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AO染色法(丫啶橙染色法)檢測細(xì)胞凋亡

時間:2021/11/1閱讀:3086
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材料與儀器

【試劑】pH4.8~6.0 Tritionx-100的PBS緩沖液, AO染料:將AO染料溶于含1%TritionX-100的PBS中,終濃度為6μg/ml,含Rnase100μg/ml,避光保存。 【儀器】熒光顯微鏡

實驗步驟

制備活細(xì)胞懸液106 /ml; 取95μl細(xì)胞懸液,加5μl的AO染液混合、避光作用10min; 加入5ml PBS,1500r/min離心5min,棄上清,重復(fù)洗滌2次; 重懸細(xì)胞,吸一滴滴于玻片上并用蓋玻片封片;

要點

在熒光顯微鏡下,選用515nm激發(fā)光鏡檢:AO染色細(xì)胞DNA呈黃色或黃綠色。當(dāng)細(xì)胞凋亡時,染色呈致密濃染的黃綠色熒光或見黃綠色碎片。


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