端粒背景介紹
端粒(Telomeres):是真核生物線性染色體末端的非編碼串聯(lián)重復(fù)性(TTAGGG)n陣列。端??s短是啟動(dòng)細(xì)胞衰老的分子鐘?;?0萬(wàn)人的研究表明,端粒長(zhǎng)度與年齡相關(guān),至此端粒長(zhǎng)度成為衰老的重要標(biāo)志物之一。2009年,諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)?lì)C發(fā)給了端粒研究領(lǐng)域的三位科學(xué)家——Elizabeth、Carol和Jack,以表彰他們發(fā)現(xiàn)了端粒和端粒酶是如何保護(hù)染色體末端的機(jī)理。
端粒長(zhǎng)度檢測(cè)技術(shù)主要分為TRF與Q-PCR兩種。上海翼和生物端粒長(zhǎng)度檢測(cè)服務(wù)采用了自主研發(fā)的qPCR法,克服了單拷貝基因內(nèi)參測(cè)量不準(zhǔn)確、內(nèi)參與端粒分管檢測(cè)到的孔間差異、缺乏中國(guó)人群的樣本數(shù)據(jù)庫(kù)等困難。翼和生物技術(shù)來(lái)源于上海東華大學(xué)合作研發(fā)的課題、并受到國(guó)際表型組計(jì)劃的開(kāi)發(fā)支持,以單管雙重?zé)晒飧咝蕯U(kuò)增,體系穩(wěn)定性強(qiáng),消除孔間差異,減小誤差,增設(shè)新型高拷貝內(nèi)參基因,穩(wěn)定性好與TRF結(jié)果一致。
應(yīng)用領(lǐng)域:端粒相關(guān)疾病的篩查和診斷,人體衰老指標(biāo)檢測(cè),精準(zhǔn)醫(yī)療研究與應(yīng)用等。
上海翼和生物端粒長(zhǎng)度檢測(cè)服務(wù)原理
實(shí)驗(yàn)原理:
1、精確設(shè)計(jì)的多重PCR引物,從基因組DNA中端粒
2、優(yōu)化的內(nèi)參基因,使端粒與內(nèi)參差值縮小
3、雙色熒光標(biāo)記不同基因,使得單管可測(cè)
4、利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀檢測(cè)擴(kuò)增信號(hào)
5、根據(jù)Ct值與中國(guó)人群端粒長(zhǎng)度數(shù)據(jù)庫(kù),確定端粒長(zhǎng)度
上海翼和生物端粒長(zhǎng)度檢測(cè)服務(wù)流程
上海翼和生物端粒長(zhǎng)度qPCR技術(shù)比較
上海翼和生物服務(wù)優(yōu)勢(shì)
優(yōu)勢(shì) | 指標(biāo) | 優(yōu)勢(shì) | 指標(biāo) | |
樣本DNA濃度 | 20ng/ul | 均一性 | 新型高拷貝內(nèi)參基因 | |
端粒數(shù)據(jù)庫(kù) | 中國(guó)人群數(shù)千例 | 穩(wěn)定性 | 與金標(biāo)準(zhǔn)TRF一致 | |
樣本數(shù) | 1-10000份 | 重復(fù)性 | ~ |
樣本要求
送樣要求
1.基因組DNA樣本:DNA質(zhì)量要求260/280吸光度值1.8-2.0之間,瓊脂糖電泳帶型不彌散;濃度要求:≥20ng/μl;體積:≥20μl。建議干冰郵寄,如無(wú)法采購(gòu)干冰,可放置足夠量的冰袋。
2.血液樣本:血液樣本必須確保冷凍之后再保存和寄送,并確保抗凝血管/離心管蓋子旋緊并用封口膜密封。送樣量:體積>500ul,需用抗凝劑抗凝。送樣過(guò)程中請(qǐng)注意保持低溫,干冰或足量冰袋,防止DNA降解。血液抗凝劑不建議使用肝素,可以使用EDTA。
3.唾液樣本,按翼和唾液采集說(shuō)明書(shū)進(jìn)行,建議現(xiàn)采現(xiàn)寄;樣本包裹中放置冰袋運(yùn)輸,建議順豐寄送。
結(jié)果提供
1、實(shí)驗(yàn)報(bào)告,含實(shí)驗(yàn)材料與方法,所用引物序列等等
2、結(jié)果匯總,Ct值與T/S值。備注:健康檢測(cè)僅提供年齡預(yù)測(cè)。
上海翼和應(yīng)用生物技術(shù)有限公司
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