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檢測家|賽默飛液相色譜儀、色譜柱如何維護和使用?

來源:杭州攜測信息技術有限公司   2016年07月28日 10:10  

賽默飛世爾科技進入中國已超過30年,結合國內(nèi)市場的需求和*技術,研發(fā)適合中國的技術和產(chǎn)品,Thermo Fisher液相色譜儀也被眾多的實驗室用戶選擇使用。

如何保證儀器更長的使用壽命?如何解決使用過程中出現(xiàn)的常見故障?這對于實驗室用戶來說,十分關鍵。下面,小編整理全面資料,希望對實驗室用戶朋友們有所幫助。

Thermo Fisher 液相色譜維護時間表

如何保證良好的柱性能與柱壽命?

1. 認證閱讀色譜柱使用說明書;使用填充良好的色譜柱;使用保護柱及在線過濾器;盡量減少壓力波動,避免機械及熱沖擊。

2. 經(jīng)常以強溶劑沖洗色譜柱;充分過濾樣品及流動相,盡量避免雜質(zhì)微粒與強保留成分;用穩(wěn)定的固定相(C18zui穩(wěn)定);在中等PH值操作(6~8),用有機緩沖溶液;色譜柱使用溫度小于40℃。

3. 硅膠基質(zhì)的的色譜柱,應保持流動相的PH值范圍在3.0~8.0;在水流動相與緩沖溶液中加200ppm的疊氮鈉;流動相中含有緩沖溶液,應注意應95∶5的水及有機溶劑過渡,有機溶劑不能低于5%;隔夜或貯存時,沖洗掉鹽和緩沖液,用純有機溶劑流動相保存(乙晴)。

?如何解決色譜柱使用過程中的問題?

一、色譜峰(不對稱)拖尾的原因

1. 色譜柱本身填裝問題,篩板堵塞或填料塌陷;

2. 柱頭有污染;

3. 樣品超載;

4. 樣品溶劑不合適;

5. 柱外效應;

6. 化學或二次保留(硅羥基)效應;

7. 緩沖容量不足或不合適;

8. 重金屬污染。

?二、如何解決峰形拖尾的問題

A.與化學有關的拖尾問題

1.流動相中,加入30mM的三乙胺(用與堿性化合物)或醋酸胺(用與酸性化合物),未

知化合物加醋酸三乙胺;

2.如仍然拖尾,將三乙胺換為二甲基辛胺(或醋酸二甲基辛胺);

3.降低進樣量至《1ug。

B.與色譜柱有關的拖尾問題

1.如柱頭處有強保留的樣品組分積聚,反相柱可用20倍柱體積的96%的二碌甲烷與4%甲

醇,加1%氫氧化銨混合液沖洗,正向柱可用甲醇沖洗。

2.使用保護柱

C.與HPLC 系統(tǒng)有關的峰拖尾和峰加寬

1.進樣體積過大,(通常≤25uL);

2.進樣閥與色譜柱及檢測器之間的管路體積過大(*連接管應《20cm,內(nèi)徑為0.007〃);

3.檢測器流通池的體積過大。

三、如何儲存色譜柱

1.防止緩沖溶液和水溶液流動相產(chǎn)生微生物,做到流動相用多少配多少,或在水流動相中加200ppm的疊氮鈉以抑制細菌成長(一定當心其毒性和潛在的爆炸性);或在流動相中加

20%的有機改性劑,也可抑制微生物生長,有機改性劑還有助于流動相脫氣。

2.盡可能將色譜柱貯存于100%有機溶劑(乙晴)中,避免在緩沖溶液中保存。

3.使用緩沖溶液后的色譜柱,應用15~20倍柱體積的不含緩沖劑的同種水—有機溶劑流動相沖洗色譜柱,后換成100%有機溶劑儲存。

4.避免用純凈水沖洗鍵合致密的C18柱。

5.將色譜柱的兩端用堵頭擰好,以免柱床填料干裂。

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