外包服務 高爾基染色

高爾基染色（含多層染色）

一.實驗步驟
1、取材固定：將老鼠殺死后，立刻取腦組織置于4%的多聚甲醛液中固定24h以上。
2、高爾基染色：用生理鹽水將腦組織輕輕漂洗幾遍，將需要的實驗部位切成2-3mm厚的腦組織塊，高爾基染液將腦組織塊*浸沒，放置陰涼通風處避光處理14天，浸泡48h后，換一次新染液，之后每隔3天換一次新染液。
3、組織塊脫水：將組織塊取出，置于15%的蔗糖溶液中4℃且避光條件下脫水約1天，取出組織塊，置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光條件下脫水2天。
4、顯影：將組織塊取出，蒸餾水洗1min，濃氨水處理45min，蒸餾水洗1min，定影液處理45min，蒸餾水洗1min。
5、脫水冰切封片：置于30%的蔗糖溶液中4℃且避光條件下脫水2-3天，冰凍切片100um，甘油明膠封片，拍照保存結果。
6、顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。
二、結果判讀：
神經元呈黑色，膠質細胞呈黑色，背景灰色或者棕黃色。
三、注意事項：
1、染液配制的量需要根據實際情況來定，配制過多易造成浪費。
2、染液一定要避光保存，并且實驗過程中的每一步操作都要求避光。
3、染色完成后，若客戶需要返還組織塊，將剩余組織塊放在30%的蔗糖中4℃避光運輸。

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