體積的10%。
2) 將勻漿樣品劇烈震蕩后在室溫條件下放置5分鐘以使核蛋白體*解離。
3) （可選）4℃，12000 g 離心10 min，取上清。
注：離心可去除樣品中較多蛋白質(zhì)、脂肪、多糖或肌肉，植物的塊莖結(jié)節(jié)等。離心后的沉淀中包含有細(xì)胞外膜、多糖以及高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織樣品時(shí)，上層是大量油脂應(yīng)盡量去除，取澄清的勻漿液進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2 總RNA提取
1) 向上述裂解液中加入1/5體積氯仿（如每1 mL Total RNA Extraction Reagent加入0.2 mL氯仿）。蓋緊離心管蓋，劇烈震蕩15 sec，室溫靜置2-3 min。
2) 4℃，12000 g 離心10-15 min。
注：1. 離心后混合物可分3層：上層無(wú)色水樣層，中間層，下層紅色有機(jī)苯|酚氯仿層。RNA存在于水樣層中。
2. 上層容量約為所加Total RNA Extraction Reagent總量的50-60%。如加入1 mL Total RNA Extraction Reagent，上層水相約為500-600 μL。建議吸取400-500 μL，以防吸到中間層造成DNA污染。
3. 有機(jī)相和中間層是蛋白和DNA，可用于后續(xù)抽提。
3) 小心吸取上層水相至新離心管中，加入1/2體積異丙醇（如每1 mL Total RNA Extraction Reagent加入0.5 mL 異丙醇）。顛倒混勻后室溫放置10 min。
4) 4℃，12000 g 離心10 min。
注：RNA沉淀在離心前通常不可見(jiàn)，離心后在管側(cè)和管底形成膠狀沉淀。
5) 小心棄去上清，加入等體積 75%乙醇（DEPC水配制，如每1 mL Total RNA Extraction Reagent加入1 mL 75%乙醇）。渦旋充分洗滌，并輕彈管底，讓沉淀懸浮起來(lái)。
6) 4℃，7500 g 離心5 min，棄上清，注意不要丟失RNA沉淀。
注：剩余的少量液體可短暫離心，然后用槍頭吸出，注意不要吸到沉淀。
7) 室溫放置空氣干燥5-10 min。加入30-100 μL 無(wú)RNase水溶解RNA，待*溶解后，取少量檢測(cè)，其余溶液-70℃保存。
注：RNA沉淀不能*干燥，過(guò)分干燥會(huì)導(dǎo)致RNA溶解度降低。
3 產(chǎn)物檢測(cè)
A. RNA完整性檢測(cè)
1) 取1 μL RNA加入適當(dāng)RNA loading buffer，混勻。
2) 進(jìn)行電泳檢測(cè)。若出現(xiàn)清晰的三條帶，證明RNA完整性較好。
B. RNA純度檢測(cè)
檢測(cè)260 nm，280 nm OD值，并計(jì)算A260/A280比值。純的RNA的比值應(yīng)在2.0左右。
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Murine RNase inhibitor (40U/μl) 鼠源RNase抑制劑HOT | 10603ES05/10/20 | 2/10/20 KU |
DEPC-treated Water (DNase、RNase free) | 10601ES76 | 500 mL |
DEPC 焦碳酸二乙酯 | 10602ES25 | 25 mL |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit HOT | 11119ES60 | 100 T |
Hifair® II 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(gDNA digester plus) HOT | 11123ES60 | 100 T |
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