英文品名:5'Nucleotidase Assay Kit
貨號(hào):80229
廠商品牌:Crystalchem
液體類標(biāo)本：
標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測(cè)種類。
◇      血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◇      血漿：
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◇      尿液、胸腹水、腦脊液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◇      細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◇      組織標(biāo)本：
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

細(xì)胞名稱 　
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣；圓形　
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)　
特征特性 該細(xì)胞是由綿羊紅細(xì)胞免疫的BALB/c小鼠脾細(xì)胞和P3X63Ag8骨髓瘤細(xì)胞融合得到的。該細(xì)胞不分泌免疫球蛋白，對(duì)20 μg/ml的8-氮鳥piao呤有抗性，對(duì)HAT比較敏感；該細(xì)胞可以作為細(xì)胞融合時(shí)的B細(xì)胞組分用于制備雜交瘤；鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS　
傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS　
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）　
STR -
同工酶
染色體 45~80
使用權(quán)限 A類
參考文獻(xiàn) 小鼠骨髓瘤細(xì)胞；Sp2/0-Ag14
圖片 PUMC——小鼠骨髓瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14 [SP20]　

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